[发明专利]一种由海参内脏提取ACE抑制肽的方法及应用在审
申请号: | 202210532521.6 | 申请日: | 2022-05-17 |
公开(公告)号: | CN114657229A | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 焦绪栋;杨林彤;黄栋;姜雨辰;姜乃义;秦松 | 申请(专利权)人: | 中国科学院烟台海岸带研究所;山东源力德海洋生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;A23L33/18 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 李颖 |
地址: | 264003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海参 内脏 提取 ace 抑制 方法 应用 | ||
1.一种由海参内脏提取ACE抑制肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将-20--10℃冷冻储存的海参内脏置于20-30℃解冻3-5h,而后加入其5-10倍体积的处理液中浸泡20-40min,匀浆;
(2)在步骤(1)得到的匀浆液中添加其质量1-3%的酶,调节温度至30-55℃,pH为4-11,酶解1-5h,80-100℃灭酶10-20min;酶解后冷却至15-25℃,6000—10000 r/min离心10-30min,过滤收集上清液;
(3)将步骤(2)所得的上清液装入截留分子量500-10000Da的透析袋中,置于4-10℃的透析液中透析10-20h,得到粗溶液;
(4)将步骤(3)所得的ACE抑制肽粗溶液,通过葡聚糖凝胶柱层析进行精细纯化,用含有0 .01-0.05mol/L的Zn离子的PBS洗脱,测定228nm吸光度的洗脱液,将收集的洗脱液冷冻干燥,得ACE抑制肽。
2.按权利要求1所述的由海参内脏提取ACE抑制肽的方法,其特征在于:步骤(1)所述的处理液为:每100mL处理液中含氯化钠0.9g、土霉素0.05-0.01g、红霉素0.05-0.01g、EDTA·2Na 0.05-0.5g、余量为无菌水。
3.按权利要求1所述的由海参内脏提取ACE抑制肽的方法,其特征在于:步骤(2)中所述酶为单环刺螠自溶酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、酸性蛋白酶中的一种或多种。
4.按权利要求1所述的由海参内脏提取ACE抑制肽的方法,其特征在于:步骤(3)所述的透析液为0.9%的生理盐水、pH7.0的磷酸盐缓冲液、无菌水中的一种或几种。
5.按权利要求1或4所述的由海参内脏提取ACE抑制肽的方法,其特征在于:所述上清液装入截留分子量1000-3000Da的透析袋透析,得粗溶液。
6.一种权利要求1所述方法获得的海参内脏ACE抑制肽,其特征在于:按权利要求1方法获得分子量为1000-3000Da的海参内脏ACE抑制肽。
7.一种权利要求6所述海参内脏ACE抑制肽的应用,其特征在于:所述海参内脏ACE抑制肽在制备作为调理高血压症的食品中的应用。
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