本发明公开了人GDF‑15抗原表位肽、抗原、抗体、试剂盒及应用,涉及人GDF‑15抗原表位肽、重组蛋白、单克隆抗体、试剂盒及应用。抗原表位肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,为增强其免疫效果,将抗原表位肽偶联载体蛋白;重组蛋白包含人GDF‑15两个抗原表位肽,通过柔性肽连接后重复三次,其基因序列经密码子优化后化学合成,构建重组蛋白表达载体,在原核表达系统表达;GDF‑15抗原表位肽具有良好的抗原性,用其制备的免疫原免疫小鼠能够产生高度特异性的单克隆抗体,可用于人GDF‑15体外诊断检测。
本发明涉及一种缺失型人角质细胞生长因子‑1的重组制备方法,其包括用于获取缺失型人角质细胞生长因子‑1的重组表达方法、用于形成重组缺失型人角质细胞生长因子‑1的102位和106位间的一对二硫键的二硫键形成方法,其中,缺失型人角质细胞生长因子‑1的氨基酸序列特征为SEQ ID NO:1。本发明的重组表达方法,通过采用含T7启动子或BAD启动子的表达载体与表达宿主组成表达体系,直接表达得到的缺失型人角质细胞生长因子‑1,其N端无甲硫氨酸,无需工具酶酶切;本发明的二硫键形成方法,通过采用半胱氨酸作为添加剂,重组缺失型人角质细胞生长因子‑1的102位和106位间正确形成一对二硫键配对形成效率大于95%,具有与天然型KGF‑1相同的生物效价和生物作用。
本发明公开了一种具有镇痛作用的小分子肽及其特异性抗体。本发明提供了一段功能片段,为SEQ ID No.1自N端第872‑888位所示的氨基酸片段或SEQ ID No.2自N端第846‑861位所示的氨基酸片段。本发明还针对该功能片段设计了竞争性拮抗肽和中和性抗体。经过实验验证,竞争性拮抗肽及中和性抗体均具有镇痛功能,但是不影响基础痛阈;同时,该功能片段可以抑制神经元轴突生长,抗体能够逆转功能片段对神经元轴突生长的抑制作用。本发明为慢性痛的研究及治疗提供了新的思路。