本发明公开了一种按毕赤酵母偏爱密码子优化的碱性木聚糖酶基因xynAI及其表达。该基因xynAI来源于喜碱菌(Bacillussp.),原始基因为xynA(GenBank Accession No.U51675.1),按照毕赤酵母密码子偏爱性进行优化,优化序列与原序列同源性为78%。通过采用连续延伸PCR方法合成得到优化序列,所述优化核苷酸序列如SEQ ID No 1,全长561bp,其编码的蛋白质序列如SEQ ID No 2,共186个氨基酸。通过将该优化序列构建到毕赤酵母表达载体并转化入毕赤酵母中表达,可用于木聚糖酶的生产。
本发明重组毕赤酵母工程菌包括密码子优化的里氏木霉菌木聚糖酶基因,所述基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了一种重组毕赤酵母工程菌的生产方法,包括如下步骤:(1)根据毕赤酵母偏爱密码子,将里氏木霉木聚糖酶基因进行同义突变,全部突变为毕赤酵母偏爱密码子;(2)利用全基因合成技术合成优化后的木聚糖酶基因
角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物,它涉及一种几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物。本发明解决了chi58在巴斯德毕赤酵母中不能高效表达的问题。本发明密码子偏爱性突变体基因序列如SEQ ID NO:2所示。本发明引物Pn1~Pn6的基因序列分别如SEQ ID NO:5、6、7、8、9和10所示。本发明通过融合PCR法获得密码子偏爱性突变体基因。
本发明公开了属于生物化学与分子生物学技术领域的一种密码子优化的β‑半乳糖苷酶基因及其应用。该β‑半乳糖苷酶的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明根据牛乳汁中相关高表达蛋白密码子的偏爱性,对细菌来源的β‑半乳糖苷酶基因的密码子进行优化。优化后的OLacZ基因在小鼠乳腺上皮细胞中进行验证,证明其相对于野生型的LacZ基因表达量有着显著提高,约3.7倍。经密码子优化的OLacZ基因在泌乳期母鼠的乳腺组织中,更能有效表达。
本发明提供了一种重组表达的羊干扰素‑τBB8基因及其制备方法,重组表达的羊干扰素‑τBB8基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1,全部优化替换为大肠杆菌偏爱的密码子,即在羊干扰素‑τBB8天然基因序列的5’端插入NdeI位点,3’端插入终止密码子与HindIII位点设计得到;本发明首次在大肠杆菌系统中表达出有活性的羊干扰素‑τBB8蛋白,人工设计合成的羊干扰素‑τBB8基因选用大肠杆菌偏爱密码子,有利于密码子在大肠杆菌中的识别和表达