[发明专利]一种利用无血清培养基生产PEDV弱毒疫苗的方法有效
| 申请号： | 201810690966.0 | 申请日： | 2018-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN108853489B | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 杜恩岐;陈瑞 | 申请（专利权）人： | 陕西诺威利华生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/215 | 分类号： | A61K39/215;A61P31/14;C12N7/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 712100 陕西省咸阳市陕西省杨凌*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用无血清培养基生产PEDV弱毒疫苗的方法，其特征在于，所述无血清培养基由基础培养基，牛血清白蛋白，皮质醇，胰岛素，转铁蛋白，谷胱甘肽，胰蛋白酶，牛磺酸和亚硒酸钠组成，其中牛磺酸和亚硒酸钠的重量份配比比例为2‑3:1。该培养基不添加动物血清，极大地降低了生产成本，提高了生产的经济效益，并且还避免了血清使用所带来的诸多问题。 | ||
| 搜索关键词： | 无血清培养基 弱毒疫苗 亚硒酸钠 牛磺酸 胰蛋白酶 牛血清白蛋白 基础培养基 重量份配比 动物血清 谷胱甘肽 转铁蛋白 培养基 胰岛素 皮质醇 血清 生产 生产成本 | ||
【主权项】：
1.一种利用无血清培养基生产PEDV弱毒疫苗的方法，所述方法包括如下步骤：步骤（1），Vero细胞的复苏；步骤（2），Vero细胞的传代扩增；步骤（3），在Vero细胞上接种PEDV病毒毒株；步骤（4），收获感染细胞培养上清液，病毒液进行澄清过滤；步骤（5），加入冻干保护剂，分装冻干；其中步骤（2）中的传代扩增和步骤（3）中病毒的增殖过程均采用无血清培养基；所述无血清培养基由基础培养基，牛血清白蛋白，皮质醇，胰岛素，转铁蛋白，谷胱甘肽，胰蛋白酶，牛磺酸和亚硒酸钠组成，其中牛磺酸和亚硒酸钠的重量份配比比例为2‑3:1；所述的无血清培养基中：所述的基础培养基是IMDM或者是RPMI‑1640，或者是二者的混合物；所述的牛血清白蛋白的含量为8‑15mg/mL；所述的皮质醇的含量为15‑25μg/mL；所述的胰岛素的含量为10‑20μg/mL；所述的转铁蛋白的含量为10‑15μg/mL；所述的谷胱甘肽的含量为2‑3mM；所述的胰蛋白酶的含量为3‑5μg/mL；所述的牛磺酸的含量为20‑30μg/mL；所述的亚硒酸钠的含量为10‑12μg/mL。
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- 本发明首先应用杆状病毒昆虫细胞系统表达MERS-CoV棘突蛋白N端的一段称为N端结构域(N terminal domain，NTD)的重组蛋白，纯化后分别以高低两种剂量肌肉注射免疫B ALB/c小鼠，通过ELISPot、IgG及中和抗体检测，证明两种剂量的重组亚单位疫苗均有较强的免疫原性，可在小鼠体内诱导有效而持久(至少16周)的体液免疫和细胞免疫应答，可作为理想的疫苗用于预防或治疗MERS-CoV感染。
- 一种鸡新城疫、传染性支气管炎和H9亚型禽流感三联灭活疫苗-201510267652.6
- 焦铁军;蔡曙初;洪嵘;胡江锋;王运宏;黄治国 - 杨凌绿方生物工程有限公司
- 2015-05-22 - 2015-09-23 - A61K39/215
- 本发明公开了提供了一种新城疫、传染性支气管炎和H9亚型禽流感三联灭活疫苗，含有灭活的鸡新城疫病毒La Sota株、传染性支气管炎病毒M41株和H9亚型禽流感病毒SY株；H9亚型禽流感病毒SY株，其保藏编号为CGMCC No.5968。该鸡新城疫、传染性支气管炎和H9亚型禽流感三联灭活疫苗免疫效果良好，制备工艺稳定可靠。
- 一种高效的鸡传染性支气管炎灭活疫苗及其制备方法-201410709073.8
- 曹永长;尹丽娟;薛春宜 - 中山大学
- 2014-11-28 - 2015-03-04 - A61K39/215
- 本发明公开了一种高效的鸡传染性支气管炎灭活疫苗及其制备方法，每0.3ml灭活疫苗的病毒含量不低于(8.67±0.81)×106EID50，或不低于(7.48±0.45)×107病毒粒子数。是通过将鸡传染性支气管炎病毒接种于鸡胚尿囊腔后，收获病毒液，病毒液浓缩后，测定浓缩后病毒液的含量，经甲醛溶液灭活，加入佐剂乳化配制制备得到的。本发明的高效的鸡传染性支气管炎灭活疫苗由于含有浓缩的病毒液，使得抗原的含量提高，对鸡传染性支气管炎呼吸型强毒M41毒株的攻毒保护率达到80％以上，说明本发明的灭活疫苗能对鸡传染性支气管炎毒株提供免疫保护，对鸡传染性支气管炎病具有良好的预防和控制效果。
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