本发明公开了一种用于检测JC病毒的引物、探针及试剂盒,属于生物技术领域。本发明用于检测JC病毒的试剂盒包括特异性引物对和特异性探针;所述特异性引物对的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;所述特异性探针的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的用于检测JC病毒的引物、探针及试剂盒以微滴数字PCR技术为依托,能够在短时间内实现JC病毒的快速、精准定量,为JC病毒感染相关疾病的病毒载量监测提供有力的技术支持,有着广阔的应用前景和产业化前景。
本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种基于微滴式数字PCR的BKV病毒检测试剂盒。所述BKV病毒检测用引物,由正向引物和反向引物组成,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。与引物配合使用的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明针对BKV病毒的特异性保守区域进行靶点设计,排除样本中常见病原体及基因组核酸干扰,避免假阳性,同时保守区域的靶点选择可以有效避免因BKV病毒变异和不同血清型等因素影响而导致的假阴性,提高检测的准确性和灵敏度。
本发明涉及一种环状RNA circ‑ERBB2及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测引物如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑ERBB2,并以该环状RNA circ‑ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌;本发明还设计针对环状RNA circ‑ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针,通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ‑ERBB2分子的表达情况。
本发明公开了一种人白血病FLT3基因内部串联重复突变检测的引物探针组合、试剂盒及应用。引物探针组合中,引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;探针序列如SEQ ID NO.3所示。试剂盒为微滴式数字PCR检测试剂盒,包含FLT3基因的引物探针组合和内参基因RPP30的引物探针组成的检测混合液、反应预混液、阴性质控品、空白对照。本发明的引物探针组合及试剂盒用于检测人白血病FLT3基因内部串联重复突变,具有检测过程简单高效、绝对定量、灵敏度和准确性高等优点,对于携带FLT3‑ITD突变的AML患者持续监控治疗效果、指导用药和预测疾病进展具有潜在的应用价值。
本发明涉及一种环状RNA circ‑GPC3及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑GPC3对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑GPC3由GPC3母基因的第3个独立外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测引物如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑GPC3,并以该环状RNA circ‑GPC3作为分子标志物诊断肝癌。本发明还设计针对环状RNA circ‑GPC3分子的荧光定量检测引物及taqman探针,该探针和引物能很好的检测生物体内的circ‑GPC3表达情况,可以为肝癌的诊断提供一种基于环状RNA检测的方案。
本发明涉及一种生物技术领,尤指一种基于数字PCR平台的miRNA‑106b检测试剂盒,所述的试剂盒主要包括PCR反应液、检测引物、反转录缓冲液、反转录引物和阳性对照品;所述的反转录引物为:以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为反转录引物Pri‑RT;所述的检测引物为:以SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列为上游引物Pri‑F1;以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为下游引物Pri‑R1;本发明的试剂盒中应用的反转录缓冲液和PCR缓冲液提高反转录体系RNA的上样量及PCR反应体系的上样量,有利于提高试剂盒检测的稳定性,减少加样时出现的误差;采用数字PCR技术进行检测具有更高的灵敏度和特异性、准确性,本发明配制的反应液或试剂盒可提高了检测灵敏度、准确率,对于临床上预后观察及微量病变样本的检测提供有效方法。
本申请公开一种基于微滴式数字PCR的EB病毒检测试剂盒,所述试剂盒包括:微滴式数字PCR用反应预混液;目的片段检测混合液,包括目的片段的扩增引物和探针,目的片段的扩增引物的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,目的片段的探针的序列如SEQ ID No.3所示;内标及内标检测混合液,包括作为内标的外源重组质粒,以及所述内标的扩增引物和探针,内标的扩增引物的序列如SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示,内标的探针的序列如SEQ ID No.6所示;阳性对照预混液;阴性对照预混液;本申请优化利用数字PCR技术针对EB病毒进行绝对定量检测的成品试剂盒,为EB病毒相关疾病诊断提供准确的诊断依据。