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[发明专利]一种妊娠特异性糖蛋白3的兔多克隆抗体的制备方法-CN201811433190.0在审
发明人：鲁江徽;刘峰;谢龙生 -专利权人：必欧瀚生物技术（合肥）有限公司
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种妊娠特异性糖蛋白3的兔多克隆抗体的制备方法，将重组表达PSG3的原核表达重组菌发酵诱导表达，经过纯化后得到高纯度的PSG3重组蛋白，用该蛋白作为免疫原免疫新西兰大白兔得到免疫血清，再将抗血清亲和层析纯化获得高纯度的PSG3兔多克隆抗体。所纯化的抗体经SDS‑PAGE鉴定纯度大于95%，抗血清和纯化后多抗效价均大于1:10⁶，抗体无菌过滤后存放于2‑8℃可长期保存，室温下可保存2年。
兔多克隆抗体特异性糖蛋白高纯度抗血清抗体制备妊娠亲和层析纯化生物技术领域免疫新西兰长期保存免疫血清无菌过滤诱导表达原核表达重组表达重组蛋白大白兔免疫原重组菌效价发酵蛋白保存

[发明专利]一种人核糖体蛋白S5的表达提取纯化方法-CN201611080566.5有效
发明人：仲维清;邱丽娟;孟欣;罗春雷;杨峰 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2016-11-30 - 公布日： 2020-08-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供一种人核糖体蛋白S5的表达提取纯化方法，本发明的人核糖体蛋白RPS5的原核表达不带标签，并通过工程菌破碎、变性蛋白阳离子交换层析纯化、变性蛋白阴离子交换层析纯化、变性蛋白复性以及凝胶过滤层析纯化，大大提高了人核糖体蛋白S5蛋白的表达量及总收率，也提高了最终产品的纯度，降低了生产成本，有利于大规模工业化生产。
一种核糖体蛋白 s5 表达提取纯化方法

[发明专利]SFTSV膜蛋白杆状病毒表达系统载体构建方法-CN202211244293.9在审
发明人：刘苗苗 -专利权人：济宁医学院
申请日： 2022-10-12 - 公布日： 2023-01-20 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了SFTSV膜蛋白杆状病毒表达系统载体构建方法，具体包括以下步骤：步骤一、资料研究；步骤二、优化截取；步骤三、载体构建；步骤四、表达纯化，本发明涉及分子病毒学技术领域。该SFTSV膜蛋白杆状病毒表达系统载体构建方法，通过将含有抗原决定簇的膜蛋白优化后亚克隆到昆虫杆状病毒表达载体pFastBacDUAL中，利用昆虫杆状病毒表达载体pFastBacDUAL的双表达载体特性，实现Gn蛋白和Gc蛋白的同时表达，构建同时表达Gn蛋白和Gc蛋白的pFastBacDUAL‑Gn/Gc，获得针对病毒膜蛋白的重组基因工程疫苗，为病毒防控提供思路，并且通过设计不同标签的方式，方便后期对两个蛋白分别进行纯化
sftsv 膜蛋白杆状病毒表达系统载体构建方法

[发明专利]Rta蛋白的制备方法及其在鼻咽癌检测试剂中的应用-CN201210171584.X无效
发明人：李全;焦守恕;吴凡 -专利权人：同昕生物技术（北京）有限公司
申请日： 2012-05-29 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明的制备方法，步骤如下：（1）构建重组表达载体：以BRLF1全长基因为外源基因；（2）转染：将所述重组表达载体转入真核表达系统中获得阳性转细胞，（3）表达及纯化：培养所述阳性转化细胞使其表达目的蛋白，分离纯化目的蛋白；其特征在于：所述真核表达系统指CHO细胞。本发明的方法制备的Rta蛋白用于鼻咽癌的检测其灵敏度和特异性分别为96%（288/300），96.7%(290/300)，结果优于原核表达系统和毕赤酵母表达系统所制备抗原的结果，大大提高鼻咽癌临床早期诊断的灵敏度与特异性
rta 蛋白制备方法及其鼻咽癌检测试剂中的应用

[发明专利]TW型禽传染性支气管炎病毒S1蛋白N端结构域重组融合蛋白及其制备方法与应用-CN202310387811.0在审
发明人：赵烨;游人荣;张国中;唐丽华;赵静 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2023-04-12 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明将TW型IBV‑S1‑NTD、GCN4及人IgG1‑Fc串联构成融合表达抗原，对编码抗原的基因序列进行优化，然后通过人源HEK293细胞系统表达融合蛋白并纯化。Western blot结果显示，TW‑IBV‑S1‑NTD‑GCN4‑Fc1融合蛋白表达成功。对纯化后的蛋白进行SDS‑PAGE和ELISA鉴定，结果显示纯化结果良好，与同血清型阳性血清结合，与其他血清型IBV无交叉反应，获得了高效表达的重组可溶性融合蛋白，为后期的TW‑IBV阳性血清鉴定和相关研究奠定基础
tw 传染性支气管炎病毒 s1 蛋白结构重组融合及其制备方法应用

[发明专利]一种重组蝎昆虫毒素及其可溶性表达和纯化方法-CN200610012483.2无效
发明人：梁爱华;许成钢;范晓军;王伟;柴宝峰;崔大伟 -专利权人：山西大学
申请日： 2006-03-07 - 公布日： 2006-08-16 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蝎昆虫毒素rBmK IT及其可溶性表达和纯化方法。将BmK ITcDNA与一种蛋白自剪接元件(内含肽intein)基因融合表达，并在BmK IT cDNA的3’端融合了编码6个组氨酸的核苷酸序列。诱导表达出的融合蛋白intein－rBmKIT在大肠杆菌中以可溶的形式存在，表达量占菌体总蛋白的20－25％。将工程菌的发酵液经菌体的破碎、蛋白抽提、融合蛋白自剪切与亲和层析、样品浓缩以及高温处理和凝胶过滤层析进行纯化。获得电泳纯的重组蝎昆虫毒素rBmKIT。本发明优点是，重组目的蛋白以可溶的形式存在，避免了繁琐且回收率低的包涵体变复性的方法，简化了纯化步骤。
一种重组昆虫毒素及其可溶性表达纯化方法

[发明专利]一种别藻蓝蛋白(APC)与Annexin V蛋白偶联方法-CN201910931464.7在审
发明人：郭爱龙 -专利权人：杭州联科生物技术股份有限公司
申请日： 2019-09-29 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种别藻蓝蛋白(APC)与Annexin V蛋白偶联方法，包括以下步骤：步骤1：Annexin V蛋白表达纯化：1.1：基因序列优化：查找人Annexin V蛋白的基因序列，将人AnnexinV基因序列优化，去除终止密码子序列，将其连入原核表达载体上，保留前后His标签蛋白，为蛋白纯化及后续偶联荧光素纯化做准备；1.2：Annexin V蛋白诱导表达：挑取重组质粒单菌落，接种于含有卡那霉素的
基因序列蛋白原核表达载体别藻蓝蛋白终止密码子纯化设备蛋白表达蛋白纯化蛋白偶联蛋白诱导菌液浓度卡那霉素生物活性细胞凋亡诱导培养重组质粒常规的单菌落偶联物荧光素诱导剂保留菌液可用镍柱偶联去除接种优化查找检测

[发明专利]人聚角微丝蛋白基因原核表达系统及其表达蛋白的应用-CN201010105241.4有效
发明人：沈波;徐巍;朱敏 -专利权人：浙江省台州医院
申请日： 2010-01-29 - 公布日： 2010-12-08 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及人聚角微丝蛋白基因，即Filaggrin基因(含瓜氨酸肽编码序列)原核表达系统构建及其表达蛋白的应用。本发明涉及人filaggrin基因原核表达系统构建，以及纯化蛋白的应用开发，具体包括人filaggrin基因(含瓜氨酸肽编码序列)的PCR钓取、原核表达载体的构建、工程菌株的建立、目的蛋白分离纯化，以及
人聚角微丝蛋白基因表达系统及其应用

[发明专利]一种羧肽酶B分泌表达的方法-CN201811044790.8在审
发明人：张梁;於瑞梅;辛瑜;顾正华;李由然;丁重阳;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-09-07 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： C12N9/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种羧肽酶B分泌表达的方法，所述方法包括如下步骤：(1)以信号肽OmpA、PelB、Endoxylanase和OmpT序列为出发序列，分别进行定点突变；(2)制备核苷酸序列SDB‑pCPB‑6×His；(3)制备重组表达载体；(4)将重组表达载体转化至宿主大肠杆菌E.coli BL21并诱导表达pCPB；(5)酶切上述pCPB并纯化CPB。本发明通过对信号肽的改造，能够将羧肽酶原B直接分泌到培养基中，相比于胞内和周质表达，不需要破碎细胞，回收与纯化更能容易操作。另外，培养基中空间足够大，利于重组蛋白的过量表达。
重组表达载体分泌表达培养基羧肽酶B 制备大肠杆菌宿主核苷酸序列信号肽OmpA 羧肽酶原B 定点突变过量表达破碎细胞诱导表达重组蛋白周质表达信号肽中空间酶切分泌回收转化改造

[发明专利]暂态表达重组蛋白鸡输卵管生物反应器的制造方法-CN200510038300.X无效
发明人：孙怀昌 -专利权人：扬州大学
申请日： 2005-01-28 - 公布日： 2005-09-28 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：暂态表达重组蛋白鸡输卵管生物反应器的制造方法，属于基因工程和生物制药领域。本发明的技术方案包括鸡卵清蛋白基因调控序列的分子克隆、鸡输卵管高效表达载体的构建及优化、基因转染剂的选择、重组载体注射方法、剂量和次数的选择。与现有的同类技术相比，该发明不仅具有非手术、经济、实用等优点，而且目的基因的表达水平高、表达维持时间长、表达产物的活性完全。表达在蛋清中的重组蛋白既可以纯化后作为防治人、畜疾病的药物，也可以不经纯化直接作为人类的保健品或动物的饲料添加剂进行开发。
表达重组蛋白输卵管生物反应器制造方法

[发明专利]一种重组人性激素结合球蛋白N端51-218aa的表达与纯化方法-CN201910133613.5在审
发明人：温莎;何敏;杨丽超;李辉;陈秋利 -专利权人：广西医科大学
申请日： 2019-02-22 - 公布日： 2019-06-07 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及基因克隆表达技术领域，具体为一种重组人性激素结合球蛋白N端51‑218aa的表达与纯化方法，利用大肠杆菌表达与纯化重组人性激素结合球蛋白，提供了重组人的SHBG蛋白N端51‑218aa表达载体的构建方法，并对所诱导表达出的重组人的SHBG蛋白N端51‑218aa进行过Ni琼脂糖凝胶层析柱及切胶回收两步纯化。
球蛋白蛋白激素琼脂糖凝胶层析柱大肠杆菌表达表达载体基因克隆检测试剂两步纯化诱导表达低成本高产率高纯度构建切胶研发制备回收

[发明专利]α螺旋自组装短肽及其在蛋白质纯化中的应用-CN201811557416.8有效
发明人：林章凛;仙丹华;杨晓锋;赵镭;王胥;周碧红 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-12-19 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了α螺旋自组装短肽及其在蛋白质纯化中的应用，属于基因工程领域。该α螺旋自组装短肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。将该α螺旋自组装短肽与目的蛋白形成的融合蛋白在宿主细胞内表达后形成有活性的聚集体，通过表达所述融合蛋白来生产和纯化目的蛋白。本发明的α螺旋自组装短肽可以诱导融合蛋白形成大量的有活性的蛋白聚集体，纯化得到的目的蛋白产量和纯度都很高，而且该纯化方法对设备要求低，不需要纯化柱，生产成本低，操作简便，可应用于蛋白质的生产和纯化中。
螺旋组装及其蛋白质纯化中的应用

[发明专利]柱状黄杆菌基因重组疫苗的制备方法-CN201310421648.1有效
发明人：聂品;罗璋;刘志新 -专利权人：聂品
申请日： 2013-09-17 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种柱状黄杆菌基因重组疫苗制备方法，其步骤包括：(1)表达载体的构建；(2)目的蛋白的表达和纯化；(3)将纯化好的蛋白进行浓度调整，得到可直接使用的柱状黄杆菌基因重组亚单位疫苗。
柱状杆菌基因重组疫苗制备方法

[发明专利]重组牛胰核糖核酸水解酶A的表达及纯化方法-CN200710053502.0无效
发明人：周兴涛;黄国俊 -专利权人：南昌大学
申请日： 2007-10-06 - 公布日： 2008-04-30 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：一种重组牛胰核糖核酸水解酶A(RNaseA)的表达及纯化方法，利用现代生物学中的基因表达和蛋白纯化技术，对以往的重组RNaseA的制备方法进行改进，提供一种在生物医药可以广泛推广、安全、可行且大幅度降低了制造的成本的重组
重组核糖核酸水解表达纯化方法

[发明专利]猪圆环病毒2型CAP抗原制备方法-CN201510618251.0在审
发明人：郭慧娟;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2015-09-23 - 公布日： 2015-11-25 - 主分类号： C12N15/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种猪圆环病毒2型CAP抗原制备方法，该方法以获得猪圆环病毒2型病毒样颗粒为目的设计技术方案，利用杆状病毒表达系统提升了猪圆环病毒2型CAP蛋白的表达效率。此外，本发明在猪圆环病毒2型CAP蛋白天然表达基因基础上依据杆状病毒表达系统对密码子的偏爱性进行了基因修饰，从而显著提升了重组表达基因在杆状病毒表达系统中的表达效率。在此基础上，本发明针对杆状病毒表达系统以及CAP蛋白自身特点匹配了适宜的纯化条件，该纯化方法一方面具有较高的纯度的收率，另一方面电镜观察发现以此条件纯化的产物能够有效形成猪圆环病毒2型的病毒样颗粒(VLP
圆环病毒 cap 抗原制备方法