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[发明专利]全基因组范围的植物基因功能鉴定的方法-CN201610140329.7有效
发明人：张春义;路小铎;范云六 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所;齐鲁师范学院
申请日： 2016-03-11 - 公布日： 2019-10-25 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及全基因组范围的植物基因功能鉴定的方法，包括：1)将出发植物进行单核苷酸突变，构建植物突变体库；2)检测步骤1)所述植物突变体库中突变体的表型，构建植物突变体表型数据库；3)检测步骤2)所述植物突变体库中突变体的基因型，构建植物突变体基因型数据库；4)结合植物突变体表型数据库和植物突变体基因型数据库，确定出发植物中由所述单核苷酸突变导致的SNP位点所在基因的功能。本发明建立的植物突变体表型数据库和突变体基因型数据库，可以精确、迅速地找到与植物发育过程、抗逆反应或代谢途径等生物学过程相关的基因，为植物功能基因组研究开创了新途径。
基因组范围植物基因功能鉴定方法

[发明专利]用于基因突变高深度测序的基因芯片及其制备方法和应用-CN201811287028.2在审
发明人：王春丽;蔡宇航;师妍;杨颖;陈希;刘军 -专利权人：深圳华大基因股份有限公司;天津华大医学检验所有限公司;广州华大基因医学检验所有限公司
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于基因突变高深度测序的基因芯片及其制备方法和应用。本申请的基因芯片制备方法，包括根据不同的突变类型，结合基因突变在线数据库和本地数据库，构建捕获区间库；由捕获区间库设计基因芯片，提高捕获质量和效率，实现高深度测序；突变类型包括单核苷酸变异、插入缺失突变、拷贝数突变和结构变异中的至少一种；捕获区间库包括单核苷酸变异和插入缺失突变捕获区间库、拷贝数突变捕获区间库、结构变异捕获区间库。本申请的基因芯片制备方法，能够最大程度的覆盖突变人群，最大程度的覆盖癌症及其相关基因，设计出更加适应于中国人群的基因芯片。本申请的基因芯片测序深度高，特别适用于血液中极其微量的循环DNA的检测。
用于基因突变深度基因芯片及其制备方法应用

[发明专利]一种高效快速构建沿阶草饱和高抗同质突变体库的优化方法-CN201510618725.1有效
发明人：梁慧敏;周兴元;刘南清;郑凯;谭晓燕 -专利权人：江苏农林职业技术学院
申请日： 2015-09-24 - 公布日： 2019-09-10 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效快速构建沿阶草饱和高抗同质突变体库的优化方法。甲基磺酸乙酯和⁶⁰Co‑γ射线是应用最广泛，即高效又稳定的理化诱变剂。其中EMS可在一个基因组上产生多个点突变，产生的突变可随机分布于整个基因组，且分布均匀，密度高，成本低，有利于等位基因突变体的获得，特别是较小的突变群体便可获得饱和的突变体库；而r射线诱变主要是引起DNA片段的缺失和染色体重排，特别适用于多个家族基因功能缺失的突变体库的创建；所以这两种方法同时使用，通过优势互补，既可以增加突变体库的容量，又能满足饱和突变体库的要求，更加丰富了饱和突变体库的内容，而且所获得的突变体不涉及转基因事件
一种高效快速构建沿阶草饱和同质突变体优化方法

[发明专利]大肠杆菌细胞内原位进化目标蛋白质的新方法-CN201610053310.9在审
发明人：徐志南;濮悦;黄磊;杭宝建;董昌;蔡瑾 -专利权人：浙江大学
申请日： 2016-01-27 - 公布日： 2016-10-12 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：首先制备目标蛋白质分子中特定氨基酸位点的寡核苷酸饱和突变单链库，或制备目标蛋白质分子的同源双链或单链DNA突变库；将上述突变库转化含有目标基因或已经整合目标基因的大肠杆菌，通过λ‑Red同源重组技术，建立含目标基因突变库的大肠杆菌菌群；再次将DNA突变库转化上述得到的大肠杆菌，形成更大库容量的大肠杆菌突变库；循环操作上述过程3‑30次，构建含有目标基因突变的大肠杆菌基因组突变库；最后通过高效筛选或高通量筛选获得多种目标蛋白质突变体。
大肠杆菌细胞内原位进化目标蛋白质新方法

[发明专利]一种紫菜突变体库的构建方法-CN202110785421.X在审
发明人：孔凡娜;孙斌;殷吉强;茅云翔 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2021-07-12 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： A01H1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种紫菜突变体库的构建方法，属于植物育种技术领域。本发明紫菜突变体库的构建方法是以条斑紫菜单孢子为诱变材料，采用甲基磺酸乙酯作为诱变剂，通过对诱变条件的优化，获得具有较高突变饱和度的突变体库，使其具有各种性状的突变体，且获得的诱变后代为纯系，突变率相对较高
一种紫菜突变体构建方法

[发明专利]基于RNA-seq数据的肿瘤基因突变检测方法及系统-CN201810632056.7在审
发明人：黄金艳;李剑峰 -专利权人：上海交通大学医学院附属瑞金医院
申请日： 2018-06-19 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： G16B20/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于RNA‑seq数据的肿瘤基因突变检测方法，包括以下步骤：收集并分别整理出不同肿瘤、疾病高发的基因突变，建立一个高优先级突变检测的基因列表及突变位点数据库；收集并整理出目前已经具有明确的靶向或化疗药物作用位点的基因突变及基因数据库；建立基于RNA‑seq的基因突变注释数据库；收集整理出用于RNA‑seq突变检测的质量控制、基因序列比对、基因突变检测算法；建立一套完整的从原始RNA‑seq测序数据到最后突变检测结果的分析流程；还公开了基于RNA‑seq数据的肿瘤基因突变检测系统。通过使用整合的多个数据库，通过检测分析流程人们可以更加快速的找到已知的与肿瘤发生相关的基因突变位点。
突变检测基因突变肿瘤基因基因突变检测基因突变位点多个数据库基因数据库注释数据库测序数据分析流程化疗药物基因序列检测分析突变位点肿瘤发生作用位点质量控制靶向比对整合算法数据库肿瘤基因疾病

[发明专利]一种基于线切割功率曲线突变波形数据库的波形识别方法-CN201611232723.X有效
发明人：郑军;黄彬彬;王黎航 -专利权人：浙江科技学院
申请日： 2016-12-28 - 公布日： 2021-01-08 - 主分类号： G05B19/408 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于线切割功率曲线突变波形数据库的波形识别方法，包括下述步骤：101.建立线切割功率曲线突变波段的波形数据库；102.采集测试功率曲线；103.对测试功率曲线进行特征量提取；104.检测突变波段；105.对检测出的突变波段进行特征向量的提取；106.对突变波段进行突变波形的类型匹配；107.将提取的突变波段与突变波形数据库中的样本波形进行相似度对比；108.标记突变波段。该识别方法利用线切割功率曲线突变波形数据库，对线切割机床实际加工中采集的功率曲线的突变波形进行识别，快速准确地将线切割加工过程的不同阶段区分出来，使得用户可以将线切割机床加工过程的功率按不同阶段区分出来
一种基于切割功率曲线突变波形数据库识别方法

[发明专利]慢性病用药指导装置和方法-CN202011196713.1有效
发明人：马旭;陈翠霞;曹宗富;王小龙;李乾;喻浴飞;蔡瑞琨 -专利权人：国家卫生健康委科学技术研究所
申请日： 2020-10-30 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： G16H20/10 文献下载
摘要：该方法包括：获取待分析患者待测基因序列的高通量测序数据；对高通量测序数据进行突变检测分析，得到突变基因位点、突变基因位点信息、突变前的第一碱基类型和突变后的第二碱基类型；根据突变后的第二碱基类型和突变基因位点信息生成目标碱基类型；获取预设基因型功能库和预设药物基因型功能库；根据突变基因位点、突变前的第一碱基类型和目标碱基类型关联查询预设基因型功能库，得到目标单体型的目标药物代谢功能；根据目标单体型对应的目标药物代谢功能关联查询预设药物基因型功能库
慢性病用药指导装置方法

[发明专利]一种生物突变体库的构建方法-CN201910274109.7在审
发明人：姜临建 -专利权人：青岛清原化合物有限公司
申请日： 2019-04-08 - 公布日： 2019-11-05 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物突变体库的构建方法。本发明公开的生物突变体库的构建方法包括：1)向靶标生物中导入DNA片段，得到转基因生物；该DNA片段能在转基因生物中表达完成定点突变靶标DNA的所需的元件；2)培养转基因生物，得到生物突变体库；该生物为有性生殖生物，转基因生物能特异在生殖细胞中定点突变靶标DNA。利用本发明的方法得到的突变体库可筛选到具有以下性状的生物：抗生物逆境，抗非生物逆境，高产量，好品质性状，高次生代谢物产量等。因此，本发明的方法具有巨大的应用前景。
突变体库转基因生物构建定点突变靶标DNA 生殖细胞抗非生物逆境次生代谢物培养转基因靶标生物品质性状生物逆境性状筛选应用

[发明专利]一种利用迭代同源重组体内进化目标蛋白质的方法-CN201610079480.4有效
发明人：徐志南;濮悦;黄磊;杭宝建;董昌;蔡瑾 -专利权人：浙江大学
申请日： 2016-02-04 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：其特征在于：首先在体外通过两步PCR制备得到带突变的单链核苷酸并用DNase I酶切，回收80‑100nt片段构成目标蛋白质的单链核苷酸突变库；以此单链突变库转化大肠杆菌，通过λ‑Red同源重组技术建立含有目标蛋白质突变体的大肠杆菌菌群；再次将上述单链突变库转化含有目标蛋白质突变体的大肠杆菌菌群，形成更大库容量的大肠杆菌菌群；再次转化大肠杆菌的操作循环2‑6次，构建含有目标基因突变的大肠杆菌突变库；最后通过高效筛选或高通量筛选获得目标蛋白质突变体
一种利用同源重组体内进化目标蛋白质新方法

[发明专利]OsALS1的定向突变及农作物内源基因定向进化的方法-CN202010048142.0有效
发明人：周焕斌;旷永洁;任斌;严芳 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2020-01-16 - 公布日： 2021-04-13 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明提供了OsALS1的定向突变及农作物内源基因定向进化的方法。OsALS1的氨基酸序列为将序列78发生第一突变、第二突变和第三突变中的至少一种，第一突变为P171F、P171S和P171L中的一种，第二突变为L158F，第三突变为R190H。方法包括如下步骤：选定农作物的内源基因为靶基因；基于靶基因设计若干靶核苷酸序列，得到若干定向进化克隆序列并分别克隆到含有gRNA的质粒上，得到定向进化gRNA质粒库；将所述定向进化gRNA库中的相关序列与Cas9表达盒整合到同一载体上，转化所述农作物中，得到所述农作物的突变库；从所述农作物的突变库中筛选与所述靶基因相关的所需性状。
osals1 定向突变农作物内源基因进化方法

[发明专利]一种基因突变大鼠资源库及其制备方法-CN201510569493.5有效
发明人：潘雨堃 -专利权人：潘雨堃
申请日： 2015-09-09 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C40B40/06 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，涉及一个基因突变大鼠品系资源库及其制备方法。该资源库中的基因突变大鼠可由携带piggyBac转座子插入突变的大鼠精原干细胞，胚胎干细胞或受精卵产生获得。该资源库中的基因突变大鼠也可以通过在雄性突变大鼠生殖系细胞中移动转座子获得。本发明可用于动物表型分析，基因功能研究，人类疾病模拟，药物筛选和药靶开发。
一种基因突变大鼠资源库及其制备方法

[发明专利]高通量测序突变检测结果的统计学验证方法-CN201610046810.X有效
发明人：刘志源;张静波;陈威 -专利权人：北京圣谷同创科技发展有限公司
申请日： 2016-01-22 - 公布日： 2018-10-26 - 主分类号： G06F19/24 文献下载
摘要：本发明涉及高通量测序突变检测结果的验证方法，所述方法包括，首先建立感兴趣突变的阴性背景突变频率库，基于该阴性背景突变频率库，通过Z检验来验证高通量测序突变检测结果中单核苷酸取代类型的突变检测结果，通过卡方检验来验证高通量测序突变检测结果中连续多核苷酸缺失类型的突变检测结果本发明方法可以实现对高通量测序突变检测结果的零成本验证，并且具有较高的正确性和灵敏度。
通量突变检测结果统计学验证方法

[发明专利]一种高通量DNA多位点精确碱基突变方法-CN201810436798.2有效
发明人：席建忠;朱丹;王干诚 -专利权人：北京大学
申请日： 2018-05-09 - 公布日： 2021-10-15 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量DNA多位点精确碱基突变方法。本发明所提供的方法是基于重叠延伸PCR高通量对目标基因片段多位点高效引入突变的方法；所用引物不是简并引物，而是准确设计目标突变序列的突变引物；突变位点长度不限于单个氨基酸，可设计为连续1‑5个氨基酸；引物非单条分开合成，而是由寡核苷酸合成仪在集成芯片上批量合成，引物种类量级可达104‑105种类/批次；本发明所述突变方法可通过调节反应条件在一定程度上实现对突变频率的控制本发明的突变建库方法可获得较高比例的有效突变体，建库突变体阳性率(非同义氨基酸突变)可达～80％；本发明所建的突变体库经过后续高通量筛选成为获得理想蛋白质及核酸改造体的有力工具。
一种通量 dna 多位点精确碱基突变方法

[发明专利]建立可控突变率突变库的方法与应用-CN201010242551.0有效
发明人：耿丽丽;束长龙;刘明;张杰;宋福平;黄大昉 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2010-07-30 - 公布日： 2012-02-08 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及“建立可控突变率突变库的方法与应用”，属于生物技术领域。本发明依据TaqDNA聚合酶在合成碱基时的固有误差和突变特性，针对预期替换不同碱基数目，确认其循环数和起始模板量，建立了一种突变率可控的突变文库。因此可以根据客户的需求来定制不同碱基突变数目的文库，使突变文库的适应性和目的性增强。本发明采用CrylIe蛋白建立的突变文库中，活性显著提高的突变株占整个突变库的11.96％，其中文库III高毒力突变株的比例达到13.16％，表明该随机突变文库的方法筛选到活力显著提高的突变株的几率很高；针对高毒力突变株突变位点人工合成的突变体，杀虫活性是未突变CrylIe蛋白的1000倍。
建立可控突变方法应用

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