[发明专利]来自苛求芽孢杆菌的两种尿酸酶和其突变体及它们的聚乙二醇修饰与应用有效
| 申请号： | 200910103741.1 | 申请日： | 2009-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN101875922A | 公开（公告）日： | 2010-11-03 |
| 发明（设计）人： | 廖飞;赵运胜;杨晓兰;李想;张纯;冯娟;卜友泉;谢燕玲 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N11/08;C12Q1/62;C12Q1/26;G01N21/33;C12Q1/28;A61K38/44;A61K47/48;A61P19/06;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/07 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400016 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 来自苛求芽孢杆菌的两种尿酸酶和其突变体及它们的聚乙二醇修饰与应用；具体涉及来自苛求芽孢杆菌胞内和胞外的两种天然尿酸酶的同四聚体及它们各自的氨基酸序列，及这两种尿酸酶的N端前七个氨基酸缺失或被替换的突变体、C端缺失不多于十四个氨基酸残基的突变体和同时出现上述两类变化的突变体；这两种天然尿酸酶都抗黄嘌呤且对尿酸亲和力较低，在离子强度低时会解聚而失去活性；这些天然尿酸酶和其突变体都可在N端或C端带组氨酸纯化标签后用大肠杆菌进行重组表达，都可用于测定血清尿酸含量，都可用平均分子量不低于2000的聚乙二醇单甲醚修饰后保留大部分比活性，从而可用于哺乳动物体内降低血浆尿酸水平治疗高尿酸血症相关疾病。 | ||
| 搜索关键词： | 来自 苛求 芽孢 杆菌 尿酸酶 突变体 它们 聚乙二醇 修饰 应用 | ||
【主权项】：
两种尿酸酶蛋白，所述这两种尿酸酶蛋白中天然酶蛋白都是来自苛求芽孢杆菌的同四聚体单纯蛋白质，都可用分子氧催化尿酸氧化并生成过氧化氢。
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- 张耀洲;吴玉乾;冯建华;李冬梅;张树军;陈玉皎;王文雅 - 天津市湖滨盘古基因科学发展有限公司
- 2018-09-11 - 2019-01-15 - C12N9/06
- 本发明涉及一种人的黄素还原酶突变蛋白及其应用，将若干胰腺癌患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的黄素还原酶的突变蛋白，根据该人的黄素还原酶突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为胰腺癌的基因诊断提供指引作用，为实现胰腺癌的诊断和治疗提供科学基础。
- 一种产海洋低温尿酸氧化酶菌株的发酵培养基及发酵条件-201811043734.2
- 迟乃玉;逄飞;窦少华;张庆芳 - 大连大学
- 2018-09-07 - 2018-12-21 - C12N9/06
- 本发明属于酶工程和基因工程领域，具体涉及一种产海洋低温尿酸氧化酶菌株的发酵培养基及发酵条件。本发明产尿酸氧化酶的发酵培养基为：尿酸浓度1.00％，酵母膏0.75％、K2HPO40.25％、MgSO40.05％、KH2PO40.07％；发酵条件为：培养温度25℃、转速160r/min、接种量5％、pH 7.5、装液量125mL/500mL。本发明通过优化后的培养基及发酵条件，尿酸氧化酶酶活由优化前的约12.1U/mL提高到42.57U/mL，比优化前提高了351.2％；且该酶具有较强的耐低温和耐盐性，使该酶能够在更多不同的环境中得到应用，对提高该酶的市场竞争力有着非常重要的意义。
- 一种重组肺炎链球菌二氢叶酸还原酶的制备方法及其应用-201810788522.0
- 梁晓;张启迪;于万鹏 - 青岛农业大学
- 2018-07-18 - 2018-11-23 - C12N9/06
- 本发明公开了一种重组肺炎链球菌二氢叶酸还原酶的制备方法及其应用，所述制备方法包括以下步骤：A.进行目的基因的扩增：以提取肺炎链球菌R6基因组为模板，采用引物P1和P2进行基因扩增；B.重组克隆菌株的构建：将扩增得到的二氢叶酸还原酶基因回收后连接到pEASYTM‑T1 Simple克隆质粒上，得到重组克隆载体，将重组克隆载体转化到感受态细胞；C.重组表达菌株的构建：将双酶切后获得的重组二氢叶酸还原酶基因连接到进行相同酶切处理的表达载体pET‑28a上，将重组表达载体pET‑28a‑dhfr转化到大肠杆菌中，筛选得到重组表达菌株；D.重组二氢叶酸还原酶的表达。上述制备方法简单，制备的重组表达菌株性状稳定，培养和表达周期短，能稳定表达高活性的重组肺炎链球菌二氢叶酸还原酶。
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