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[发明专利]无创产前诊断胎儿非整倍体性的方法和组合物-CN201180009757.1在审
发明人： P·C·帕特萨里斯;E·A·帕帕乔治乌 -专利权人： NIPD遗传学有限公司
申请日： 2011-01-26 - 公布日： 2013-01-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：识别了多种差异甲基化区域(DMR)。某些所述的DMR在成人女性血液DNA中低甲基化，在胎儿DNA中高甲基化；而其它的在成年女性血液DNA高甲基化，在胎儿DNA低甲基化。此外，在成人女性血液DNA中低甲基化并且在胎儿DNA中高甲基化的DMR，已经表明，以精确预测存在于妊娠期母体血液样品中胎儿DNA的非整倍体性。在本发明的方法中，高甲基化DNA优选通过甲基化DNA免疫沉淀从低甲基化DNA中物理分离。
产前诊断胎儿整倍体方法组合

[发明专利]甲基化DNA富集试剂及其制备方法和应用-CN201410361087.5在审
发明人：李伟东 -专利权人：沈阳百创特生物科技有限公司
申请日： 2014-07-25 - 公布日： 2014-11-05 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及甲基化DNA富集试剂及其制备方法和应用。甲基化DNA富集试剂是一种由甲基化结合蛋白和凝胶或磁珠合成的甲基化DNA亲和介质。利用本发明的甲基化DNA亲和介质可建立简单、高效的尿液甲基化DNA富集试剂和DNA转化的一步法。大体积尿液中的甲基化DNA可以通过甲基化结合蛋白的亲和介质富集，提高了检测的灵敏度和速度。富集的甲基化DNA无需进一步的DNA分离纯化，可以直接用于甲基化分析。
甲基化 dna 富集试剂及其制备方法应用

[发明专利]一种应用于甲基结合蛋白测序中的甲基化DNA富集方法-CN201410394587.9在审
发明人：孙子奎;高文学;丁方美;王锋;唐嘉婕 -专利权人：上海派森诺生物科技有限公司
申请日： 2014-08-12 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学领域，公开了一种应用于甲基结合蛋白测序中的甲基化DNA富集方法，包含以下步骤：(1)磁珠的活化与甲基结合蛋白交联反应；(2)甲基结合蛋白-磁珠复合物与片段化DNA的孵化；(3)去除非甲基化DNA；(4)甲基化DNA洗脱；(5)乙醇沉淀，得到富集的甲基化DNA。同现有技术相比，本发明在去除非甲基化DNA这步，依次采用160mM NaCl与200mM NaCl对片段化DNA与甲基结合蛋白-磁珠复合物的混合物进行洗脱，更完全地除去了非甲基化DNA，保留甲基化DNA，提高了最后富集到的DNA中甲基化DNA的比例，从而提高了甲基化区域的测序深度。
一种应用于甲基结合蛋白中的甲基化 dna 富集方法

[发明专利]预测肺癌早期的DNA甲基化标志物及其应用-CN201810580137.7在审
发明人：陈琦;梁昊原;谷东风 -专利权人：深圳市圣必智科技开发有限公司
申请日： 2018-06-07 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开一种预测肺癌早期的DNA甲基化标志物及其应用，所述预测肺癌早期的DNA甲基化标志物包括F2RL3基因的DNA甲基化标志物、SHOX2基因的DNA甲基化标志物、RASSF1A基因的DNA甲基化检标志物、ANKRD18B基因的DNA甲基化标志物和MPDZ基因的DNA甲基化标志物。实施本发明，能够联合检测多个肺癌相关DNA甲基化程度，明显地提高肺癌早期的检出率，适于大规模推广应用。
标志物肺癌基因联合检测检出率预测应用

[发明专利]用于检测甲基化DNA的试剂盒和方法-CN201110052338.8有效
发明人： M·雷里 -专利权人：塞昆纳姆股份有限公司
申请日： 2005-11-28 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及检测甲基化DNA的体外方法，其包括(a)用能够结合甲基化DNA的多肽包被容器；(b)将所述多肽与含有甲基化和/或未甲基化DNA的样品接触；和(c)检测所述多肽与甲基化DNA的结合。在优选实施方案中，所述方法还包括步骤(d)通过测序分析所检测的甲基化DNA。本发明的另一方面是用于根据本发明的方法检测甲基化DNA的试剂盒，其包含(a)能够结合甲基化DNA的多肽；(b)可以用所述多肽包被的容器；(c)包被所述容器的手段；和(d)检测甲基化DNA的手段。
用于检测甲基化 dna 试剂盒方法

[发明专利]用于检测甲基化DNA的试剂盒和方法-CN200580047184.6有效
发明人： M·雷里 -专利权人：雷根斯堡大学临床中心
申请日： 2005-11-28 - 公布日： 2008-02-13 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及检测甲基化DNA的体外方法，其包括(a)用能够结合甲基化DNA的多肽包被容器；(b)将所述多肽与含有甲基化和/或未甲基化DNA的样品接触；和(c)检测所述多肽与甲基化DNA的结合。在优选实施方案中，所述方法还包括步骤(d)通过测序分析所检测的甲基化DNA。本发明的另一方面是用于根据本发明的方法检测甲基化DNA的试剂盒，其包含(a)能够结合甲基化DNA的多肽；(b)可以用所述多肽包被的容器；(c)包被所述容器的手段；和(d)检测甲基化DNA的手段。
用于检测甲基化 dna 试剂盒方法

[发明专利]DNA甲基化检测探针-CN201810590112.5在审
发明人：陈琦;梁昊原;谷东风 -专利权人：深圳市圣必智科技开发有限公司
申请日： 2018-06-08 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开一种DNA甲基化检测探针，包括5’端和3’端的用于与甲基化DNA互补配对的序列，其中，检测探针3’端的最后三个碱基均为鸟嘌呤，所述鸟嘌呤与甲基化DNA中部的甲基化胞嘧啶配对，且检测探针3’端的序列与甲基化DNA的自中部所述甲基化胞嘧啶至3’端的序列反向互补配对，检测探针5’端的序列与甲基化DNA的自中部所述甲基化胞嘧啶的临近脱氧核苷酸至5’端的序列反向互补配对。本DNA甲基化检测探针能够提高DNA甲基化检测的灵敏度。
甲基化DNA 甲基化胞嘧啶检测探针配对反向互补鸟嘌呤探针脱氧核苷酸互补配对灵敏度碱基

[发明专利]DNA甲基化转化方法、试剂盒及应用-CN202211516489.9在审
发明人：胡立夫;南熠郎 -专利权人：深圳市人民医院;胡立夫
申请日： 2022-11-30 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了DNA甲基化转化方法、试剂盒及应用。DNA甲基化转化方法：将DNA和甲基化转化试剂反应，甲基化转化试剂将DNA中未甲基化的胞嘧啶脱氨基转化为尿嘧啶，得甲基化转化DNA；甲基化转化试剂包括焦亚硫酸盐、亚硫酸氢盐中的至少一种，以及氢氧化钠。试剂盒包括甲基化转化试剂、DNA保护剂和脱硫剂。本发明的甲基化转化试剂优化了转化方法包括氢氧化钠，可将DNA双链打开，便于进行甲基化转化，缩短了转化时间，降低了DNA的降解，提高转化效率。上述转化方法或试剂盒可用于制备待检样品的甲基化标志物，以检测相关疾病。
dna 甲基化转化方法试剂盒应用

[发明专利]从全基因组中富集甲基化DNA的方法及其所用层析柱组-CN200610147409.1无效
发明人：秦颖;肖华胜 -专利权人：上海生物芯片有限公司
申请日： 2006-12-18 - 公布日： 2008-06-25 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种从全基因组中富集甲基化DNA的方法，包括：制备层析柱组，该层析柱组包括甲基化DNA特异的亲和层析柱和非甲基化DNA特异的亲和层析柱；抽提待测样品DNA；将待测样品DNA与非甲基化DNA特异的亲和层析柱进行结合反应，以去除待测样品核酸中的非甲基化DNA；把所得的滤过液再与甲基化DNA特异的亲和层析柱进行结合反应，以实现富集甲基化DNA的目的。本发明从全基因组中富集甲基化DNA的方法，能显著提高从全基因组范围内富集甲基化DNA的效率，且明显增加甲基化DNA富集的特异性和敏感性。
基因组富集甲基化 dna 方法及其所用层析

[发明专利]肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒和检测方法-CN201810580140.9在审
发明人：陈琦;梁昊原;谷东风 -专利权人：深圳市圣必智科技开发有限公司
申请日： 2018-06-07 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开一种肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒和检测方法，该方法包括：提取待测样品；利用本发明提供的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒对所述待测样品进行检测，获得F2RL3基因的DNA甲基化程度、SHOX2基因的DNA甲基化程度、RASSF1A基因的DNA甲基化程度、ANKRD18B基因的DNA甲基化程度和MPDZ基因的DNA甲基化程度；根据待检的五个基因的DNA甲基化程度，确定待检对象是否为肺癌高危或肺癌患者实施本发明，能够联合检测多个肺癌相关DNA甲基化程度，可以明显地提高肺癌早期的检出率，适于大规模推广应用。
肺癌基因标志物检测待测样品试纸盒待检对象联合检测检出率检测

[发明专利]基于游离DNA甲基化或羟甲基化差异的主动脉夹层检测方法及系统-CN201911040573.6在审
发明人：刘贇;刘佩茹;邱文青;杜多;张丹丹 -专利权人：复旦大学
申请日： 2019-10-29 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明属于生物医学技术领域，具体为基于游离DNA甲基化或羟甲基化差异的主动脉夹层检测方法及系统。本发明方法包括：（一）游离DNA甲基化或羟甲基化差异检测，包括：整体甲基化或羟甲基化水平有统计学差异；特定位点或区域甲基化或羟甲基化水平有统计学差异；在基因组中的分布规律差异；（二）根据DNA甲基化或羟甲基化差异判别主动脉夹层是否发生本发明系统包括游离DNA甲基化或羟甲基化差异检测模块和主动脉夹层发生判别模块。本发明取材方便，处理简单，避免繁复的手术取材；以DNA甲基化或DNA羟甲基化作为检测标准，这种化学修饰具有稳定的组织特异性，能明确反映组织来源和状态，检测结果稳定可靠。
羟甲基化甲基化主动脉夹层游离DNA 统计学差异取材差异检测模块生物医学技术组织特异性差异检测分布规律化学修饰检测结果判别模块基因组检测位点

[发明专利]环状甲基化DNA中的定点诱变-CN200780051140.X无效
发明人：乔苗 -专利权人：乔苗
申请日： 2007-04-25 - 公布日： 2009-12-09 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及甲基化的环状DNA分子的定点诱变的新方法，其中通过利用诱变引物对和甲基化酶缺陷大肠杆菌使甲基化的环状DNA分子产生定点诱变。本方法选用的诱变引物对是5′端或3′端部分或完全互补的诱变引物对。首先，诱变引物与其相对应的甲基化环状双链DNA分子(母链)的互补链退火；然后，利用DNA聚合酶和非甲基化的dNTP进行聚合酶链反应产生突变的非甲基化子链DNA分子；最后，把含甲基化母链DNA分子和突变的非甲基化子链DNA分子的聚合酶链反应混合产物转化进入甲基化酶缺陷的大肠杆菌。甲基化的母链DNA分子的复制在甲基化酶缺陷宿主细胞中受到抑制。相反，非甲基化子链DNA分子(含有突变)在甲基化酶缺陷宿主细胞中高效率复制，从而得到有效的富集和回收。
环状甲基化 dna 中的定点诱变

[发明专利]甲基化DNA的浓缩方法和检测方法以及试剂盒-CN200910085872.1有效
发明人：夏东元 -专利权人：博尔诚(北京)科技有限公司
申请日： 2009-06-03 - 公布日： 2010-12-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种甲基化DNA的浓缩方法和检测方法以及试剂盒，浓缩方法包括将生物样品直接与固相化的甲基化DNA结合蛋白和/或其结构域蛋白接触。检测方法包括以下步骤：浓缩：将生物样品直接与固相化甲基化DNA结合蛋白和/或其结构域蛋白接触；转化：使用重硫酸盐处理浓缩到的甲基化DNA；脱硫：使用碱性脱硫剂处理经转化的甲基化DNA；以及测定得到的DNA上述方法中编码所述甲基化DNA结合蛋白的基因序列如SEQ ID NO：1所示，编码所述甲基化DNA结合蛋白的结构域蛋白的基因序列如SEQ ID NO：2所示。上述方法采用固相化甲基化DNA结合蛋白或其结构域直接高效结合甲基化DNA，对于体积大或DNA浓度低的生物样品尤为有利。
甲基化 dna 浓缩方法检测以及试剂盒

[发明专利]基于基因突变和DNA甲基化特征判定衰老程度的方法-CN202110832446.0在审
发明人：吉冠玉;吉红玉;郑树凯;刘彩霞;袁晓龙;陈惟 -专利权人：深圳市精笃健康科技有限公司
申请日： 2021-07-22 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于基因突变和DNA甲基化特征判定衰老程度的方法，步骤如下：S1，采集样品在前后两个时间段的DNA信息并对其进行DNA甲基化测序；S2，筛选测序数据的reads并进行数据检验获取对应时间段的DNA甲基化信息和突变信息；S3，判定DNA甲基化差异位点，确定突变落在CpG附近1bp位置上的突变信息，并计算出DNA甲基化率，若检测到的DNA甲基化率下降超过30％或在后样品的DNA甲基化率低于10％则判定为衰老锁，之后通过衰老锁判定衰老程度，衰老锁是在CpG位点附近1bp范围内发生DNA甲基化丢失的现象。该发明能利用基因组上DNA突变信息和DNA甲基化修饰信息的数据特征来判定机体的衰老程度。
基于基因突变 dna 甲基化特征判定衰老程度方法

[发明专利]DNA甲基化检测标准品及其制备方法和应用-CN201910624972.0在审
发明人：傅坚刚;蒋涛华;邵悦 -专利权人：南京科佰生物科技有限公司
申请日： 2019-07-11 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA甲基化检测标准品及其制备方法和应用，所述方法包括如下步骤：S101：根据临床病人的DNA甲基化水平，选择多种不同DNA甲基化水平细胞株；S102：分别对所述细胞株进行培养扩增，制备成细胞沉淀；S103：用基因组DNA提取试剂将所述细胞沉淀中的基因组DNA提取出来；S104：分别测定所述基因组DNA样品中的DNA甲基化水平。本发明的DNA甲基化检测标准品的制备方法，填补了国内DNA甲基化检测缺少标准品或不符合精准医疗的要求的空白，所培养的细胞生产DNA甲基化标准品，重复性和稳定性好；为未来DNA甲基化检测的标准化，做了充分准备
标准品制备方法和应用基因组DNA提取细胞沉淀制备基因组DNA样品水平细胞细胞生产细胞株扩增标准化填补医疗

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