本发明涉及一种环状RNA circ‑ERBB2及其检测试剂与应用，属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ‑ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生；本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测引物如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测探针如SEQ ID NO:4所示，所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑ERBB2，并以该环状RNA circ‑ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌；本发明还设计针对环状RNA circ‑ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针，通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ‑ERBB2分子的表达情况。
本发明涉及一种环状RNA circ‑GPC3及其检测试剂与应用，属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑GPC3对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ‑GPC3由GPC3母基因的第3个独立外显子反向拼接环化产生；本发明环状RNA circ‑GPC3的检测引物如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；本发明环状RNA circ‑GPC3的检测探针如SEQ ID NO:4所示，所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑GPC3，并以该环状RNA circ‑GPC3作为分子标志物诊断肝癌。本发明还设计针对环状RNA circ‑GPC3分子的荧光定量检测引物及taqman探针，该探针和引物能很好的检测生物体内的circ‑GPC3表达情况，可以为肝癌的诊断提供一种基于环状RNA检测的方案。
本发明为淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、Taq酶、上游引物、下游引物、SYBR Green I染料，鱼类淡水鱼类肌球蛋白调节轻链基因表达量的快速检测方法包括鱼的总RNA提取、鱼类肌球蛋白基因的实时荧光PCR扩增和结果判定。本发明的优点是需要量少、快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。
本发明为淡水鱼类肌球蛋白重链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法。试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、氯化镁、dNTP、Taq酶、重链基因和内参基因特异性上、下游引物各一对、SYBR Green I染料，鱼类淡水鱼类肌球蛋白重链mRNA表达量的快速检测方法包括鱼的总RNA提取、鱼类淡水鱼类肌球蛋白重链mRNA的实时荧光PCR扩增和结果判定。本发明的优点是需要量少、快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。
