本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于5型腺病毒序列的重组质粒及应用。本发明的重组质粒,在常用的pHelper(11K)质粒的基础上,进行了序列优化,以Adv5代替Adv2,在HEK293细胞中通过与pRC与pAAV‑GOI(gene of interest,携带目标基因序列的重组质粒)质粒共同转染,相较于常用的pHelper质粒,将病毒的包装量提高了5倍以上。该质粒不仅可以应用于科学研究,也可以应用于规模化腺相关病毒制备,提高了腺相关病毒的生产效率。
本发明公开基于反向遗传学构建的RSV反基因组质粒,所述RSV反基因组质粒为如序列表SEQ ID No.1所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cp、如序列表SEQ ID No.2所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cpts或如序列表SEQ ID No.3所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cptsΔSH。本发明构建的重组质粒经拯救获得的重组RSV病毒具有明显的减毒效果,可用于制备RSV减毒活疫苗。