[发明专利]一种利用菜籽粕固态发酵制备环脂肽的方法在审

专利信息
申请号: 201810109528.0 申请日: 2018-02-05
公开(公告)号: CN108330152A 公开(公告)日: 2018-07-27
发明(设计)人: 何荣海;代春华;任晓锋;汤颖秀;马海乐 申请(专利权)人: 江苏大学
主分类号: C12P21/04 分类号: C12P21/04;C12N1/20;C12R1/07
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 212013 江*** 国省代码: 江苏;32
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开一种利用菜籽粕固态发酵制备环脂肽的方法,属于生物技术领域。以菜籽饼粕为原料,添加适量的废糖蜜、无机盐溶液及水制备成固态培养基混合物,向混合物中接入一定比例的甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus)发酵种子液,于一定温度下进行发酵。发酵结束后,发酵产物经过溶剂浸提、调节溶液酸碱性、离心等纯化过程后进行冷冻干燥制得环脂肽产品。本发明利用油脂及蔗糖加工过程中产生的废弃物生产环脂肽,能够降低环脂肽的生产成本。
搜索关键词: 环脂肽 制备 固态发酵 混合物 菜籽粕 发酵 生物技术领域 发酵种子液 固态培养基 甲基营养型 溶液酸碱性 无机盐溶液 菜籽饼粕 发酵产物 溶剂浸提 芽胞杆菌 蔗糖 废糖蜜 生产成本 废弃物 生产
【主权项】:
1.一种利用菜籽粕固态发酵制备环脂肽的方法,按照下述步骤进行:(1)将甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus)用种子培养基进行扩大培养,种子培养基的组成:蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl 5.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH 7.0;按照体积比为2~5%的比例接种活化后的甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus),在25~32℃及180rpm条件下培养10小时;(2)甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus)固态发酵菜籽粕:菜籽粕5~25g,分别加入占菜籽粕质量比为5~15%的废糖蜜及10%的无机盐溶液,然后加入与菜籽粕质量体积比为1:1的水;按照菜籽粕质量体积比为2~10%(v/w)的比例接入步骤(1)中扩大培养后的种子液,于25~32℃发酵24~48h;(3)发酵结束后,添加菜籽粕质量的5~15倍的去离子水浸泡半小时,并逐步添加6mol/L氢氧化钠,将浸提液pH调节至8.0,离心除去菌体,收集上清液;在上清液中缓慢加入6mol/L盐酸,调节pH至2.0,静置30min后离心,收集沉淀;沉淀用0.1mol/L NaNO3洗涤3次,再用去离子水洗涤3次,离心收集沉淀;冷冻干燥,制得环脂肽成品。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏大学,未经江苏大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201810109528.0/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种促进抗菌多肽短杆菌肽合成的培养基及其培养方法-201910467895.2
  • 刘红美;盛淼淼;贾化可 - 贵州医科大学
  • 2019-05-31 - 2019-09-24 - C12P21/04
  • 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种促进抗菌多肽短杆菌肽合成的培养基及其培养方法。所述培养基的原料组成包括碳源15~25份、氮源2~3份、K2HPO4 1~3份、MgSO4·7H2O 1~3份;在促进短芽孢杆菌中的线性短杆菌肽合成方面,与常规NA、NB等培养基相比,成品SAM液体培养基能大大促进线性短杆菌肽合成酶编码基因的表达,表达量约是常规NB液体培养基的7~9倍,从而大幅度提高线性短杆菌肽的合成量,具体表现为对病原菌白色念珠菌的抑菌圈增大;所述培养方法所培养出的线性短杆菌肽不但能满足研究需求,而且能促进线性短杆菌肽的提取纯化与开发应用。
  • 一种生物表面活性素的生产方法-201610046208.6
  • 陆兆新;唐伟;吕凤霞;别小妹;赵海珍;张充 - 南京农业大学
  • 2016-01-22 - 2019-06-04 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种生物表面活性素的生产方法,将解淀粉芽孢杆菌fmb50先后接种于PDA斜面培养基进行培养,培养后再接种于BPY种子培养基继续培养,最后再接种于发酵培养基培养后得到含有生物表面活性素的培养液;然后将培养液加水稀释后调节pH,再通过加入壳聚糖、海藻酸钠和硅藻土进行絮凝后过滤;最后将滤饼使用低级醇溶解提取后过滤,将滤液减压蒸馏得到生物表面活性素粗品。本发明提供的生物表面活性素的生产方法能够实现工业化制备生物表面活性素,并且制备得到的生物表面活性素纯度高,有效弥补了目前生物表面活性素不能大规模生产的不足。
  • 一种固定化微生物酶转化棘白菌素B的方法-201811500746.3
  • 朱辉;易欣;曹艳茹;朱春燕;龙燕;莫洪;庞雪;包希臻 - 成都雅途生物技术有限公司
  • 2018-12-07 - 2019-04-09 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种固定化微生物酶转化棘白菌素B的方法,属于生物工程领域,包括以下步骤:(1)犹他游动放线菌发酵,收集菌丝,利用细胞破碎仪,采用超声破碎的方法使细胞破碎,离心取上清液,得棘白菌素B脱酰酶的粗酶液;(2)向步骤(1)中的粗酶液中缓慢加入硫酸铵溶液,得沉淀;(3)将步骤(2)中的沉淀溶解于缓冲盐水溶液中;(4)向步骤(3)中加入海藻酸钠,搅拌均匀后滴加预冷的氯化钙水溶液,置于冰箱过夜,过滤得固定化微生物酶;(5)将棘白菌素B溶解乙醇中,并加入步骤(4)所述的固定化微生物酶,转化收集滤液,得棘白菌素B母核溶液。转化率高,转化时间短,产物易分离,转化液色素少,固定化酶易于保存且可重复使用。
  • 一种从凝结芽孢杆菌中提取环(甘-酪)二肽的方法-201610113919.0
  • 陈林;郭庆丰;马经纬;康文艺 - 黄河科技学院
  • 2016-03-01 - 2019-01-04 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种从凝结芽孢杆菌(芽孢乳酸菌)中提取环(甘‑酪)二肽的方法方法。制备环(甘‑酪)二肽方法主要包括菌种活化及培养,粗提物的获得,将粗提物经硅胶柱层析粗分,凝胶柱层析细分,并经HPLC进一步纯化,TLC跟踪检测,得到化合物经核磁检测并与文献对比鉴定为环(甘‑酪)二肽。本发明所用原料凝结芽孢杆菌是一种益生菌,安全无害,提取工艺简单,成本低;制得的化合物纯度高。
  • 一种从凝结芽孢杆菌中提取环(脯-甘)二肽的方法-201610181178.X
  • 陈林;郭庆丰;马经纬;康文艺 - 黄河科技学院
  • 2016-03-28 - 2019-01-04 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种从凝结芽孢杆菌中提取环(脯‑甘)二肽的方法方法。制备环(脯‑甘)二肽方法主要包括菌种活化及培养,粗提物的获得,将粗提物经硅胶柱层析粗分,利用重结晶法纯化,TLC跟踪检测,得到化合物经核磁检测并与文献对比鉴定为环(脯‑甘)二肽。本发明所用原料凝结芽孢杆菌是一种益生菌,安全无害,提取工艺简单,成本低;制得的化合物纯度高。
  • 一种制备白僵菌素的方法-201410211035.X
  • 张立新;贺伟;刘梅 - 中国科学院微生物研究所
  • 2014-05-19 - 2018-08-07 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种制备白僵菌素的方法。该制备白僵菌素的方法,包括在装有玉米渣培养基的发酵容器中固体发酵层出镰孢(Fusarium proliferatum)CGMCC3.1777,收集固体发酵产物得到白僵菌素的步骤;所述玉米渣培养基是用水和玉米渣制成的含水量为50%(质量百分含量)的固体培养基;将所述发酵容器置于24℃‑28℃、相对湿度为50%‑100%的环境中进行所述固体发酵。该方法的白僵菌素产量达3405mg/g固体发酵产物。
  • 一种利用菜籽粕固态发酵制备环脂肽的方法-201810109528.0
  • 何荣海;代春华;任晓锋;汤颖秀;马海乐 - 江苏大学
  • 2018-02-05 - 2018-07-27 - C12P21/04
  • 本发明公开一种利用菜籽粕固态发酵制备环脂肽的方法,属于生物技术领域。以菜籽饼粕为原料,添加适量的废糖蜜、无机盐溶液及水制备成固态培养基混合物,向混合物中接入一定比例的甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus)发酵种子液,于一定温度下进行发酵。发酵结束后,发酵产物经过溶剂浸提、调节溶液酸碱性、离心等纯化过程后进行冷冻干燥制得环脂肽产品。本发明利用油脂及蔗糖加工过程中产生的废弃物生产环脂肽,能够降低环脂肽的生产成本。
  • 一种利用犹他游动放线菌转化棘白菌素B的方法-201610740380.1
  • 张贵民;薛国希 - 鲁南制药集团股份有限公司
  • 2016-08-27 - 2018-03-09 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种利用犹他游动放线菌转化棘白菌素B的方法,包括如下步骤(1)犹他游动放线菌经过培养得到菌液,离心收集菌体,悬浮于缓冲盐水溶液中,加入海藻酸钠水溶液,混匀后平稳的注入CaCl2水溶液中进行固定化,将所得固定化小珠装柱备用;(2)将棘白菌素B溶解于有机溶剂中,然后加入缓冲盐水溶液中,使棘白菌素B的浓度为0.1~5g/L,再缓慢加入到步骤1)得到的柱子中进行转化。本发明具有工艺简单、成本低廉的显著优势,且制备得到的固定化细胞具有稳定性好、转化率高且能多次重复使用的优点。
  • 卡泊芬净发酵中间体的发酵方法-201710048169.8
  • 袁建栋;王其龙;别一 - 信泰制药(苏州)有限公司
  • 2017-01-20 - 2017-12-22 - C12P21/04
  • 本发明涉及卡泊芬净发酵中间体的发酵方法,提供一种在提高纽莫康定B0发酵单位的同时,降低纽莫康定C0的含量的方法,在该方法中使用的菌种为Glarea lozoyensis,本发明培养基采用稀配方,发酵过程中流加乳糖和氨水,能够有效降低菌体粘度,提高通气效果,同时在发酵过程中严格控制pH。与此同时,在发酵液中补加维生素b5,现有纽莫康定B0的发酵技术中,纽莫康定B0的发酵单位约为800~1000mg/l,本发明发酵方法可将发酵单位提高至2000~2500mg/l,且纽莫康定C0的含量大幅下降。
  • 一种纽莫康定B0的发酵方法-201710047083.3
  • 袁建栋;王其龙;别一 - 信泰制药(苏州)有限公司
  • 2017-01-20 - 2017-05-31 - C12P21/04
  • 本发明提供一种提高纽莫康定B0发酵单位的方法,在该方法中使用的菌种为Glarea lozoyensis,本发明培养基采用稀配方,发酵过程中流加乳糖和氨水,能够有效降低菌体粘度,提高通气效果,同时在发酵过程中严格控制pH。流加乳糖后,发酵液总糖浓度控制在1~3%之间,在这个范围内菌丝的正常生长代谢是稳定的,过低则影响正常代谢,过高则不利于下一步的放罐提取。现有纽莫康定B0的发酵技术中,纽莫康定B0的发酵单位约为800~1000mg/l,本发明发酵方法可将发酵单位提高至2000~2500mg/l。
  • 一种粘杆菌素发酵菌渣的循环无害化处理方法-201510476857.5
  • 徐珍 - 河北圣雪大成制药有限责任公司
  • 2015-08-06 - 2017-02-22 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种粘杆菌素发酵菌渣的循环无害化处理方法,具体涉及抗生素发酵菌渣循环利用领域。本发明包括如下步骤:a.将粘杆菌素发酵菌渣添加有机氮源和有机碳源的混合物后经混匀,压榨得到菌渣预混物;b.将步骤a中的菌渣预混物进行固态发酵;c.将步骤b中的菌渣固态发酵产物经85‑95℃烘干、粉碎、过60目筛后,获得菌渣粉末;d.将步骤c得到的菌渣粉末替代粘杆菌素发酵培养基中25‑45%的豆粕粉进行再利用。本发明通过菌渣改性的方法实现了粘杆菌素发酵菌渣的循环利用,既节省了部分原材料,又解决了粘杆菌素菌渣不易处理的难题,具有工艺简单可行,成本低廉,又不影响粘杆菌素发酵效果等优点。
  • 一种米卡芬净前体的制备方法-201611065066.4
  • 游云龙;付静;曹峥;杨亮;赵永俊;蔡云洁;金丹甜 - 无锡福祈制药有限公司
  • 2016-11-28 - 2017-02-15 - C12P21/04
  • 本发明提供了一种米卡芬净前体的制备方法,该制备方法通过少量的米卡芬净前体产生菌孢子悬液并培养,并在发酵进行过程中向发酵液中加入氧载体,提高发酵罐内的溶解氧浓度,提高了米卡芬净前体的产量20%~40%;发酵液经酸化破壁处理,并使用大孔树脂吸附极性溶剂解析得到米卡芬净前体解析液,再由解析液通过结晶得到米卡芬净前体物粉末;本发明能够得用于合成米卡芬净前体,并且操作程序简单,方法稳定,重现性好,非常适合产业化生产;同时,避免使用酮等有毒溶剂,减低了对环境及人体的危害性。
  • 细胞培养基-201480075947.7
  • A.埃尔霍菲;A.韦伯 - 基本药品有限责任公司
  • 2014-12-19 - 2016-10-26 - C12P21/04
  • 本发明大体上涉及一种培养基,例如血清替代物、培养基补充物、完全培养基或低温保存培养基,所述培养基包含基础生理缓冲剂和包含胆固醇、卵磷脂以及脂肪酸的脂质体。预期与不使用本文中所描述的血清替代物培养的细胞相比,培养基提供改良的培养中细胞生长的优点。
  • 一种提高棘白菌素B产量的方法-201610176112.1
  • 郑裕国;邹树平;熊严;牛坤 - 浙江工业大学
  • 2016-03-25 - 2016-07-06 - C12P21/04
  • 本发明公开了一种提高棘白菌素B产量的方法,所述方法为:以构巢曲霉CCTCC M 2012300为生产菌株,将构巢曲霉CCTCC M 2012300接种至添加有金属离子的发酵培养基中,在20~30℃、220~280rpm下培养7~12天,得到发酵液,发酵液经分离纯化得到棘白菌素B;本发明提供一种通过添加金属离子提高阿尼芬净前体化合物棘白菌素B产量的方法,通过在发酵培养基中添加硫酸锰、氯化钙、硫酸铜、氯化亚铁、硫酸镁等提高阿尼芬净前体化合物棘白菌素B产量;结果表明,在发酵培养体系中最高产量达到1738.6mg/L,比不加金属离子的对照组提高了64.7%,本发明对于利用构巢曲霉(Aspergillus nidulans)为生产菌株发酵生产棘白菌素B具有重要意义。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top