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[发明专利]共表达蔗糖磷酸化酶和透明颤菌血红蛋白的工程菌及应用-CN202310361119.0在审
发明人：徐铮;韩子钰;李娜;严赛峰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-04-06 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提出一种共表达蔗糖磷酸化酶和透明颤菌血红蛋白的工程菌，以pET系列质粒为载体，以大肠杆菌为宿主将来源于肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)的蔗糖磷酸化酶基因(LmSP2基因)与透明颤菌血红蛋白基因(vgb基因)异源共表达。该工程菌较单独异源表达蔗糖磷酸化酶基因的重组大肠杆菌发酵液酶活提高近66％。本发明还提出该工程菌在制备蔗糖磷酸化酶中的应用。
表达蔗糖磷酸化酶透明血红蛋白工程应用

[发明专利]毕赤酵母制备刀额新对虾精氨酸激酶的方法-CN201110413167.7无效
发明人：陈伟;郑海军;尤春霞;李静;刘群英;邬敏辰;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-13 - 公布日： 2012-03-28 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组刀额新对虾精氨酸激酶的制备方法及表达重组刀额新对虾精氨酸激酶的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从刀额新对虾肌肉匀浆经反转录PCR得到精氨酸激酶的编码基因；3)构建含有刀额新对虾精氨酸激酶编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达刀额新对虾精氨酸激酶；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组刀额新对虾精氨酸激酶。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组刀额新对虾精氨酸激酶，适用于工业化制备重组刀额新对虾精氨酸激酶。
酵母制备刀额新对虾精氨酸激酶方法

[发明专利]毕赤酵母制备人白细胞介素29成熟肽的方法-CN201110413183.6无效
发明人：陈伟;郑海军;于明磊;郁心;邬敏辰;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-13 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种人白细胞介素29(hIL-29)成熟肽的制备方法及表达hIL-29成熟肽的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从健康人外周血单个核细胞经反转录PCR得到hIL-29成熟肽的编码基因；3)构建含有hIL-29成熟肽编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达hIL-29成熟肽；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化hIL-29成熟肽。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达天然型hIL-29成熟肽，适用于工业化制备人白细胞介素29。
酵母制备白细胞 29 成熟方法

[发明专利]毕赤酵母制备刀额新对虾原肌球蛋白的方法-CN201110413185.5无效
发明人：陈伟;郑海军;朱红波;宓路挺;刘群英;邬敏辰;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-13 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组刀额新对虾原肌球蛋白的制备方法及表达重组刀额新对虾原肌球蛋白的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从刀额新对虾肌肉匀浆经反转录PCR得到原肌球蛋白的编码基因；3)构建含有刀额新对虾原肌球蛋白编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达刀额新对虾原肌球蛋白；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组刀额新对虾原肌球蛋白。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组刀额新对虾原肌球蛋白，适用于工业化制备重组刀额新对虾原肌球蛋白。
酵母制备刀额新对虾肌球蛋白方法

[发明专利]一种人白细胞介素29的变异体及其制备方法-CN201110413170.9无效
发明人：陈伟;郑海军;于明磊;陆源;郁心;邬敏辰;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-13 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组人白细胞介素29(hIL-29)变异体的制备方法及表达重组hIL-29变异体的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从健康人外周血单个核细胞经反转录PCR得到hIL-29变异体的编码基因；3)构建含有hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达重组hIL-29变异体；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组hIL-29变异体。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组hIL-29变异体，适用于工业化制备重组人白细胞介素29变异体。
一种白细胞 29 异体及其制备方法

[发明专利]一种超级工程菌及其表达的解毒酶和其构建方法及应用-CN200410042712.6无效
发明人：乔传令;兰文生;黄菁 -专利权人：中国科学院动物研究所
申请日： 2004-05-21 - 公布日： 2005-08-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种可以降解农药残留的超级工程菌和其表达的解毒酶。该超级工程菌含有编码解毒酯酶和水解酶的基因，能诱导表达解毒酯酶和水解酶。其构建方法包括：分别克隆解毒酯酶和水解酶的基因；将此基因分别克隆到表达载体pETDuet－1上，构建融合表达载体pETDuet－b1－opd：最后转化得到重组菌株并进行诱导培养。本发明的解毒酶是由上述超级工程菌经诱导表达后而制备的。该超级工程菌和解毒酶可以同时降解马拉硫磷、对硫磷、高效氯氰菊酯、三氯杀虫酯等有机酸酯和有机磷类农药；可以用于有机磷中毒温血动物的解毒。该超级工程菌和解毒酶为利用真核和原核生物的自然资源对残留在水源、土壤等中农药等有毒有害化合物污染的生物治理提供了一条新途径，消除农药残留污染。
一种超级工程及其表达解毒构建方法应用

[发明专利]一种生产鲨烯的基因工程菌及其方法-CN201710558151.2有效
发明人：谢丽萍;胡又佳;刘海元;龚桂花;张伟;韩姝;潘洁;宋智慧 -专利权人：上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院
申请日： 2017-07-10 - 公布日： 2022-05-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产鲨烯的基因工程菌及其方法。该基因工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)中表达鲨烯合酶基因、5‑磷酸脱氧木酮糖合酶基因、异戊烯基二磷酸异构酶基因以及法尼基焦磷酸合酶基因的基因工程菌；所述鲨烯合酶基因来源于解脂耶氏酵母该基因工程菌异源表达解脂耶氏酵母中的鲨烯合酶，与此同时，过表达大肠杆菌内源基因dxs、idi和ispA的组合；为鲨烯合酶基因的产业化生产提供了新思路。
一种生产基因工程及其方法

[发明专利]一种表达重组蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌工程菌-CN201110009399.6无效
发明人：姜岷;隋姗姗;马江锋;侯顾伟;奚永兰;陈可泉;韦萍;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2011-01-17 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，本发明公开了一种表达重组蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌工程菌，它是导入了来源于肠膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides ATCC 12291的蔗糖磷酸化酶SPase本发明还公开了上述表达重组蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌工程菌的构建方法及其应用。本发明的表达重组蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌工程菌在规模化生产SPase具有操作方便，表达稳定，效率高，成本低，易于纯化等特点。
一种表达重组蔗糖磷酸化酶大肠杆菌工程

[发明专利]一种甘露聚糖酶及其重组表达菌株-CN201210173611.7有效
发明人：黄亦钧;程斯达;王华明;刘鲁民;曲音波;刘国栋;陈梅 -专利权人：青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2012-05-30 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种甘露聚糖酶及其重组表达菌株，所述的甘露聚糖酶基因是从斜卧青霉中克隆得到的，其氨基酸序列为SEQ ID NO: 1。本发明还包括重组表达甘露聚糖酶的毕赤酵母(Pichia pastoris pdman-2) 工程菌和里氏木霉（Trichoderma reesei pdman-2）工程菌。本发明从斜卧青霉中克隆得到一个新型甘露聚糖酶基因，并分别构建了重组表达该基因的毕赤酵母工程菌和里氏木霉工程菌。所述毕赤酵母工程菌所产甘露聚糖酶的最适pH为4.5，最适温度为55℃，在pH2.0-7.0范围内酶活稳定，且耐胃酸和胃蛋白酶；所述里氏木霉工程菌所产甘露聚糖酶的最适pH4.5，最适温度为55℃，在pH3.5
一种甘露聚糖及其重组表达菌株

[发明专利]一种分泌葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202110535932.6在审
发明人：谭天伟;陈浩 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2021-05-17 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种分泌葡萄糖氧化酶的基因工程菌。该工程菌是采用毕赤酵母菌为宿主细胞，通过导入编码葡萄糖氧化酶(GOX)的基因或经过密码子优化的编码葡萄糖氧化酶(GOX)的基因，并通过强化表达毕赤酵母泛素化转运基因构建而得，该菌为高效分泌葡萄糖氧化酶的基因工程菌本发明还涉及一种分泌葡萄糖氧化酶的基因工程菌的构建方法。该方法通过过表达与分泌表达相关的泛素化基因，增强了葡萄糖氧化酶的分泌表达水平，且操作简易，可应用高产葡萄糖氧化酶菌株的构建及葡萄糖氧化酶的工业化制备，具有很好的市场应用前景。
一种分泌葡萄糖氧化酶基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种高效转化棘白菌素B的基因工程菌及其制备方法-CN201010505210.8有效
发明人：李继安;刘爱娟;邵雷;陈代杰;周雨朦 -专利权人：上海医药工业研究院
申请日： 2010-10-13 - 公布日： 2012-05-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效转化棘白菌素B的基因工程菌及其制备方法。该基因工程菌是在变铅青链霉菌Streptomyces lividans野生菌株的基因组中整合有棘白菌素B去酰化酶基因的表达盒的工程菌。通过棘白菌素B转化验证，该基因工程菌的转化效率较犹他游动放线菌Actinoplanes utahensis野生菌株提高1.5倍。
一种高效转化菌素基因工程及其制备方法

[发明专利]一种木糖醇基因工程菌及其混合转化生产木糖醇的方法-CN201210209060.5有效
发明人：齐向辉;郭齐;王飞;邓文颖;王亮;孙文敬;陈华友;蒙健宗;张云光 -专利权人：江苏大学
申请日： 2012-06-25 - 公布日： 2013-02-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种木糖醇基因工程菌及其混合转化生产木糖醇的方法，涉及生物技术领域。本发明提出构建一种木糖醇基因工程菌E.coliBL21-xdh06，该工程菌是通过PCR方法，从氧化葡糖杆菌(Gluconobacteroxydans)获得木糖醇脱氢酶（xylitoldehydrogenase，XDH）基因xdh，将其克隆并在宿主菌E.coliBL21进行稳定高效表达。该基因工程菌表达的木糖醇脱氢酶，其酶活性提高了10倍，利用该基因工程菌和氧化葡糖杆菌混合静止转化D-阿拉伯糖醇生产木糖醇，D-阿拉伯糖醇的转化率由29%提高到91.6%。
一种木糖醇基因工程及其混合转化生产方法

[发明专利]一种AKP异源表达工程菌及其构建方法和高酶活性碱性磷酸酶的制备方法-CN202110757108.5有效
发明人：尹佳;董亚超;杨焕胜;何流琴;谢俊雁 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2021-07-05 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种AKP异源表达工程菌，以枯草芽孢杆菌(B.subtilis)为宿主，在该宿主细胞内转入携带有大肠杆菌(E.coli)phoA基因的重组质粒后而获得；所述大肠杆菌phoA基因的核苷酸序列如还公开了该AKP异源表达工程菌的构建方法以及利用该AKP异源表达工程菌制备高酶活性碱性磷酸酶的方法。该AKP异源表达工程菌发酵的浓缩酶蛋白作为酶制剂，热稳定性好，酶活性高，对炎症有抑制作用，可增强仔猪免疫力和抗病力，促进动物的生长发育，为生猪产业提供可持续发展动力。
一种 akp 表达工程及其构建方法活性碱性磷酸酶制备

[发明专利]一种产广谱耐热细菌素基因工程菌及其构建方法与应用-CN201310008505.8无效
发明人：崔德凤;张永红;阮文科;李焕荣;刘凤华 -专利权人：北京农学院
申请日： 2013-01-10 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了产广谱耐热型细菌素基因工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种基因工程菌，细菌素的编码基因如序列1DNA分子或与序列1DNA分子杂交且有相同功能的DNA分子或与上述DNA分子具有90％以上同源性而且具有相同功能的DNA分子。其步骤：(1)细菌素编码基因引物的设计与扩增(2)PCR产物的纯化、回收，克隆与鉴定(3)目的基因与表达载体质粒pET-28a(+)的酶切(4)目的基因与表达载体质粒的连接与转化(5)重组基因工程菌的鉴定与细菌素表达本发明提供的基因工程菌可超量表达耐热型广谱细菌素，稳定性好可连续批量生产。
一种广谱耐热细菌基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其制备方法-CN201910151123.8在审
发明人：张庆芳;胡善松;迟乃玉;刘春莹;李美玉 -专利权人：大连大学
申请日： 2019-02-28 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明属于生物工程领域，特别涉及一种产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其制备方法。产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌是以CGMCCNO.17228为出发菌株，通过基因合成获得基因，并构建表达载体pET28a‑GOD，将表达载体倒入大肠杆菌BL21构建获得所述的产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌本发明还提供了所述产GOD的基因工程菌用于发酵生产GOD的应用。构建一种能大幅提高低温葡萄糖氧化酶产量、缩短发酵时间的基因工程菌，从而解决了现有野生菌株活力低，发酵时间长等缺点，具有广泛的工业应用前景。
基因工程菌葡萄糖氧化酶发酵构建制备构建表达载体生物工程领域大肠杆菌表达载体出发菌株工业应用基因合成野生菌株基因应用生产