本发明涉及人源化单克隆抗人EpCAM抗体，例如单链可变片段(scFv)，其包括具有SEQ ID NO:2的氨基酸的VH和具有SEQ ID NO:4的氨基酸的VL。本发明还涉及嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端到C末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)、(ii)跨膜结构域、(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。
本发明涉及人源化CD19单链可变片段(scFv)，其包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列。本发明还涉及CD19嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端到C末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)、(ii)跨膜结构域、(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明的人源化抗CD19scFv显示出对CD19的选择性和高亲和力结合。基于本发明的人源化scFv的CD19‑CART细胞可用于治疗患有包括白血病和淋巴瘤的B细胞恶性肿瘤患者。
本发明涉及一种人源化BCMA单链可变片段(scFv)，该片段包括具有SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的VL。本发明还涉及一种BCMA嵌合抗原受体(CAR)融合蛋白，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明优选的共刺激结构域是CD28或41‑BB。本发明的人源化BCMA‑CAR‑T细胞在体外和体内均具有特异性杀伤活性，并在CAR‑T细胞中分泌细胞因子IFN‑γ。
本发明涉及一种单克隆抗人BCMA抗体，或一种单链可变片段(scFv)，该片段包含具有SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:7所示氨基酸序列的VL。本发明还涉及一种BCMA嵌合抗原受体(CAR)，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明的单克隆抗体表现出对BCMA的选择性和高亲和力结合。基于本发明所述BCMA scFv的BCMA CAR‑T细胞显著降低了动物模型中多发性骨髓瘤肿瘤的生长。
本发明涉及单克隆抗人PD‑L1抗体或单链可变片段(scFv)，其包括具有SEQ ID NO:3所示氨基酸的VH和具有SEQ ID NO:5所示氨基酸的VL。本发明还涉及嵌合抗原受体融合蛋白，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。发明人已经表明，本发明的PD‑L1CAR‑T细胞在杀伤若干癌细胞系方面比阿维鲁单抗PD‑L1CAR‑T细胞更有效。PD‑L1CAR‑T在免疫疗法中可单独使用或者与其他药物联合使用。
本发明涉及一种含人转铁蛋白抗原表位序列的嵌合体抗原受体，它是一种嵌合抗原受体融合蛋白，从N端至C端包括：(i)包含VH和VL的单链可变片段(scFv)，其中scFv具有针对肿瘤抗原的活性，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域；其中所述融合蛋白包括人转铁蛋白片段，其人转铁蛋白片段是针对人转铁蛋白的抗体的抗原表位，在N端或C端到scFv，或在VH和VL之间。优选肿瘤抗原是CD19、CD22和BCMA。当与不含TF的相同CAR比较，并对癌症靶细胞具有相同的功效时，CD19‑TF‑CAR T细胞、CD22‑TF‑CAR T细胞和BAMA‑TF CAR T细胞分泌较少的细胞因子。
