[发明专利]一种用于检测HPV18的RPA荧光定量引物对、探针、试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201810081154.6 | 申请日： | 2018-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN108315476A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 张大龙;罗春华;戴群莹;胡小伟;韩斌;华绍炳 | 申请（专利权）人： | 杭州德同生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/6804;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自军 |
| 地址： | 310053 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测HPV18的RPA荧光定量引物对、探针、试剂盒及方法。本发明RPA荧光定量引物对是针对HPV18病毒的基因组中的L1区域设计筛选获得的，本发明方法为基于RPA技术的荧光定量检测方法，可用于特异性检测HPV18，该方法操作简便，灵敏度高，反应条件温和，反应时间短，结合便携式的荧光检测仪即可进行病原微生物的快速定量检测。RPA荧光定量扩增后，再用测流层析试纸条结合便携式的干式荧光免疫分析仪进行结果检测分析，从而整个过程中涉及的仪器均为小体积便携式，不受实验仪器和场地限制，并且在很大程度上减少了传统的胶体金等显色法结果判定时人为因素的影响，灵敏度可以达到5拷贝。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光定量引物 灵敏度 试剂盒 探针 检测 病原微生物 荧光免疫分析仪 荧光定量检测 反应时间短 特异性检测 荧光检测仪 场地限制 反应条件 结果检测 结果判定 快速定量 区域设计 实验仪器 荧光定量 传统的 基因组 胶体金 试纸条 显色法 干式 拷贝 可用 扩增 流层 病毒 筛选 分析 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测HPV18的RPA荧光定量引物对，其特征在于，包括上游引物和下游引物，序列为上游引物：5’‑ATATGATTTGCAGTTTATTTTTCAGTTGTGTAC‑3’；下游引物：5’‑ATCATAGGGATCCTTATTTTCAGCCGGTGCAGCAT‑3’，其中，下游引物的5’端连接或者不连接生物素。
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- 2019-06-18 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明提供了一种用于检测黄瓜花叶病毒西番莲分离物的引物，所述引物中一对是鉴定黄瓜花叶病毒西番莲分离物的引物CMV‑657F和CMV‑657R，另一对是用于黄瓜花叶病毒西番莲分离物的实时荧光定量RT‑PCR的引物CMV‑174F和CMV‑174R，还提供了应用，用于黄瓜花叶病毒西番莲分离物的定量检测。本发明结合两对引物的定量检测方法灵敏度高、特异性强、检测结果准确，用于西番莲脱毒苗和田间感病植株的早期鉴定和病毒含量定量分析，为西番莲无病毒良种苗木繁育及推广提供技术支撑。该方法能够在4～5小时对样品中的黄瓜花叶病毒西番莲分离物进行准确定量，不仅节约了时间、简化了实验步骤，还有利于在植物发病之前采取相应的补救措施，防止该病毒在作物间广泛传播所带来的巨大经济损失。
- SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针-201910672178.3
- 王秀明;陈君彦;王玉雯;武瑾贤;魏学峰;刘国英;关平原;范秀丽;张贵刚;王艳杰;刘建奇 - 金宇保灵生物药品有限公司
- 2019-07-24 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针，属于生物技术检测领域。并基于提供的引物和探针开发出了用于同时检测SVA、FMDV、SVDV和VSV的试剂盒。本发明提供的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、敏感性高、重复性好，可以实现对SVA、FMDV、SVDV和VSV同时准确定性和定量检测，将在SVA、FMDV、SVDV和VSV的检测及疫苗生产、例如疫苗生产过程中的质量监控和合理化配苗中发挥重要作用，应用前景广阔。
- 用于检测呼吸道病毒的试剂盒及其应用-201910677694.5
- 卢孟孟;胖铁良;王文轩;马蒙蒙;孙晋华;李建中 - 廊坊诺道中科医学检验实验室有限公司
- 2019-07-25 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种用于检测呼吸道病毒的引物探针组合，包括16对引物及对应的16条探针。本发明还提供了用于检测呼吸道病毒的试剂盒，包括用于检测呼吸道病毒的引物探针组合。本发明还提供了用于检测呼吸道病毒的试剂盒在检测或辅助检测呼吸道病毒中的非诊断目的的应用。应用本发明提供的用于检测呼吸道病毒的试剂盒能同时检测16种呼吸道病毒，实现多重检测，灵敏度高，快捷方便，可实现对样本进行批量检测。
- 新型鹅星状病毒SYBR Green染料法荧光定量PCR检测试剂盒-201910700274.4
- 李宁;刘思当;蔡玉梅;杨玉栋;姜胜男;赵君 - 山东农业大学
- 2019-07-31 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种新型鹅星状病毒荧光定量PCR检测试剂盒。所述荧光定量PCR检测试剂盒中含有SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.2所示的引物对，以及标准品质粒和荧光定量PCR反应试剂。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对新型鹅星状病毒进行检测，该试剂盒的特异性强，只与新型鹅星状病毒特异性结合，与其他鹅源病毒都没有交叉反应；而且检测的灵敏度高，在标准品为1×101‑1×107拷贝范围内都有极好的线性关系，可以高效检测新型鹅星状病毒病鹅组织以及无临床症状的病毒携带鹅，提高了检测效率。
- 非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒-201910773232.3
- 赵林萍;娄亚坤;杨楠;付燕峰;梁小红;任宝红;崔兴涛;曾小宇 - 郑州中道生物技术有限公司;河南中标检测服务有限公司;郑州大学
- 2019-08-21 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒，包括特异性引物ASFV‑F和ASFV‑R，以及RAA‑exo探针ASFV‑P，用四氢呋喃(THF残基)，dT‑荧光团和dT‑淬灭团取代靶标扩增子序列内的碱基，标记的报告荧光染料为FAM，荧光淬灭基团为BHQ‑1，试剂中的核酸外切酶可在THF位点裂解探针，从而分离荧光基团和淬灭基团并产生荧光信号。本发明提供的试剂盒可在37～42℃恒温条件下，20min内实现非洲猪瘟病毒的检测，特异性为100％，检测敏感性为10copies/μl。因此，本发明的试剂盒具有操作简单、快速、灵敏的特点，为非洲猪瘟病毒的现场快速检测筛查提供有效的技术手段。
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