[发明专利]一种黄牛PPARβ基因单核苷酸多态性的检测方法及分子育种方法有效
申请号: | 201610007765.7 | 申请日: | 2016-01-07 |
公开(公告)号: | CN105543362B | 公开(公告)日: | 2020-04-03 |
发明(设计)人: | 马云;张琼琼;李芬;郝瑞杰;李俊雅;付玮玮;刘锦妮;马福军;石奎林;李何 | 申请(专利权)人: | 信阳师范学院 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6888 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 464000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄牛 ppar 基因 核苷酸 多态性 检测 方法 分子 育种 | ||
1.一种黄牛PPARβ基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,以包含PPARβ基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛PPARβ基因;然后用限制性内切酶PvuⅡ消化PCR扩增产物,接着对酶切后的片段进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;最后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛PPARβ基因第71616位的单核苷酸多态性;其中,所述引物对P为:
上游引物P1:5'-TCCTTCCAGCAGCTACACAG
下游引物P2:5'-GGGAGACAACTCGCCCAAGA-3'20bp;
所述PCR扩增反应程序为95℃预变性10min;94℃变性30~50s,63℃退火30s,72℃延伸30~50s,30~40个循环;72℃延伸10min;4℃保存;
所述聚丙烯酰胺凝胶电泳选用质量浓度为12%的聚丙烯酰胺凝胶;
所述根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛PPARβ基因第71616位的单核苷酸多态性为:AG基因型表现为167bp、147bp、28bp和20bp四条带;GG基因型表现为147bp、28bp和20bp三条带;无AA基因型。
2.一种基于黄牛PPARβ基因单核苷酸多态性的分子育种方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)根据权利要求1所述的黄牛PPARβ基因单核苷酸多态性的检测方法,确定黄牛PPARβ基因第71616位单核苷酸多态性的基因型;
(2)通过黄牛PPARβ基因第71616位单核苷酸多态性的基因型与黄牛生长性状进行关联分析,确定黄牛PPARβ基因第71616位的单核苷酸多态性能够作为提高黄牛早期生长性状的分子标记,用于黄牛的分子育种;
(3)黄牛PPARβ基因第71616位的单核苷酸多态性中GG基因型可作为提高黄牛早期生长性状的候选分子遗传标记。
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