[发明专利]检测人副流感病毒的组合物、试剂盒、方法及其用途

权利要求书

1.一种检测副流感病毒并分型的组合物，其特征在于，所述组合物包括：

如SEQ ID NO:1所示的人副流感病毒2型上游引物、如SEQ ID NO:2所示的人副流感病毒2型下游引物，和如SEQ ID NO:3所示的人副流感病毒2型探针；

如SEQ ID NO:4所示的人副流感病毒4a型上游引物、如SEQ ID NO:5所示的人副流感病毒4a型下游引物，和如SEQ ID NO:6所示的人副流感病毒4a型探针；以及

如SEQ ID NO:7所示的人副流感病毒4b型上游引物、如SEQ ID NO:8所示的人副流感病毒4b型下游引物，和如SEQ ID NO:9所示的人副流感病毒4b型探针。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括如SEQ ID NO:10所示的内标上游引物、如SEQ ID NO:11所示的内标下游引物，和如SEQ ID NO:12所示的内标探针。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述组合物各探针的荧光基团彼此互不相同且互不干扰。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，人副流感病毒2型探针的荧光基团是HEX；人副流感病毒4a型探针的荧光基团是FAM；人副流感病毒4b型探针的荧光基团是CY5；人管家基因探针的荧光基团是ROX。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物以混合的形式存在。

6.权利要求1～5中任一项所述的组合物在制备检测副流感病毒并分型的试剂盒中的用途。

7.一种检测副流感病毒并分型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1～5中任一项所述的组合物。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸释放试剂、核酸提取试剂、dNTPs、逆转录酶、尿嘧啶糖基化酶、DNA聚合酶、PCR缓冲液以及Mg²⁺中的至少一种。

9.一种用于以非诊断目的检测副流感病毒并分型的方法，所述方法包括以下步骤：

1)提取或释放待测样本的核酸；

2)使用如权利要求1～5中任一项所述的组合物或如权利要求7～8中任一项所述的试剂盒对步骤1)获得的核酸进行荧光定量PCR分析；

3)获得并分析结果。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR的反应条件为：

逆转录，温度为50℃～60℃，时间5～15分钟，1次循环；Taq酶活化，温度为95℃，时间1～10分钟，1次循环；变性，温度为95℃，时间为5～20秒，退火延伸及检测，温度为55℃～60℃，时间为20～60秒，40～50次循环。