本发明属于微生物基因工程技术领域,具体涉及一种适冷的I型5‑烯醇丙酮酰莽草酸‑3‑磷酸合酶基因。所述的I型5‑烯醇丙酮莽草酸‑3‑磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所述,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所述。所述适冷的I型5‑烯醇丙酮莽草酸‑3‑磷酸合酶基因是根据Genbank中报导的同属嗜盐白蚁菌Isoptericola sp.GR1TH_0001的aroA基因保守序列克隆得到的,经过生物学试验验证,证明该酶对草甘膦具有较高的耐受性,且具有独特的低温适应性。
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因及其应用。本发明公开了具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因exiGS的序列和编码区,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码446个氨基酸。该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。生物学功能验证证明该基因具有高活性,耐低温,高温稳定性好,本发明初步验证了具有草铵膦抗性的谷氨酰胺合成酶基因的功能及其在抗草铵膦作物中的应用潜能。可广泛用于不同抗除草剂转基因植物的操作上。
本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及具有亚磷酸脱氢酶催化活性的蛋白、编码基因及其应用。本发明克隆的亚磷酸脱氢酶PtxQ蛋白基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。通过遗传转化验证表明,转亚磷酸脱氢酶PtxQ基因的转基因植物明显提高了对亚磷酸脱氢酶活性,转基因植物获得了利用亚磷酸盐的能力。本发明的基因可在调控作物对亚磷酸盐利用能力中的应用。
本发明属于基因工程领域,具体涉及一种降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白。该基因和蛋白是从能够高效降解除草剂草甘膦的抗性的基因中筛选得到,该基因被命名为草甘膦氧化酶B4S7基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。通过对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)甘氨酸氧化酶突变体B3S1的编码基因进行DNA改组,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选,最终获得草甘膦氧化酶突变体B4S7。本发明初步验证了草甘膦氧化酶B4S7基因的功能及其在草甘膦抗性作物中的应用潜能。
本发明属于农业微生物基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述,该基因编码的蛋白质的序列如SEQ ID NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是根据Genbank中报导的放线细菌Isoptericola Variabilis的aroA基因序列合成得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD002保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC NO:M2013632。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。
本发明属于基因工程领域,涉及一种高效降解除草剂草甘膦的抗性基因的分离、体外定向进化及功能鉴定,本发明还涉及草甘膦的抗性基因在植物除草剂草甘膦,B3S1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过扩增来自海洋细菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的甘氨酸氧化酶编码基因(thiO),对其进行连续两轮随机突变和一轮DNA改组试验,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选技术,获得最终草甘膦氧化酶突变体B3S1。本发明证实了该基因的功能及在降解除草剂草甘膦抗性中应用途径。