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[发明专利]内酯酶及利用内酯酶降解α-玉米赤霉烯醇的方法-CN201511015441.X有效
发明人：郭瑞庭;郑迎迎;许中霞;陈纯琪;彭卫;刘卫东;刘嚞睿;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本申请公开了一种内酯酶，其氨基酸序列系为将序列编号5第167个氨基酸由缬氨酸(Valine)突变成组氨酸(Histidine)的序列，该内酯酶用于提高对α‑玉米赤霉烯醇的降解效率。本申请还公开了一种降解α‑玉米赤霉烯醇的方法，其系利用前述内酯酶对α‑玉米赤霉烯醇进行降解，以提高对α‑玉米赤霉烯醇的降解效率。
内酯利用降解玉米赤霉烯醇方法

[发明专利]一种固态生物反应装置、使用方法及其应用-CN201510474799.2有效
发明人：姜文侠;张笑然;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-08-06 - 公布日： 2020-07-14 - 主分类号： C12M1/16 文献下载
摘要：本发明涉及一种固态生物反应装置，包括主罐体(1)，所述装置还包括支撑主罐体(1)的支架(2)，所述支架(2)使主罐体(1)在水平位置实现回转，在竖直位置实现静置培养。本发明装置相对简单，特别是物料的混合采用车载罐体与回转相结合的方式，实现了罐体在直立和水平两种不同姿态之间的自由转换；且该装置在直立姿态下进行装料、接种、培养和移种等工作，在水平姿态下完成灭菌和物料的混合等工作，不仅使用快捷，移动方便，而且省去了占用大量制造成本的搅拌系统，易于在大规模生产中使用。
一种固态生物反应装置使用方法及其应用

[发明专利]一种强化丝状真菌蛋白质生产的方法-CN201510225828.1有效
发明人：田朝光;林良才;李金根;齐西珍;李慧燕;许晶;刘倩;高染染;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-05-06 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明一种提高丝状真菌生产纤维素酶、半纤维素酶或其它蛋白的方法，属于基因工程领域。所述方法包括对丝状真菌宿主进行遗传操作以过表达或缺失特定基因。本发明还涉及所述经过遗传操作修饰的宿主。本发明还是涉及在丝状真菌宿主中改善蛋白质生产，或用于生产改善的蛋白质组合物的方法，所述蛋白为纤维素酶、半纤维素酶、其它参与木质纤维素材料降解的蛋白质和其它蛋白质。
一种强化丝状真菌蛋白质生产方法

[发明专利]一种改善丝状真菌蛋白分泌能力的方法-CN201510225762.6有效
发明人：田朝光;马国力;樊飞宇;林良才;裴雪;孙文良;刘倩;高染染;李慧燕;陈永;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-05-06 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明一种改善丝状真菌分泌纤维素酶、半纤维素酶或其它蛋白的方法，属于基因工程领域。所述方法包括对丝状真菌宿主进行遗传操作以缺失或过表达特定基因。本发明还涉及所述经过遗传操作修饰的宿主。本发明还是涉及在丝状真菌宿主中改善蛋白质生产，或用于生产改善的蛋白质组合物的方法，所述蛋白为纤维素酶、半纤维素酶、其它参与木质纤维素材料降解的蛋白质和其它蛋白质。
一种改善丝状真菌蛋白分泌能力方法

[发明专利]5-氨基乙酰丙酸合成酶突变体及其宿主细胞和应用-CN201910425976.6有效
发明人：孙际宾;陈久洲;郑平;朱成超;郭轩;周文娟;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-05-21 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明提供一种5‑氨基乙酰丙酸合成酶(ALA合成酶)，所述ALA合成酶在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第11位的氨基酸残基为Ile、Ser、Met、Cys、Val。本发明还提供了制备该酶的方法，含有该酶的表达载体、宿主细胞、该酶在ALA生产中的应用以及改造ALA合成酶以提高其活性的方法。
氨基乙酰丙酸合成突变体及其宿主细胞应用

[发明专利]活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用-CN201910359888.0有效
发明人：孙际宾;李庆刚;郑平;周文娟;张晓立;德莱奥西班乔·泰沃;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-04-30 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质，为突变体蛋白，为将磷酸转酮酶进行如下任意一种或多种突变得到的蛋白质：第2位由T突变为A；第6位由I突变为T；第14位由N突变为D；(第20位由E突变为D；第120位由T突变为A；第231位由E突变为K；第260位由H突变为Y；第342位由E突变为K；第397位由K突变为R；第676位由D突变为G；第785位由F突变为L；第801位由W突变为R。本发明还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与现有磷酸转酮酶相比，本发明提供的突变体蛋白的磷酸转酮酶酶活显著增加，进而显著提高目标代谢物的产量。
活性提高磷酸转酮酶生产代谢物中的应用

[发明专利]5-氨基乙酰丙酸生产菌株及其构建方法和应用-CN202010059928.2有效
发明人：孙际宾;陈久洲;郑平;饶德明;王钰;周文娟;郭轩;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-01-19 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种5‑氨基乙酰丙酸生产菌株及其构建方法和应用。本发明通过优化出发菌株中5‑氨基乙酰丙酸合成酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的RBS序列，使得菌株的产5‑氨基乙酰丙酸能力大幅提高，适用于大规模生产。
氨基乙酰丙酸生产菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种甾体化合物菌渣无害化的处理方法-CN201811362901.X在审
发明人：张瑞;李雪梅;冯进辉;刘祥涛;陈曦;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2020-05-26 - 主分类号： A23K10/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种甾体化合物发酵菌渣无害化的处理方法，该方法为：通过选用不同菌属不同活力对甾体化合物具有较强降解能力的菌种，将制备不同甾体化合物(4‑AD，ADD，BA，DBA，9‑OH‑AD，谷内酯，DHEA)发酵后的菌渣进行无害化处理，本方法可以将含有一种或多种甾体化合物的菌渣进行无害化处理，根据发酵不同的产品选用相应的一种或几种菌株对目的残留甾体化合物进行高效的降解，解决了甾体发酵后产生的甾体化合物残留的问题。同时解决了对于湿菌焚烧耗能较大并且对环境污染比较严重的现实问题，为今后甾体发酵残留菌渣无害化，资源化利用提供了有效的新处理途径。
一种化合物无害化处理方法

[发明专利]一组不同启动子介导的蛋白酶高通量筛选载体及筛选方法-CN201510802312.9有效
发明人：易犁;周瑜;张桂敏;彭文舫;马立新;马延和 -专利权人：湖北大学
申请日： 2015-11-19 - 公布日： 2020-05-12 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一组不同启动子介导的蛋白酶高通量筛选载体及筛选方法。本发明通过在pESD载体上插入不同转录强度的启动子GALX，构建了GALX–pESD‑GAL1/GAL10‑Aga2‑FLAG‑HA重组质粒，在相应的启动子后插入底物序列与酶突变体库，利用荧光标记技术和流式细胞仪检测细胞表面展示的蛋白，根据细胞表面荧光的强弱，从而分析底物与酶的不同比例下底物的酶切情况。这种方法在蛋白酶进化过程中，可以控制酶与底物的浓度在1:2到1:100之间，利用启动子转录的强弱来逐步提高酶活，最终获得高活性的蛋白酶突变体。
一组不同启动子蛋白酶通量筛选载体方法

[发明专利]核糖体因子和其突变体及其在制备维生素B12-CN202010012145.9有效
发明人：张大伟;董会娜;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-01-07 - 公布日： 2020-05-12 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：本发明公开3个核糖体因子基因及其突变基因以及在制备维生素B12中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达所述基因，可以有效提高维生素B12的产量，具有较大的应用推广价值，并且对于研究产维生素B12菌种的基因调控也有重要意义。
核糖体因子突变体及其制备维生素 base sub 12

[发明专利]一种重组嗜碱芽孢杆菌及其制备方法和应用以及制备D-乳酸的方法-CN201510941227.0有效
发明人：薛燕芬;马化君;葛德永;于波;马延和 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2015-12-16 - 公布日： 2020-04-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组嗜碱芽孢杆菌的制备方法，该方法包括：以生产L‑乳酸的嗜碱芽孢杆菌为出发菌株，通过遗传工程操作，使该出发菌株中不表达L‑乳酸脱氢酶且表达D‑乳酸脱氢酶。本发明还公开了由该方法制备得到的重组嗜碱芽孢杆菌及其应用，以及一种制备D‑乳酸的方法。将通过本发明提供的重组嗜碱芽孢杆菌的制备方法制备得到的重组嗜碱芽孢杆菌用于制备D‑乳酸时，得到的D‑乳酸的光学纯度高于99.8％，转化率在94％以上，产量可高达142克/升。
一种重组芽孢杆菌及其制备方法应用以及乳酸

[发明专利]尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素B12中的应用-CN202010012125.1有效
发明人：张大伟;董会娜;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-01-07 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开一种尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及在制备维生素B12中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达的尿卟啉原Ⅲ合成酶基因hemD和突变基因的基因工程菌，其生产维生素B12的能力得到了大幅提高，具有较大的应用推广价值。
卟啉合成突变体突变基因及其制备维生素 b12 中的应用

[发明专利]一种滞留效应增强的内质网滞留信号肽突变体-CN201510658688.7有效
发明人：易犁;梅萌;张桂敏;马立新;马延和 -专利权人：湖北大学
申请日： 2015-10-12 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C07K7/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种滞留效应增强的内质网滞留信号肽突变体WEHDEL，属于生物工程技术领域。本发明通过突变酵母内质网滞留信号肽FEHDEL，得到一系列滞留信号肽突变体。通过构建pESD‑Aga2‑FLAG‑ERS重组质粒(ERS,ER sequestration signal,内质网滞留信号肽)，分析Aga2‑FLAG‑ERS复合体在酵母体内的诱导和表面展示情况，并利用荧光标记技术和流式细胞仪检测细胞表面展示的蛋白。根据细胞表面荧光的强弱，进而分析内质网滞留信号肽滞留效应的强弱。经流式细胞仪的分析，发现滞留信号肽突变体WEHDEL与原始的FEHDEL相比，滞留效应明显增强了。在最近建立的酵母内质网滞留系统中，利用内质网滞留信号肽的滞留效应来延长蛋白底物在内质网中的停留时间，以显著增大底物在内质网中的浓度，使蛋白酶即使在低浓度和低活性状态下也可以产生强的水解反应信号，从而便于检测和分析。
一种滞留效应增强内质网信号肽突变体

[发明专利]一种低温碱性果胶裂解酶及其编码基因和应用-CN201710497480.0有效
发明人：张桂敏;唐雨蒙;易犁;蒋思婧;马延和 -专利权人：湖北大学
申请日： 2017-06-27 - 公布日： 2020-03-31 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明提供了一种低温碱性果胶裂解酶及其编码基因和应用，该裂解酶具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；或该裂解酶具有在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、置换、插入或添加一个至几个氨基酸的衍生序列并且具有低温碱性果胶裂解酶活性。本发明所述的低温果胶裂解酶具有反应温度低、pH耐受性好等优点，最适天然底物为来源于橙皮的果胶，同时可以广泛应用于果胶的酶解。
一种低温碱性果胶裂解及其编码基因应用

[发明专利]一种生产红景天苷的重组大肠杆菌及构建方法及应用-CN201610361309.2有效
发明人：刘涛;毕慧萍;庄以彬;殷华;孙雪;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2016-05-26 - 公布日： 2020-03-31 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产红景天苷的重组大肠杆菌及构建方法及应用，构建方法为：(1)以大肠杆菌△A为出发菌株，通过基因敲除或基因沉默的方法使大肠杆菌△A染色体上的galE，galT和ugd基因不表达，得到大肠杆菌菌株BMGU；(2)向大肠杆菌菌株BMGU中导入ARO10，UGT73B6MK，pgm，galU和T7Polymerase基因，使ARO10，UGT73B6MK，pgm，galU和T7Polymerase基因过表达，异源合成红景天苷，得到一种生产红景天苷的重组大肠杆菌。本发明通过引入高效UDP葡萄糖基转移酶突变体UGT73B6MK，并对葡萄糖代谢途径进行优化，显著提高了红景天苷的产量。
一种生产红景天重组大肠杆菌构建方法应用