本发明涉及人源化BCMA抗体或其抗原结合片段，其包含具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VL。本发明还涉及包含从N端到C端：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域的BCMA嵌合抗原受体融合蛋白。本发明的人源化BCMA‑CAR‑T细胞对BCMA阳性肿瘤细胞具有特异性杀伤活性。
本发明涉及人源化单克隆抗人EpCAM抗体，例如单链可变片段(scFv)，其包括具有SEQ ID NO:2的氨基酸的VH和具有SEQ ID NO:4的氨基酸的VL。本发明还涉及嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端到C末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)、(ii)跨膜结构域、(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。
本发明涉及人源化CD19单链可变片段(scFv)，其包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列。本发明还涉及CD19嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端到C末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)、(ii)跨膜结构域、(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明的人源化抗CD19scFv显示出对CD19的选择性和高亲和力结合。基于本发明的人源化scFv的CD19‑CART细胞可用于治疗患有包括白血病和淋巴瘤的B细胞恶性肿瘤患者。
本发明涉及一种人源化BCMA单链可变片段(scFv)，该片段包括具有SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的VL。本发明还涉及一种BCMA嵌合抗原受体(CAR)融合蛋白，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明优选的共刺激结构域是CD28或41‑BB。本发明的人源化BCMA‑CAR‑T细胞在体外和体内均具有特异性杀伤活性，并在CAR‑T细胞中分泌细胞因子IFN‑γ。
本发明涉及一种在CDR1中具有缬氨酸到甘氨酸突变的人源化CD19单链可变片段(scFv)，其包含具有SEQ ID NO：6所示氨基酸序列的人源化VH和具有SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的人源化VL。本发明还涉及CD19嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端到C末端包含：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。对于体内和体外的CAR‑T细胞，这种人源化的CD19‑CAR‑T细胞分泌细胞因子IFN‑γ，具有特异性杀伤活性。
本发明涉及一种单克隆抗人BCMA抗体，或一种单链可变片段(scFv)，该片段包含具有SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:7所示氨基酸序列的VL。本发明还涉及一种BCMA嵌合抗原受体(CAR)，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。本发明的单克隆抗体表现出对BCMA的选择性和高亲和力结合。基于本发明所述BCMA scFv的BCMA CAR‑T细胞显著降低了动物模型中多发性骨髓瘤肿瘤的生长。
本发明涉及单克隆抗人PD‑L1抗体或单链可变片段(scFv)，其包括具有SEQ ID NO:3所示氨基酸的VH和具有SEQ ID NO:5所示氨基酸的VL。本发明还涉及嵌合抗原受体融合蛋白，其自N‑末端到C‑末端包括：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)激活结构域。发明人已经表明，本发明的PD‑L1CAR‑T细胞在杀伤若干癌细胞系方面比阿维鲁单抗PD‑L1CAR‑T细胞更有效。PD‑L1CAR‑T在免疫疗法中可单独使用或者与其他药物联合使用。
本发明涉及人抗人ROR‑1抗体或单链可变片段(scFv)，其包含具有氨基酸SEQ ID NO:3的VH和具有氨基酸SEQ ID NO:4的VL。本发明还涉及ROR‑1嵌合抗原受体(CAR)，其包含从N‑末端到C‑末端：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域，和(iv)活化结构域。本发明的单克隆抗体表现出与ROR‑1结合的选择性和高亲和性。
本发明涉及抗人CS1抗原的单克隆抗体及其单链可变片段(scFv)，包含具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的重链可变区VH和具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的轻链可变区VL。本发明还涉及一种嵌合抗原受体融合蛋白，其从N端到C端包含：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域和(iv)激活结构域。在体外和体内，这种抗CS1抗原的scFv片段可用于构建本发明的CAR‑T细胞——其可针对CS1抗原阳性靶细胞特异性分泌高水平细胞因子IFN‑γ，并对CS1抗原阳性靶细胞具有特异性杀伤作用。该抗CS1单克隆抗体、其单链可变片段(scFv)及其CAR融合蛋白以及CAR表达T细胞(CAR‑T)或NK细胞(CAR‑NK)可广泛应用于CS1抗原阳性的肿瘤免疫治疗。
本发明涉及人源化抗BCMA抗原单克隆抗体及其单链可变片段(scFv)，包含具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VL。本发明还涉及一种BCMA嵌合抗原受体融合蛋白，其从N端至C端包含：(i)本发明的单链可变片段(scFv)，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激结构域和(iv)激活结构域。在体外和体内，这种人源化的抗BCMA scFv片段可用于构建本发明的CAR‑T细胞——其可针对BCMA抗原阳性靶细胞特异性分泌高水平细胞因子IFN‑γ，并对BCMA抗原阳性靶细胞具有特异性杀伤作用。该人源化抗BCMA抗原单克隆抗体、其单链可变片段(scFv)及其CAR融合蛋白以及CAR‑T可广泛应用于BCMA抗原阳性的肿瘤免疫治疗。
