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[发明专利]一种重组红霉素工程菌及其构建方法和筛选方法和应用-CN202010545166.7有效
发明人：储炬;厉晓波;乔丽佳;庄英萍 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2020-06-16 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本申请公开了一种重组红霉素工程菌及其构建方法和筛选方法，以及所述重组红霉素工程菌在生产红霉素中的应用。所述重组红霉素工程菌是在红霉素产生菌中同时过量表达sucA基因和sucB基因所得。尤其是，所述重组红霉素工程菌是在红霉素高产菌HL3168‑E3中同时过量表达sucA基因和sucB基因所得。相较于红霉素高产菌HL3168‑E3，本申请所述重组红霉素工程菌在基础培养基培养后，发酵液中红霉素的浓度提高了40％，红霉素的浓度达到700mg/L。
一种重组红霉素工程及其构建方法筛选应用

[发明专利]一种假单胞菌水解脱卤酶的编码基因、基因工程菌及其应用-CN202310930033.5在审
发明人：徐毅;谷心奥;吴小梅;马宝娣;高峰;高华美 -专利权人：上海应用技术大学
申请日： 2023-07-27 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明属于生物工程技术领域，尤其是涉及一种假单胞菌水解脱卤酶的编码基因、表达所述假单胞菌水解脱卤酶的重组表达载体、表达假单胞菌水解脱卤酶的基因工程菌、基因工程菌的发酵培养方法和利用表达假单胞菌水解脱卤酶的基因工程菌制备法匹拉韦中间体的方法假单胞菌水解脱卤酶基因序列如SEQ ID NO.1所示。与现有技术相比，本发明首次利用假单胞菌水解脱卤酶催化制备法匹拉韦中间体，并使假单胞菌水解脱卤酶基因能够在工程菌中实现高效表达。
一种假单胞菌水解脱卤酶编码基因基因工程及其应用

[发明专利]一株黑曲霉基因工程菌及构建方法与应用-CN202111457265.0在审
发明人：应汉杰;张涛;陈勇;孙文俊;朱家庆;刘丽;蒋颖;赵伟;余斌 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-12-02 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明公开了一株黑曲霉基因工程菌及构建方法与应用，所述重组黑曲霉基因工程菌为在出发菌中过表达铁获取调控基因AcuK，得到重组黑曲霉基因工程菌。本发明通过基因敲除手段构建了一株铁获取调控基因AcuK过表达的重组黑曲霉基因工程菌。该重组基因工程菌使黑曲霉在固定化发酵产柠檬酸过程中生物膜量增加的同时减轻载体抱团现象，发挥出固定化发酵的优势，提高了柠檬酸的产量，缩短了发酵周期。
一株黑曲霉基因工程构建方法应用

[发明专利]一种生产葡萄糖淀粉酶的方法-CN201210251820.9在审
发明人：张爱联;罗进贤;刘振旺;张添元;符仙;沈锦城 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2012-07-09 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： C12N15/56 文献下载
摘要：首先克隆曲霉、毛壳菌和酵母的葡萄糖淀粉酶基因；构建含以上三种葡萄糖淀粉酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体、酿酒酵母表达载体和枯草芽孢杆菌表达载体，并将其载体分别转化相对应的宿主菌；分别筛选高表达以上所述的三种葡萄糖淀粉酶的重组子作为工程菌；发酵毕赤酵母工程菌、酿酒酵母工程菌和枯草芽孢杆菌工程菌生产重组混合葡萄糖淀粉酶。与传统的由单基因编码的葡萄糖淀粉酶不同，本发明生产的重组混合葡萄糖淀粉酶的适合反应的温度和pH范围广，适合于多种用途；由于实现三个酶基因同时在工程菌中表达，使葡萄糖淀粉酶的产量得到显著提高，起到降低生产成本作用
一种生产葡萄糖淀粉酶方法

[发明专利]一种具有降血压功能的乳酸菌基因工程菌及其构建方法与应用-CN202011484636.X在审
发明人：周炜;杨仁琴;徐广新;杨忠良;印伯星;张宜辉;姜毓君;姜庆林;刘阳;张海霞;吴连萍;李沐蓉;顾文静;陈佳;贾若微;胡潇 -专利权人：扬州市扬大康源乳业有限公司
申请日： 2020-12-16 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：一种具有降血压功能的乳酸菌基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。为了利用表达血管紧张素转移酶ACE抑制肽的乳酸菌治疗高血压，本发明提供了一种具有降血压功能的乳酸菌基因工程菌，该乳酸菌基因工程菌的构建方法是将混合多肽序列(MP)基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因在乳酸菌中共表达这种构建方式不但能够克服短肽不易表达的问题，有效的提高乳源ACE抑制肽的产量，还可以使混合串联多肽能够耐受菌体的酶系统而不易被降解，获得的乳酸菌基因工程菌可用于制备具有降血压功能的食品或药品。
一种具有血压功能乳酸菌基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种脂肪酸延长酶基因在酵母合成神经酸中的应用-CN202011302605.8在审
发明人：王士安;韩兴丰;阮建昌;苏航;史鹏辉;樊伟明;李福利 -专利权人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所;浙江震元制药有限公司
申请日： 2020-11-19 - 公布日： 2022-05-20 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：具体地，本发明提供了一种用于生产神经酸的工程菌，所述工程菌的基因组中整合有基因表达盒，所述的基因表达盒表达3‑酮酯酰‑CoA合酶(KCS)基因所编码的蛋白。本发明的工程菌可显著提高神经酸的产量。
一种脂肪酸延长基因酵母合成神经中的应用

[发明专利]克雷伯氏菌工程菌及其生产甘油和二羟基丙酮的应用-CN202010040482.9有效
发明人：郝健;王轶可;孙少琦;史吉平 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2020-01-15 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了克雷伯氏菌工程菌及其生产二羟基丙酮和甘油的方法和应用。所述克雷伯氏菌工程菌为转入并表达磷酸二羟丙酮磷酸化酶基因的克雷伯氏菌；所述克雷伯氏工程菌还包括在失活磷酸丙糖异构酶、乳酸脱氢酶、乙酰乳酸脱羧酶的克雷伯氏菌中表达磷酸二羟丙酮磷酸化酶基因。将克雷伯氏菌工程菌接种到以葡萄糖为碳源的培养基中发酵培养，经过培养可以发酵生产二羟基丙酮和甘油。本发明通过基因改造提供的克雷伯氏工程菌可以将葡萄糖高效转化为二羟基丙酮和甘油。
克雷伯氏菌工程及其生产甘油羟基丙酮应用

[发明专利]一种重组表达载体、基因工程菌及菌的培养方法和应用-CN202111269631.X在审
发明人：徐毅;王自稳;吴小梅;马宝娣;高峰 -专利权人：上海应用技术大学
申请日： 2021-10-29 - 公布日： 2022-01-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种腈水合酶基因表达的基因工程菌，具体涉及一种重组表达载体、基因工程菌及菌的培养方法和应用，重组表达载体含有一段腈水合酶基因，该腈水合酶基因序列如SEQ ID NO.1所示；基因工程菌为携带该重组表达载体的宿主微生物；培养方法为将宿主微生物在LB培养基中培养得到种子液，之后将种子液接种到发酵培养基中进行培养，得到基因工程菌。与现有技术相比，本发明的腈水合酶基因能够在工程菌中实现高效表达并且其酶活性极好，经测定比酶活可达50U/mg以上，在优选条件下可以达到100U/mg，因而催化合成烟酰胺效率高，转化率可达99％以上，生产效率达到
一种重组表达载体基因工程培养方法应用

[发明专利]一种基因工程菌、制备及其用途-CN200610027929.9无效
发明人：马明浩;吴自荣;黄静;胡荣章;叶海峰;金丽 -专利权人：华东师范大学
申请日： 2006-06-21 - 公布日： 2007-10-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种基因工程菌，以及该基因工程菌的制备方法及其用途，属于生物工程技术领域。该基因工程菌由重组质粒和宿主菌构成，其中宿主菌指的是大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或Rosetta－gami(DE3)中的任意一种，重组质粒指的是含GAD65基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建方法包括设计Nest－PCR上游和下游引物，用PCR从人胰腺cDNA库中扩增人GAD65基因片断，并通过表达载体转化到大肠杆菌获得高效表达重组人GAD65的基因工程菌。本发明提供的基因工程菌的用途为用于生产可溶的具有活性的硫氧还蛋白－人谷氨酸脱羧酶65融合蛋白，以及具有活性的重组人GAD65。具有表达量高、成本低，表达获得的重组人谷氨酸脱羧酶融合蛋白直接就有酶学活性和免疫学活性，纯化步骤简便，易于操作，得率高等显著效果。
一种基因工程制备及其用途

[发明专利]一种用酿酒酵母工程菌联合降解植物的木质素的方法-CN201410053275.1在审
发明人：张爱联;符仙;杨穗珊 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2014-02-12 - 公布日： 2015-08-12 - 主分类号： D21C5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用毕赤酵母工程菌联合降解植物的木质素的方法。属生物技术领域。从微生物中克隆锰过氧化物酶基因、木质素过氧化物酶基因和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因的毕赤酵母表达载体、含木质素过氧化物酶基因的毕赤酵母表达载体和含漆酶基因的毕赤酵母表达载体。分别将以上所述的三种表达载体转化毕赤酵母，用G418抗性筛选而获得含锰过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌和含漆酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌。将这三种工程菌与植物原料作用而联合降解植物的木质素。本发明的优点体现于：这三种毕赤酵母工程菌对木质素的降解作用强于当前应用于降解植物的木质素的天然的微生物。
一种酿酒酵母工程联合降解植物木质素方法

[发明专利]一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法-CN201310134624.8无效
发明人：张爱联;符仙;杨穗珊;尹慧祥 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2013-04-03 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法。属生物技术领域。从微生物中克隆锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因的表达载体、含木质素过氧化物酶基因的表达载体和含漆酶基因的表达载体。分别将以上所述的三种表达载体转化枯草芽孢杆菌，用G418抗性筛选而获得含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌和含漆酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌将这三种工程菌与植物原料作用而联合降解植物的木质素。本发明的优点体现于：这三种枯草芽孢杆菌工程菌对木质素的降解作用强于当前应用于降解植物的木质素的天然的微生物。
一种枯草芽孢杆菌工程联合降解植物木质素方法

[发明专利]一种用毕赤酵母工程菌联合降解植物的木质素的方法-CN201310134637.5无效
发明人：张爱联;符仙;杨穗珊;尹慧祥 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2013-04-03 - 公布日： 2013-08-07 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种用毕赤酵母工程菌联合降解植物的木质素的方法。属生物技术领域。从微生物中克隆锰过氧化物酶基因、木质素过氧化物酶基因和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因的毕赤酵母表达载体、含木质素过氧化物酶基因的毕赤酵母表达载体和含漆酶基因的毕赤酵母表达载体。分别将以上所述的三种表达载体转化毕赤酵母，用G418抗性筛选而获得含锰过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌和含漆酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌。将这三种工程菌与植物原料作用而联合降解植物的木质素。本发明的优点体现于：这三种毕赤酵母工程菌对木质素的降解作用强于当前应用于降解植物的木质素的天然的微生物。
一种用毕赤酵母工程联合降解植物木质素方法

[发明专利]高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用-CN200410054397.9无效
发明人：黄静;吴自荣;左翼;徐进;楼旻;徐伟东 -专利权人：华东师范大学
申请日： 2004-09-08 - 公布日： 2005-03-02 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：一种高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽－1基因，即GLP－1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21 (DE3)或BLR(DE3)。该基因工程菌的构建方法是在DNA水平上，将含有人胰高血糖素样肽－1基因的DNA序列串联为多聚体，构建成表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌。用该基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的人胰高血糖素样肽－1融合蛋白和制备人胰高血糖素样肽－1三步可生产人胰高血糖素样肽－1。本发明有以下优点： 1.构建基因工程菌的人胰高血糖素样肽－1的表达量高；2.用该基因工程菌生产人胰高血糖素样肽－1时，纯化步骤简便，得率高，生产成本低。
高效表达人胰高血糖素样肽基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种利用纤维素制备金合欢烯的工程菌株及方法-CN201811151086.2有效
发明人：高岚;齐崴;尤生萍;陶志平;李妍;苏荣欣;李宝石;蔺建民 -专利权人：中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司石油化工科学研究院
申请日： 2018-09-29 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本公开提供了一种工程菌株，该工程菌株是保藏编号为CGMCC NO.14821的大肠杆菌。本公开还提供了一种制备工程菌的方法，该方法包括：在工程菌宿主菌的基因组中敲入乙酸激酶后进行重组质粒的转入，使得转入后的所述工程菌宿主菌能够过表达乙酸激酶并且能够表达所述重组质粒中所插入的基因；所述重组质粒包括如本公开还提供了该方法制备得到的工程菌、上述工程菌株和工程菌的用途以及一种利用纤维素制备金合欢烯的方法。本公开通过上述技术方案，显著地提高了利用纤维素水解产物发酵生产金合欢烯的产率。
一种利用纤维素制备金合欢工程菌株方法

[发明专利]利用纤维素制备金合欢烯的工程菌株及方法-CN201811151088.1有效
发明人：高岚;李宝石;齐崴;陶志平;尤生萍;李妍;苏荣欣;蔺建民 -专利权人：中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司石油化工科学研究院
申请日： 2018-09-29 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本公开提供了一种工程菌株，该工程菌株是保藏编号为CGMCC NO.14819的大肠杆菌。本公开还提供了一种制备工程菌的方法，该方法包括：在工程菌宿主菌的基因组中敲入乙酸激酶后进行重组质粒的转入，使得转入后的所述工程菌宿主菌能够过表达乙酸激酶并且能够表达所述重组质粒中所插入的基因；所述重组质粒包括如本公开还提供了该方法制备得到的工程菌、上述工程菌株和工程菌的用途以及一种利用纤维素制备金合欢烯的方法。本公开通过上述技术方案，显著地提高了利用纤维素水解产物发酵生产金合欢烯的产率。
利用纤维素制备金合欢工程菌株方法