本发明公开了一种利用酵母菌重组表达限制性内切酶MlyI的方法，具体为：将含有如SEQ ID NO.2所示序列的片段连接至质粒中，再转化至大肠杆菌感受态细胞，挑取单克隆菌落并抽提重组质粒，将重组质粒线性化后转化至酵母感受态细胞中，培养后筛选表达株；扩培所述表达株后诱导培养，待培养结束后，离心收集上清液，纯化上清液。本发明直接以酵母宿主表达生产限制性内切酶，并且MlyI为可胞外分泌型表达于培养基中；该方法制备的限制性内切酶MlyI产量和酶活性较高，且生产成本低，可以快速实现工业化转产，为限制性内切酶对高质量要求和大量要求的制药、疫苗等领域的应用提供了可能。
本发明公开了抗基质金属蛋白酶3的单克隆抗体及其制备和应用，所述单克隆抗体为兔单克隆抗体A或兔单克隆抗体B，兔单克隆抗体A的重链CDR区氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3所示且其轻链CDR区氨基酸序列如SEQ ID NO.4～6所示，兔单克隆抗体B的重链CDR区氨基酸序列如SEQ ID NO.7～9所示且其轻链CDR区氨基酸序列如SEQ ID NO.10～12所示；兔单克隆抗体A和兔单克隆抗体B可以用于开发双抗夹心法酶联免疫检测试剂盒，具有检测灵敏度高、稳定性好等优点；而且本发明通过单B细胞克隆技术生产兔单克隆抗体A和兔单克隆抗体B，成本更为低廉，生产更易放大，具有更高的推广价值。
