本发明公开了一种Taq DNA聚合酶突变体，是将序列如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列进行以下任一组中的任一种突变所得的突变体：(1)Y686R/E687K、Y686R/E687K/Q690G、Y686R/E687K/Q690V、Y686R/E687K/D732A、Y686R/E687K/A744G；(2)E507Q、R716K；(3)E734N。本发明Taq DNA聚合酶突变体相较于野生型酶在热稳定性、活性或者灵敏度方面得到提高，使扩增效果更加好。
本发明公开了古菌酪氨酰‑tRNA合成酶突变体及其应用，该突变体由SEQ ID NO.12所示氨基酸序列在283‑286位突变所得。本发明对pCNPheRS的tRNA结合区域的序列进行改造，提高tRNA的识别速率，进而提高非天然氨基酸的引入效率。通过引入非天然氨基酸到GFP荧光蛋白的表达情况，可以看出突变体TSDV，TPAL和KPAL均比未突变的pCNPheRS表达含非天然氨基酸的GFP蛋白产量多，即引入非天然氨基酸的效率高。且三种突变体对八种非天然氨基酸的引入效率均有提升，经验证，TSDV可将pAcF引入到Taq DNA聚合酶中，且表达量可用于后续活性研究。本发明解决了非天然氨基酸引入效率低的问题，极大地拓展了对蛋白质的结构和功能的研究。
