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[发明专利]玻璃微纤维柱及用其制备和纯化质粒DNA的方法-CN99805651.0无效
发明人：李璟日 -专利权人：李璟日
申请日： 1999-04-01 - 公布日： 2001-06-13 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了用于质粒DNA制备和DNA纯化的玻璃微纤维柱试剂盒及制备和纯化DNA的方法。该柱试剂盒使用硼硅酸盐玻璃微纤维膜和/或颗粒形成的树脂。它们对从细菌培养物中大量制备高纯度质粒DNA和从琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶中简便快速纯化DNA是有用的。DNA制备物的纯度非常高,因此可用于各种高级实验,包括基因克隆,转染入哺乳动物细胞和转导,碱基测序分析,PCR,放射性标记的DNA探针定量,用放射性标记的DNA进行细胞增殖生物试验等。
玻璃纤维制备纯化质粒 dna 方法

[发明专利]定量评价至少一种生物培养基总的和特定的DNA修复能力的方法及其应用-CN200380108840.X有效
发明人：西尔维·索万高 -专利权人：法国原子能委员会
申请日： 2003-12-19 - 公布日： 2006-02-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种定量分析至少一种生物培养基的总的和特殊DNA修复能力的方法，以及评价所述培养基的切除/再合成能力的方法及其应用。本发明的方法包括一下步骤：(a)制备一定范围的质粒，每个质粒含有明显的DNA损坏；(b)确定出现在每个所述范围内的质粒的损坏；(c)根据预设的构型A，将所述质粒范围内的多种质粒和没有损坏的至少一个超螺旋对照质粒沉积到单一载体上从而形成一个划分有不同区域A₁～A_x的功能载体，x指的是等于需要同时测试的生物培养基数目的整数，每个区域A₁～A_x含有所述范围的质粒；(d)步骤(c)中得到的功能载体用不同的修复溶液进行培育；(e)至少清洗所述功能载体一次；(f)直接或间接测定标记产生的信号，该标记在步骤(d)和DNA结合为一体；(g)记录和定量分析对应于每个质粒沉积的信号；以及(h)测定含有损坏的质粒相对于共同沉积的对照质粒信号比率。
定量评价至少一种生物培养基总的特定 dna 修复能力方法及其应用

[发明专利]一种含HIPK2基因的重组质粒-CN201110217195.1无效
发明人：周利红;李琦;范忠泽;王炎;殷佩浩;慈书俊;周宁 -专利权人：上海中医药大学附属普陀医院;上海市普陀区中心医院
申请日： 2011-08-01 - 公布日： 2011-12-14 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种含HIPK2基因的重组质粒，该重组质粒包含HIPK2基因的编码序列以及载体质粒DNA序列。其中载体质粒DNA序列包含与HIPK2基因可操作地连接的调节序列，该载体质粒是可以在宿主中复制和生存的真核表达质粒。该重组质粒的构建包括引物设计、PCR扩增、NheI和KpnI双酶切及纯化、目的片段和载体质粒的连接、连接产物转化大肠杆菌感受态细胞以及重组质粒酶切鉴定阳性克隆并测序等步骤。该重组质粒可用于HIPK2基因在肿瘤血管新生、增殖凋亡、侵袭转移中的作用机理的研究，以及基于HIPK2基因的抗肿瘤药物的开发和生产，从而提供预防和治疗肝癌、胃癌、结直肠癌等恶性肿瘤的新途径。
一种 hipk2 基因重组质粒

[发明专利]一种含amiRNA-HIF-1α序列的重组质粒的制备方法及用途-CN201410233294.2在审
发明人：殷佩浩;彭文;邱艳艳;陈腾;汤庆丰;梁波;胡送娇;包益洁;于卉;石晓静;邹瑜 -专利权人：上海市普陀区中心医院
申请日： 2014-05-29 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种含amiRNA-HIF-1α序列的重组质粒的制备方法及用途，该重组质粒的制备方法包含amiRNA-HIF-1α序列的合成、目的片段和载体质粒的连接、连接产物转化大肠杆菌感受态细胞以及重组质粒电泳鉴定并测序等步骤该重组质粒包含amiRNA-HIF-1α的编码序列以及载体质粒DNA序列，载体质粒DNA序列中包含与amiRNA-HIF-1α连接的调节序列。本发明还公开了该重组质粒用于制备抗肿瘤药物的用途。
一种 amirna hif 序列重组质粒制备方法用途

[发明专利]一种基于ROSA26位点构建外源DNA修复模板的方法-CN202310261805.0在审
发明人：陈亚檞;杨宇;张双;邹家伦;袭昊瞳;朱茂碧;范江霖 -专利权人：五邑大学
申请日： 2023-03-17 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及核酸分子技术领域，具体公开了一种基于ROSA26位点构建外源DNA修复模板的方法，包括以下步骤：构建重组质粒；将酶切线性化的重组质粒和酶切后的外源基因序列连接，构成中间体质粒，所述中间体质粒含有启动子、外源基因序列和PloyA；将穿梭质粒、中间体质粒、与ROSA位点相关的上、下游同源臂片段通过无缝克隆连接，获得外源DNA修复模板。本发明将含有启动子、外源基因序列和PloyA的中间体质粒、与ROSA位点相关的上、下游同源臂片段通过无缝克隆连接并入载体中，构建出重组质粒，本发明提供的方法提高了构建准确率并完成测序验证无误。
一种基于 rosa26 构建 dna 修复模板方法

[发明专利]一种采用Taqman探针定量检测结核分枝杆菌复合体的试剂盒-CN201810154484.3在审
发明人：姜国胜;徐文娟;谢志卿 -专利权人：山东诺信检测有限公司
申请日： 2018-02-23 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：试剂盒包括MTBC和BG的引物和探针混合液、含MTBC基因组的DNA质粒、含β‑球蛋白的DNA质粒、含β‑球蛋白的DNA质粒、酶混合液。
试剂盒结核分枝杆菌复合体球蛋白定量检测结核杆菌复合体结核病结核分支杆菌复合体探针混合液诊断病人药物辅助检测疗效监控酶混合液体外检测基因组感染引物人群治疗预防

[发明专利]用于接合的细菌供体细胞-CN97192365.5无效
发明人： A·P·斯洛马;W·R·威德纳 -专利权人：诺沃诺尔迪斯克生物技术有限公司
申请日： 1997-01-17 - 公布日： 1999-03-17 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明涉及用于接合的修饰的细菌供体细胞,该细胞含有i)一个质粒,该质粒含有一个编码感兴趣的多肽的DNA构建物,以及至少一个在有反式作用转移因子的条件下通过接合转移该质粒所需要的顺式作用DNA序列,和ii)至少一个编码所述反式作用转移因子的DNA序列,其中与亲代细胞相比,所述供体细胞具有减弱的产生杀菌剂的能力,该杀菌剂可以杀伤受体细胞群或抑制其生长。
用于接合细菌供体细胞

[发明专利]一种线性化DNA载体pHB-1质粒及用其制备的用于编辑细菌基因组的试剂盒-CN202010053598.6在审
发明人：黄啸 -专利权人：义乌市颂健生物科技有限公司
申请日： 2020-01-17 - 公布日： 2020-05-12 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种线性化DNA载体pHB‑1质粒及用其制备的试剂盒，线性化DNA载体pHB‑1质粒的基因序列如SEQ ID NO：1所示；试剂盒包括线性化DNA载体pHB‑1质粒、高效T4DNA连接酶、PCR测序引物tL3‑seq和实验对照物；所述实验对照物包括编辑大肠杆菌MlaC基因的特异性gRNA序列引物、用于引入MlaC L11R点突变的DNA修复模板和用于确认MlaC L11R点突变的PCR测序引物
一种线性化 dna 载体 phb 质粒制备用于编辑细菌基因组试剂盒

[发明专利]一种提高瞬时转染效率的转染试剂及转染方法-CN202011602190.6在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：苏州汇桢生物技术有限公司
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：转染试剂包括PEI转染试剂和DMSO；其转染方法包括以下步骤：S1、准备转染质粒、细胞培养液（用1~5%(v/v)的DMSO处理5~10 h）；将转染试剂和培养基混合得到PEI混合液，其中转染试剂中添加有0.5%~1%(v/v)的DMSO，将转染质粒和培养基混合得到质粒DNA混合液；S2、将所述PEI混合液加入至质粒DNA混合液，室温孵育，得到DNA‑PEI复合物混合液；S3、将DNA‑PEI复合物混合液加入至所述细胞培养液中
一种提高瞬时转染效率试剂方法

[发明专利]基于CRISPR-Cas9靶向敲除人BNIP3基因的sgRNA、细胞系及应用-CN202310056165.X在审
发明人：别亚男;邹淑香;关雅今;李伍新;陈凤鸾 -专利权人：广东明珠生物技术有限公司
申请日： 2023-01-16 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：所述的sgRNA的靶DNA序列为序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列中的至少一种。将sgRNA的DNA双链中的正义链和反义链进行退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的含有绿色荧光的载体连接，得到含有靶向敲除人BNIP3基因的sgRNA和绿色荧光蛋白基因的质粒载体，同时辅以一个含有编码cas9的辅助质粒，得到双质粒敲除载体系统。将双质粒敲除载体系统转入到人靶细胞中，筛选，得到敲除人BNIP3基因的细胞系。该细胞系可在人细胞中线粒体自噬和细胞凋亡研究中的应用。
基于 crispr cas9 靶向 bnip3 基因 sgrna 细胞系应用

[发明专利]阳离子化枸杞多糖纳米粒基因传递系统及其制法-CN201010613602.6有效
发明人：徐希明;王淼;余江南;邓纹纹;曹霞 -专利权人：江苏大学
申请日： 2010-12-30 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：一种阳离子化枸杞多糖纳米粒基因传递系统，它是一种用胺类化合物修饰的枸杞多糖结合DNA质粒的基因传递系统，枸杞多糖的分子量分布为：20KD~40KD，其中按质量比计，阳离子化枸杞多糖:DNA质粒=1~200:1，阳离子化枸杞多糖-DNA质粒纳米复合物的粒径为351-414nm，所述的胺类化合物为精胺、乙二胺或数均分子量为600Da-2000Da的聚乙烯亚胺。经电泳实验及干细胞转染实验说明，本发明的三种阳离子化枸杞多糖均有良好的DNA质粒结合作用及基因传递表达作用。
阳离子枸杞多糖纳米基因传递系统及其制法

[发明专利]一种具有核酸内切酶活性的RecJ蛋白及在基因编辑中的应用-CN201810708639.3在审
发明人：郑明刚;王玲;徐孟欣;王闻 -专利权人：国家海洋局第一海洋研究所;青岛大学
申请日： 2018-07-02 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明的目的是提供一种RecJ蛋白在基因编辑中的应用，使用RecJ蛋白进行双链DNA的切割；从而能够对基因组DNA进行切割。本发明使用从海洋嗜碱菌克隆到的RecJ基因剪切超螺旋质粒成开环和线性化，直至将所作用的质粒彻底降解；该BaRecJ能够对表达宿主基因组同时进行多个位点的剪切，影响宿主的分裂；该酶能够消除宿主内携带该基因的质粒和宿主内的其他质粒
质粒宿主蛋白基因切割核酸内切酶活性超螺旋质粒基因组DNA 表达宿主基因剪切影响宿主双链DNA 剪切基因组线性化个位碱菌降解开环应用克隆携带分裂海洋

[发明专利]一种提取枯草芽孢杆菌基因工程菌质粒的方法-CN201210510549.6无效
发明人：王金斌;唐雪明;李文;陈大超;祝子坪;何建华;蒋玮;白蓝;刘华;李鹏;吴潇 -专利权人：上海市农业科学院
申请日： 2012-12-03 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种提取枯草芽孢杆菌基因工程菌质粒的方法，包括以下步骤：1）枯草芽孢杆菌菌体的培养与收集；2）原生体的制备；3）细胞的裂解和提取；4）质粒的纯化。应用该方法得到的质粒DNA可直接用来限制性内切酶消化、PCR扩增等多种分子生物学实验。本发明操作简便、安全、质量高，可同时适用于多种革兰氏阳性细菌质粒DNA的提取，因此具有广泛的适用性。
一种提取枯草芽孢杆菌基因工程质粒方法

[发明专利]一种长片段DNA体外重排的方法-CN201710772171.X在审
发明人：元英进;吴毅;朱瑞莹;马璐;刘瑞 -专利权人：天津大学
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2018-01-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种长片段DNA体外重排的方法。本发明利用改善的Cre‑LoxP系统的特异性重组技术，大大提高了长片段DNA重排的效率，以数量庞大的长片段DNA发生重排的质粒文库为基础，将质粒文库导入到对应的宿主细胞验证其最佳的表型，进而确定重排后的长片段DNA序列，可以广泛应用于基因重排、文库构建和代谢通路优化领域。
一种片段 dna 体外重排方法

[发明专利]人白介素6核转录因子表达质粒系列及其在肿瘤治疗中的应用-CN98122022.3无效
发明人：刘定干 -专利权人：中国科学院上海生物化学研究所
申请日： 1998-11-20 - 公布日： 2004-08-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明为一种具有在体内抑制肿瘤生长的功能的质粒DNA－人白介素6核转录因子表达质粒系列。此种表达质粒系列可应用于各种肿瘤的治疗和预防。
白介素转录因子表达质粒系列及其肿瘤治疗中的应用