本发明提供了一种催化活性得到提高的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的突变体及其应用,具体地,本发明提供了一种突变的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶,所述突变的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶在包括选自下组的至少3个位点发生突变:在野生型的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的对应于SEQ ID NO.:1的第73位天冬氨酸(D)、第111位酪氨酸(Y)、第188位天冬酰胺(N)、第250位甘氨酸(G)。本发明的突变的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶具有非常高的催化活性,此外,本发明的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶还具有很高的催化效率(高达29.6%)。