[发明专利]高含谷胱甘肽和S-腺苷-L-蛋氨酸酸奶的生产方法

说明书

本发明公开了二种高含谷胱甘肽和S‑腺苷‑L‑蛋氨酸酸奶的生产方法。一种是在酸奶制造过程中添加谷胱甘肽制备含谷胱甘肽和S‑腺苷‑L‑蛋氨酸酸奶的生产方法。另外一种是通过在乳酸乳球菌中克隆双功能谷胱甘肽合成酶内源性生物合成谷胱甘肽，从而制备高含谷胱甘肽和S‑腺苷‑L‑蛋氨酸酸奶的新方法。本发明实现了以酸奶形式进行二种肝保护性因子（谷胱甘肽和S‑腺苷‑L‑蛋氨酸）新途径供应，具有工业化生产潜力，将会产生重大的经济和社会效益。

技术领域与纯化的方法

本发明涉及二种高含谷胱甘肽和S-腺苷-L-蛋氨酸酸奶的生产方法，属于生物工程领域。更具体地说，涉及在酸奶制备过程中通过添加外源性营养保健分子以及通过改造乳酸乳球菌的方法制备高含高含谷胱甘肽和S-腺苷-L-蛋氨酸酸奶的方法。

背景技术

谷胱甘肽（glutathione，GSH）又名γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸-甘氨酸，是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸缩合形成的三肽化合物。GSH的存在形式主要有两种，即还原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）和氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）。其中，在机体内起主要作用的是还原型谷胱甘肽。GSH在人体的心脏、肝脏、肾、红细胞和眼睛晶状体中含量比较丰富。谷胱甘肽分子上的游离巯基是其活性基团，具有很强的供质子氢/给电子的能力。在生物体内，谷胱甘肽有着许多重要的生理功能：如（1） 抗氧化作用。GSH是细胞内含量最多的抗氧化剂，能够清除氧自由基和超氧自由基，保护由活性氧介导的DNA、蛋白质和其它生物大分子等的氧化损伤；（2）解毒的功能。GSH可以与外源物质，如重金属离子、有毒化合物等结合，通过谷胱甘肽-S-转移酶(GST)进行转移，促使其排出细胞外，达到解毒功效；（3）参与氨基酸的转运与代谢。在谷氨酰转肽酶(GT)的作用下GSH的γ-谷氨酰基与胞外游离氨基酸形成谷氨酰-氨基酸，实现氨基酸的跨膜转运，同时GSH可通过胞内的谷氨酰循环参与相关氨基酸的代谢；（4）参与细胞信号转导。能够维持细胞内乙酰胆碱和胆碱酯酶的平衡，防止因代谢异常引起的细胞病变，如纤维化；（5）抗HIV的免疫增强剂。能够活化增生T淋巴细胞，抵抗抗病毒侵袭，增强机体免疫力。

酸奶作为常见的奶制品，由于含有乳酸菌，对人体具有多种好处。研究表明乳酸菌能抑制有害菌的滋生，降低胆固醇；加有双歧杆菌或嗜酸乳杆菌的酸奶可以抬疗小儿腹泻，保持肠道内微生物的正常运作等优势。从营养学和生理学两方面考虑，酸奶与未发酵的牛奶相比，其优点在于经发酵后乳蛋白和乳脂肪部分被分解，容易被消化吸收；乳糖成分降低，适合乳糖不耐症及胃酸量低的患者食用，具有保健作用，如预防疾病、延缓衰老等。所以，大力发展酸奶，对全民健康是有益的。

本发明创新性的将谷胱甘肽合成途径植入乳酸乳球菌中，使得利用乳酸乳球菌进行酸奶发酵时，可以合成对人体有益的谷胱甘肽，增强酸奶的保健功能。

发明内容

针对现有酸奶通常不含有或存在的特定保健因子含量低的缺点，采用了二种方法来生产高含谷胱甘肽和S-腺苷-L-蛋氨酸酸奶。

第一种生产方法的发明内容如下：在普通酸奶生产过程中，通过添加外源谷胱甘肽的方法，通过调整生产工艺，最终酸奶产品中含有高含量的谷胱甘肽，达到3-20mg/L, 并且同时添加蛋氨酸，利用酸奶中保加利亚乳杆菌（丹尼斯克L340）和嗜热链球菌中的SAM合成酶系，高效转化合成SAM, 从而最终酸奶产品中也含有较高含量的SAM, 范围在1-20mg/L。另外也可采用乳酸乳球菌（如NZ9000）作为上述发酵过程中的菌种，也能达到类似的效果。

第二种生产方法的发明内容如下：