本发明提供经修饰的人类生长激素多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:2，包含一个非天然编码氨基酸的hGH多肽，所述非天然编码氨基酸在SEQ ID NO:2位置35的残基位置处经取代，所述人类生长激素多肽通过肟键共价连接于一个30kDa直链聚乙二醇分子，所述肟键是形成于所述非天然编码氨基酸以及所述聚乙二醇分子之间；其中所述非天然编码氨基酸为对乙酰基-苯丙氨酸。
本发明公开了古菌酪氨酰‑tRNA合成酶突变体及其应用，该突变体由SEQ ID NO.12所示氨基酸序列在283‑286位突变所得。本发明对pCNPheRS的tRNA结合区域的序列进行改造，提高tRNA的识别速率，进而提高非天然氨基酸的引入效率。通过引入非天然氨基酸到GFP荧光蛋白的表达情况，可以看出突变体TSDV，TPAL和KPAL均比未突变的pCNPheRS表达含非天然氨基酸的GFP蛋白产量多，即引入非天然氨基酸的效率高。且三种突变体对八种非天然氨基酸的引入效率均有提升，经验证，TSDV可将pAcF引入到Taq DNA聚合酶中，且表达量可用于后续活性研究。本发明解决了非天然氨基酸引入效率低的问题，极大地拓展了对蛋白质的结构和功能的研究。
本发明公开了吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶突变体及其应用，该突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸序列在31位、56位、100位、311位和313位突变所得。本发明对MbPylRS序列进行改造，提高tRNA的识别速率，进而提高非天然氨基酸的引入效率。经验证，针对不同的非天然氨基酸MbPylRS的突变比MmPylRS具有更高的结合效率，经改造后的MbPylRS对十种非天然氨基酸的引入效率较MbPylRS(N311A/C313A)提高了3‑6倍，并成功将非天然氨基酸用于本发明解决了非天然氨基酸引入效率低的问题，方便推广应用。
本发明公开了一种用于催化制备非天然氨基酸的苯丙氨酸脱氢酶及其应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1、2、3或4所示。本发明通过对获得自海洋菌株Bacillus nanhaiensis(CGMCC NO.8969)的苯丙氨酸脱氢酶进行C末端区域改造，获得的变体氨基酸脱氢酶可催化系列非天然氨基酸底物，提高其催化具有大疏水基团的非天然氨基酸的能力
