[发明专利]猪圆环病毒抗原组合物及其制备方法、应用和疫苗

说明书

本发明提供了一种猪圆环病毒抗原组合物及其制备方法、应用和疫苗，涉及生物技术领域。本发明提供的猪圆环病毒抗原，包括猪圆环病毒2a型抗原、猪圆环病毒2b型抗原、猪圆环病毒2d型抗原。该抗原的表达量高、免疫原性好，能够有效诱导机体产生相应抗体，适于制备用于预防猪圆环病毒2a亚型、2b亚型和2d亚型的产品。本发明提供的上述抗原的制备方法，以293T细胞作为表达体系，降低了杂蛋白的产量，提高了目的蛋白的表达量，该制备方法稳定、高效且质量可控。本发明提供的猪圆环病毒三价疫苗，安全性好，能够有效的激发机体的免疫反应，同时实现对猪圆环病毒三种亚型的预防，扩大了疫病防控范围，节省了劳力，提高了工作效率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种猪圆环病毒抗原组合物及其制备方法、应用和疫苗。

背景技术

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)属圆环病毒科圆环病毒属，为致病性病毒，在世界范围内流行，PCV2对猪具有较强的易感性。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪免疫缺陷综合征(PIDS)、猪皮炎与肾病综合征(PNDS)等多种疾病的主要病原，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪，引起广泛分布于全身器官、组织的病理损伤。造成猪只生长发育迟缓/受阻、精神沉郁、贫血、呼吸困难/咳嗽、淋巴结肿大、皮肤苍白/病变等。PCV2严重侵害猪的免疫系统，导致患猪形成免疫抑制而造成免疫缺陷，使机体更易感染PRRSV、PRV、PPV、MHP、PEDV、SIV、多杀性巴氏杆菌等其他病原，使患猪呈二重感染或三重混合感染，病猪的病死率也大大提高，造成十分严重的危害。

基于PCV2基因序列的不同，又将PCV2分为PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d，PCV2e五个基因亚型。经过流行病学调查发现，我国主要以PCV2a、PCV2b、PCV2d，3个亚型占优势，已经成为我国的主要流行株。为有效控制该病而减少经济损失，所以研制针对PCV2主要流行株的三价疫苗，对该病的防治具有重要意义。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供猪圆环病毒抗原组合物，该抗原免疫原性高。

本发明的第二目的在于提供上述猪圆环病毒抗原组合物的制备方法。

本发明的第三目的在于提供上述猪圆环病毒抗原组合物在制备预防猪圆环病毒的产品中的应用。

本发明的第四目的在于提供一种猪圆环病毒三价疫苗，以解决上述问题中的至少一种。

第一方面，本发明提供了猪圆环病毒抗原组合物，包括猪圆环病毒2a型抗原、猪圆环病毒2b型抗原和猪圆环病毒2d型抗原；

所述猪圆环病毒2a型抗原由PCV2a-xht基因片段表达，所述PCV2a-xht基因片段的核酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述猪圆环病毒2b型抗原由PCV2b基因片段表达，所述PCV2b基因片段的核酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述猪圆环病毒2d型抗原由PCV2d基因片段表达，所述PCV2d基因片段的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。

作为进一步技术方案，所述猪圆环病毒抗原组合物中猪圆环病毒2a型抗原、猪圆环病毒2b型抗原和猪圆环病毒2d型抗原的质量比为1～3:1～3:1～3；

优选地，所述猪圆环病毒抗原组合物中猪圆环病毒2a型抗原、猪圆环病毒2b型抗原和猪圆环病毒2d型抗原的质量比为1:1:1。

第二方面，本发明提供了一种猪圆环病毒抗原组合物的制备方法，包括在293T细胞中表达编码所述猪圆环病毒抗原组合物的基因，获得猪圆环病毒抗原组合物。