[发明专利]螺环结构的5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗原、抗体及制备与应用

权利要求书

1.一种5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原，其特征在于，具有式I所示结构：

其中，R为亚甲基(-CH₂-)和羰基(-CO-)。

2.权利要求1所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原在制备5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原或抗体方面的应用。

3.一种5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原，其特征在于，结构如式IIa或式IIb所示：

4.根据权利要求3所述的人工抗原，其特征在于，结构式中的载体为牛血清蛋白、α-淀粉酶、藻蓝素、伴刀豆球蛋白A或卵清蛋白。

5.权利要求3或4所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原在制备抗5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗体方面的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体、单克隆抗体或者基因工程抗体。

7.一种抗5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗体，其特征在于，是以权利要求3或4所述人工抗原为免疫原和包被原制备得到。

8.权利要求7所述抗体在免疫法检测5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮中的应用。

9.权利要求1所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原的制备方法，其特征在于，当R为亚甲基(-CH₂-)时，半抗原的制备方法为：以乙腈为溶剂，beta-四氢萘酮、三甲基硅氰和氟化铯混合反应16h，获得中间体2；中间体2与氢化铝锂反应制备中间体3，再与二(对硝基苯)碳酸酯反应12h，得到中间体4；最后，在氢化钠条件下，二苯基膦酰羟胺和中间体4发生反应得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原Ia，其反应式为：

当R为羰基(-CO-)时，半抗原的制备方法为：以乙腈为溶剂，四氢萘酮、三甲基硅氰和氟化铯混合反应16h，获得中间体2；将中间体2溶于适量乙腈中，逐滴加入盐酸溶液，反应1h可得中间体3；将中间体3与碳酸铵反应得中间体4；最后，在碳酸钾条件下，二苯基膦酰羟胺和中间体4发生反应得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原Ib，其反应式为：

10.权利要求3或4所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原的制备方法，其特征在于，采用戊二醛法将权利要求1所述半抗原与大分子载体偶联制备得到；具体包括如下步骤：将权利要求1所示半抗原溶于PBS缓冲溶液，与含有10mg/mL载体的PBS缓冲溶液混合，搅拌过程中逐滴加入适量的2.5％的戊二醛水溶液，室温避光反应3h，4℃用PBS透析2天，每天更换透析液3次，得到5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原，分装，并低温保存备用；所述的5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原与载体蛋白的摩尔比为40～100：1。