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[发明专利]利用重组大肠杆菌发酵生产冰核蛋白的方法-CN201910199895.9有效
发明人：苏毅;姜旭;晏礼明 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-03-15 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种利用重组大肠杆菌发酵生产冰核蛋白的方法。所述重组大肠杆菌是将冰核蛋白基因或冰核蛋白基因表达盒，通过质粒导入大肠杆菌中或通过基因工程手段整合到大肠杆菌染色体上构建得到的，且所述重组大肠杆菌中不含有抗生素抗性基因。
利用重组大肠杆菌发酵生产核蛋白方法

[发明专利]一种可溶性表达亚油酸异构酶的重组大肠杆菌及其应用-CN201810494394.9在审
发明人：陈卫;张白曦;黄昕畑;陈海琴;赵建新;张灏 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-05-22 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种可溶性表达亚油酸异构酶的重组大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将编码麦芽糖结合蛋白MBP的基因malE插入至亚油酸异构酶PAI的基因pai的上游，构建含有MBP‑PAI融合表达载体的重组大肠杆菌。所得重组大肠杆菌BL21(DE3)(pET24a‑Mpai)的PAI的表达量远高于现有技术记载的其他菌株的表达量，重组蛋白MBP‑PAI大部分以可溶蛋白的形式存在。可见，证明本发明的重组大肠杆菌能够高效可溶性表达MBP‑PAI，解决其包涵体过多的问题。
重组大肠杆菌亚油酸异构酶可溶性表达表达量生物工程技术领域融合表达载体编码麦芽糖技术记载结合蛋白可溶蛋白重组蛋白包涵体基因构建菌株应用上游

[发明专利]一种精准定量调控大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法及应用-CN202210258118.9有效
发明人：陈献忠;杨海泉;官剑民;沈微;夏媛媛;曹钰 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-16 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法及应用，属于基因工程与发酵工程领域。本发明中构建的色氨酸操纵子结合温敏阻遏系统(TAT)共表达系统可实现大肠杆菌生长前期稳定正常生长，并通过控制发酵温度，调节结构基因的表达水平，以达到调控D,D‑羧肽酶实时表达量、有效促进重组蛋白胞外分泌的效果本发明构建的共表达系统可提高重组大肠杆菌外膜的渗透性，提高了重组蛋白胞外分泌水平，对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
一种精准定量调控大肠杆菌重组蛋白外分泌水平方法应用

[发明专利]一种高效表达gmd、wcaG的重组大肠杆菌及构建方法-CN202210890832.X在审
发明人：刘振云;郭涛;程丰伟 -专利权人：苏州一兮生物技术有限公司
申请日： 2022-07-27 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效表达gmd、wcaG的重组大肠杆菌的构建方法，以大肠杆菌为出发菌株，敲除其生物合成可拉酸的代谢基因wcaA,wcaB,wcaC,wcaD,wcaE和wcaF，并在gmd基因之前敲入gmd‑wcaG基因的表达调控组件，获得高效表达gmd、wcaG的重组大肠杆菌；所述gmd‑wcaG基因的调节组件包括启动子和核糖体结合位点。所述出发菌株为携带gmd‑wcaG基因的大肠杆菌。本发明适用于所有具有gmd‑wcaG基因的大肠杆菌，本底菌株可选项较多。与未改造的大肠杆菌相比，本发明构建的菌株gmd‑wcaG基因表达更强，并且由于是基因组改造，相比于现有的质粒优化表达更稳定。
一种高效表达 gmd wcag 重组大肠杆菌构建方法

[发明专利]大肠杆菌OmpA作为动物免疫调节剂的应用-CN200710027502.3无效
发明人：李惠;黄传钟;林向民;王三英;彭宣宪 -专利权人：中山大学
申请日： 2007-04-11 - 公布日： 2008-07-23 - 主分类号： A61K39/108 文献下载
摘要：本发明涉及大肠杆菌(E.coli)表达的一种重组外膜蛋白A(outer membrane protein A，OmpA)的免疫调节功能。本发明通过大肠杆菌OmpA基因缺失株的免疫调节作用，纯化大肠杆菌OmpA的免疫增强作用，大肠杆菌OmpA抗血清被动免疫增强作用等试验，提供了大肠杆菌OmpA具有调节动物免疫功能，提高动物抗病能力的功效。
大肠杆菌 ompa 作为动物免疫调节剂应用

[发明专利]蝎抗心律失常肽重组大肠杆菌及其构建方法-CN02115488.0无效
发明人：李文鑫;彭方;曾宪春;何小华;朱顺义 -专利权人：武汉大学
申请日： 2002-01-30 - 公布日： 2002-11-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种蝎抗心律失常肽重组大肠杆菌及构建方法,蝎抗心律失常肽重组大杆菌EscherichiacoliBL21(pGEX/BmKIM)CCTCCNOM201046。设计PCR上游和下游引物,用PCR从东亚钳蝎毒cDNA库中扩增抗心律失常肽基因片段,通过表达载体转化到大肠杆菌,其特征是设计的PCR引物含小肠激酶酶切位点,用PCR扩增的抗心律失常肽基因片段经过限制性内切酶酶切,克隆到pGEX－5x－1表达载体中,转化到大肠杆菌BL21中获得重组大肠杆菌。该发明能用于大量生产可溶、具有抗心律失常活性的重组肽。
心律失常重组大肠杆菌及其构建方法

[发明专利]一种大肠杆菌戊二胺响应启动子及应用-CN202210654193.7在审
发明人：王静;马定;廖杨;郭元柯;杨悦;唐意博;陈可泉 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-06-10 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种大肠杆菌戊二胺响应启动子及应用。从头合成谷氨酸棒状杆菌中的丙酮酸羧化酶并在大肠杆菌中异源表达，PCR拷贝大肠杆菌中戊二胺响应启动子PgrcA及赖氨酸脱羧酶cadA，构建了PcadR‑PgrcA‑pyc‑trc‑cadA‑rrnB重组质粒该质粒在赖氨酸高产的大肠杆菌中生长良好，基因表达稳定，葡萄糖被高效利用，能够响应戊二胺，发酵周期短，副产物少。从发酵结果可以看出，重组的大肠杆菌KAGPC的戊二胺产量较对照组有显著提高。
一种大肠杆菌戊二胺响应启动子应用

[发明专利]大肠杆菌重组菌及利用大肠杆菌重组菌生产3,4-二羟基苯乙醇的方法-CN202211123450.0在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：杭州唯铂莱生物科技有限公司
申请日： 2022-09-15 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了大肠杆菌重组菌及利用大肠杆菌重组菌生产3,4‑二羟基苯乙醇的方法，大肠杆菌重组菌共表达四种酶，分别为酪氨酸酶、L‑氨基酸氧化酶、酮酸脱羧酶和醇脱氢酶；利用大肠杆菌重组菌，以酪氨酸为底物生产3,4
大肠杆菌重组利用生产羟基乙醇方法

[发明专利]来源于疏棉状嗜热丝孢菌的酯酶、基因、载体、工程菌及应用-CN201310684640.4有效
发明人：郑裕国;郑仁朝;黎小军;沈寅初 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2013-12-13 - 公布日： 2014-04-02 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种来源于疏棉状嗜热丝孢菌的酯酶、基因、载体、工程菌及在制备(3S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸中的应用，所述酯酶的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示；本发明酯酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒，转化至大肠杆菌菌株中，获得重组大肠杆菌。该重组大肠杆菌含有酯酶，可以利用重组大肠杆菌或纯化的酯酶为催化剂进行生物催化生产普瑞巴林关键手性中间体。
来源于疏棉状嗜热丝孢菌基因载体工程应用

[发明专利]重组大肠杆菌固定化细胞及在利用木糖母液生产木糖醇中的应用-CN201810839980.2有效
发明人：金利群;郑裕国;柳志强;许韦;徐建妙;贾东旭 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2018-07-27 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组大肠杆菌固定化细胞及在利用木糖母液生产木糖醇中的应用，所述固定化细胞是将木糖还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因共同导入宿主大肠杆菌，获得含有双酶基因的重组大肠杆菌，然后将重组大肠杆菌进行发酵培养，取湿菌体细胞进行固定化，获得重组大肠杆菌固定化细胞。本发明重组基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pCDFDuet‑1‑XR‑GDH实现了木糖还原酶和葡萄糖脱氢酶双酶共表达，其双酶偶联体系不需要额外的辅酶添加，生产方法简单、高效，时空产率远高于发酵法，木糖母液中木糖转化率达到99％以上，利用葡萄糖为辅底物，该重组细胞催化200g/L木糖，反应30h后，木糖醇产率为100％。
重组大肠杆菌固定细胞利用母液生产木糖醇中的应用

[发明专利]一种提高大肠杆菌发酵生产番茄红素产量的方法-CN201410311356.7有效
发明人：黄磊;濮悦;徐志南;蔡谨 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-07-02 - 公布日： 2017-05-24 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高大肠杆菌发酵生产番茄红素产量的方法，包括以下步骤制备产番茄红素的大肠杆菌菌株，将大肠杆菌菌株中的野生型crp基因克隆到pKSC质粒上，得到重组载体pKSC‑crp，通过碱基替换得到优化的重组载体本发明通过对大肠杆菌菌株中的野生型crp基因的碱基替换A26T，影响其所调控的各种基因的转录水平，调节番茄红素合成直至整个菌体的代谢网络，进而提高番茄红素在大肠杆菌中的合成能力。此方法能有效提高大肠杆菌合成番茄红素的能力，对利用大肠杆菌工业化生产番茄红素具有重要的意义。
一种提高大肠杆菌发酵生产番茄产量方法

[发明专利]MGB探针多重荧光定量PCR检测大肠杆菌O157的方法-CN200610028327.5有效
发明人：严亚贤;朱向玲;孙建和;陆承平 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2006-06-29 - 公布日： 2007-04-25 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：一种MGB探针多重荧光定量PCR检测大肠杆菌O157的方法，构建重组质粒，设计合成引物和Taqman－MGB探针，进行二重荧光定量PCR，将大肠杆菌O157的rfbE、vt2的一段保守序列进行PCR扩增，获得目的片断，再将目的片断与PMD 18－T Vector连接，得到重组质粒，将重组质粒转化DH5a感受态大肠杆菌细胞，扩大培养，获得高浓度的质粒，将此高浓度质粒作10倍比稀释，作为标准样品，将标准样品和待测样品共同作二重荧光定量PCR，标准样品形成标准曲线，根据标准曲线可计算出待检样品中大肠杆菌O157的含量。本发明使用MGB探针，具有更高的敏感性和特异性，能快速、准确地检测样本中的大肠杆菌O157含量，可同时检测大肠杆菌O157的两个特异性毒力基因，是一种快速、准确的大肠杆菌O157检测方法。
mgb 探针多重荧光定量 pcr 检测大肠杆菌 o157 方法

[发明专利]环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用-CN201210455073.0有效
发明人：郑裕国;薛锋;柳志强;邹树平;胡忠策;沈寅初 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2012-11-13 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种源自于壤霉菌ZJB120203的环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、重组基因工程菌，以及在制备重组环氧化物水解酶中的应用；本发明环氧化物水解酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的表达重组质粒pET28a-EH，再转化至大肠杆菌BL21中，获得重组大肠杆菌，该重组大肠杆菌含有重组环氧化物水解酶，可以利用重组大肠杆菌为酶源，以外消旋环氧氯丙烷、外消旋的苯基环氧乙烷为底物，进行生物转化反应制备高光学纯度的
环氧化物水解基因编码载体工程应用

[发明专利]一种重组大肠杆菌及应用其以生物质原料生产PHB的方法-CN200810139553.X无效
发明人：祁庆生;陈泉;李瑞 -专利权人：山东大学
申请日： 2008-08-22 - 公布日： 2009-03-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组大肠杆菌并利用重组大肠杆菌发酵廉价的生物质原料生产PHB的方法。本发明通过同源重组技术敲除了大肠杆菌MG1655中的ptsG基因，然后向其中转入来源于真养产碱杆菌的phbCAB基因簇得到大肠杆菌Q3，该菌株已于2008年7月9日保藏在“中国典型培养物保藏中心”，保藏编号为大肠杆菌Q3能够高效利用农业生物质原料水解液合成PHB，在发酵开始后的24小时菌体达到最大浓度8.88克/升；在发酵开始后20小时PHB达到最大浓度6.42克/升，胞内PHB含量达到72.3％。在相同的发酵条件下，该技术可以达到与未改造大肠杆菌利用葡萄糖生产PHB产量相当的水平，而其生产成本却比单纯利用葡萄糖大大降低，在实际应用中有较大的实用价值。
一种重组大肠杆菌应用生物原料生产 phb 方法

[发明专利]一种肠外致病性大肠杆菌重组菌株及其应用-CN201811314587.8在审
发明人：谭臣;张焱焱;陈焕春;王湘如;宗冰冰;周红波 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2018-11-06 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种肠外致病性大肠杆菌重组菌株及其应用，属于微生物与免疫技术领域。本发明的肠外致病性大肠杆菌重组菌株为同时缺失kpsM基因和iucB基因且可过表达OmpC蛋白或OmpF蛋白的大肠杆菌PCN033。本发明的肠外致病性大肠杆菌重组菌株，同时缺失了kpsM基因和iucB基因，其毒力与亲本菌相比大大降低了，以其作为疫苗安全性高；其可以过表达OmpC蛋白或OmpF蛋白，对小鼠的免疫保护率达到了100％，具有很好的应用价值
致病性大肠杆菌重组菌株基因蛋白应用大肠杆菌免疫保护率疫苗安全性免疫技术毒力亲本小鼠微生物