本申请涉及一种分离的核酸分子,其包括编码CAG启动子的核苷酸序列、编码第一蛋白的核苷酸序列、编码第二蛋白的核苷酸序列和编码BGH信号位点的核苷酸序列,其中所述第一蛋白和第二蛋白各自不同地选自下组:CYP4V2蛋白和RdCVF蛋白,其中编码所述CYP4V2蛋白的核苷酸序列包含SEQ ID NO:168的核苷酸序列,编码所述RdCVF蛋白的核苷酸序列包含SEQ ID NO:167的核苷酸序列。
本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP76AK5v2的编码基因序列;本发明所提供的CYP76AK5v2基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP76AK5v2在丹参组织中的表达情况,发现其在丹参根和根周皮高丰度表达;构建了CYP76AK5v2‑RNAi载体及CYP76AK5v2‑过表达(CYP76AK5v2‑oe)载体,通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系;化学检测分析发现,在CYP76AK5v2‑RNAi株系中,丹参酮类化合物含量升高,而在CYP76AK5v2‑oe株系中,丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP76AK5v2具有反调控丹参酮类化合物生物合成的功能,可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究有助于解析植物次生代谢途径分子机制,为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
烟粉虱吡虫啉抗性相关CYP6CM1v2启动子及活性分析属生物工程技术领域,本发明所述启动子序列如SEQ ID NO:1所示,其中SEQ ID NO:1的-1bp至-1319bp区为烟粉虱吡虫啉抗性相关CYP6CM1v2启动子的DNA序列,SEQ ID NO:1的+1bp至+131bp区为烟粉虱P450基因CYP6CM1v2的5’非翻译区的DNA序列;本发明可用于真核基因的高效表达,应用于获得低丰度基因研究,使其获得高水平