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[发明专利]一种大批量提取质粒DNA的试剂盒及其方法-CN201410262140.6在审
发明人：荣洪魁;鹿锋信 -专利权人：西伯乐斯（武汉）生物科技有限公司
申请日： 2014-06-13 - 公布日： 2014-08-20 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种大批量提取质粒DNA的试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括悬浮剂、裂解液、蛋白析出中和液、质粒DNA沉淀剂、洗涤剂以及质粒DNA溶解剂。采用本发明的方法提取质粒DNA操作时间短，所用试剂组成简单、来源广泛且价格低；获得的质粒DNA产量高、纯度好、无蛋白和RNA的污染，提取的质粒DNA可以直接用于酶切、连接、测序、原核转化和真核转染等实验
一种大批量提取质粒 dna 试剂盒及其方法

[发明专利]一种含有lpxM基因的重组质粒及其制备方法和重组大肠杆菌-CN202010501799.8在审
发明人：郭美锦;张宁;洪琦;韦炎龙 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2020-06-04 - 公布日： 2020-08-21 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种含有lpxM基因的重组质粒pCC1L及其制备方法，所述所述重组质粒pCC1L为在质粒pCC1FOS的基础上连接有lpxM基因。本发明还公开了一种重组大肠杆菌，转化所述重组质粒pCC1L得到的重组大肠杆菌。本发明的重组质粒上连接有lpxM基因，重组质粒可转化至大肠杆菌中，促进大肠杆菌的生长；本发明中的重组大肠杆菌，能够实现大肠杆菌的高生长和番茄红素的高生产。
一种含有 lpxm 基因重组质粒及其制备方法大肠杆菌

[发明专利]黄酮类化合物在制备抑制耐药质粒接合转移的药物中的应用-CN202310459571.0在审
发明人：刘源;王志强;杨冰清;贾瑜倩;史静茹 -专利权人：扬州大学
申请日： 2023-04-24 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： A61K31/352 文献下载
摘要：本发明公开了植物源的天然黄酮类化合物在制备抑制耐药质粒接合转移的药物中的应用，耐药质粒接合转移试验表明多种黄酮类化合物能显著抑制多药耐药RP4‑7质粒及多种携带不同耐药基因的临床质粒的接合转移，且对mcr‑1阳性质粒的抑制能力更为显著。本发明提供的天然黄酮类化合物能够同时在体外和体内抑制耐药质粒的接合转移，为阻断耐药性的传播扩散提供了新思路。
酮类化合物制备抑制耐药质粒接合转移药物中的应用

[发明专利]一种高产羟基酪醇的大肠杆菌构建方法及应用-CN202010582557.6有效
发明人：袁吉锋;赖煜萌;曾白云 -专利权人：厦门大学
申请日： 2020-06-23 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种高产羟基酪醇的大肠杆菌构建方法及应用，该方法包括：PCR扩增获取HpaBC、LAAD、ARO10和PAR四种基因；构建质粒pACYC‑HpaBC、质粒pET‑LAAD‑ARO10和质粒pRSF‑PAR；将质粒pACYC‑HpaBC、质粒pET‑LAAD‑ARO10和质粒pRSF‑PAR共同转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，得到重组大肠杆菌。
一种高产羟基大肠杆菌构建方法应用

[发明专利]一种用于提高质粒发酵产量的方法-CN202011533508.X有效
发明人：齐菲菲;鲁薪安;何霆;赵亮;王洲 -专利权人：北京艺妙神州医药科技有限公司;北京艺妙医疗科技有限公司
申请日： 2020-12-22 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于提高质粒发酵产量的方法，所述方法包括：在以初级发酵培养基发酵一定时间后，通过补料培养基A以限制的比生长速率进行指数补料发酵，以提高大肠杆菌质粒的产量。本发明的用于提高质粒发酵产量的方法通过优化补料培养基及补料方法，更快、更便捷地获得高质量、高产量的质粒DNA，实现大肠杆菌高密度培养，提高质粒产量，同时可保持质粒的完整性。
一种用于提高质粒发酵产量方法

[发明专利]重组仙台病毒的构建方法及其应用-CN202010313056.8有效
发明人：张曦;萧哲 -专利权人：梅尔顿（深圳）生物医药技术有限公司
申请日： 2020-04-20 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供一种重组仙台病毒的构建方法，包括：构建质粒pCAGGS‑NP/P/L；以仙台病毒逆转录样品为模板扩增SeV‑01/02 DNA；扩增线性化pUC57‑insert质粒收集pUC‑insert DNA；将SeV‑01/02 DNA片段和pUC‑insert DNA融合，获得Sev‑full质粒，酶切得到Sev‑full‑Not1；合成pUC57‑A质粒，酶切收集A‑Not1，与Sev‑full‑Not1连接得到Sev‑A质粒；提供293T细胞，加入pCAGGS‑NP/P/L、Sev‑A和T7‑opt三种质粒，转染得到重组仙台病毒。
重组仙台病毒构建方法及其应用

[发明专利]无抗生素的质粒-CN201080029049.X有效
发明人： J-C·奥当奈特;E·尤里维特 -专利权人：梅里亚有限公司
申请日： 2010-05-24 - 公布日： 2016-11-30 - 主分类号： C12N15/73 文献下载
摘要：本发明提供了不使用抗生素选择压力而保持革兰氏阴性细菌质粒的方法。进一步，本发明涉及了所产生的无药物质粒，包括含异源基因的无药物质粒。本发明还提供了包含含有异源基因的无药物质粒的制剂和/或组合物，包含用该无药物质粒表达的蛋白质或免疫原的制剂和/或组合物，以及将所述制剂和/或组合物施用于宿主的方法。本发明涉及含所述无药物质粒的革兰氏阴性细菌。
抗生素质粒

[发明专利]一种结合多种内标对样本中真菌进行绝对定量的方法-CN202010906153.8在审
发明人：杜海;徐岩 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-09-01 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了可用于对样本中真菌进行绝对定量的混合内标质粒，将此混合内标质粒以1×107copies/g的浓度添加至待测样本中作为内标质粒后，可以待测样本中内标质粒并且，由于此混合内标质粒含有的内标质粒Ⅰ～Ⅴ分别含有不同长度和不同GC含量的内标DNA片段Ⅰ～Ⅴ，并且，将此混合内标质粒添加至待测样本中后，对待测样本的真菌菌群结构几乎没有影响，因此，使用此混合内标质粒对样本中真菌进行绝对定量的准确性较高
一种结合多种样本真菌进行绝对定量方法

[发明专利]一种自杀他杀式质粒、利用其的酿酒酵母无痕基因编辑方法及应用-CN202010456216.4在审
发明人：朱佑民;陶小倩;程倩;王梓旭;邢妍婧;赵一凡;柳伟强;杨平 -专利权人：苏州泓迅生物科技股份有限公司
申请日： 2020-05-26 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供一种自杀他杀式质粒、利用其的酿酒酵母无痕基因编辑方法及应用。所述自杀他杀式质粒包括复制起点、筛选标记、Cas9蛋白表达框和sgRNA1表达框；所述sgRNA1表达框包含启动子、针对基因编辑载体和所述自杀他杀式质粒的共同序列设计的sgRNA1、scaffold和终止序列将基因编辑载体转入酿酒酵母中，再转入所述自杀他杀式质粒，即可得到无痕编辑后的酿酒酵母菌株。利用所述自杀他杀式质粒编辑酿酒酵母，既不影响基因编辑后对成功转化基因编辑质粒的菌株进行选择，又显著提高了消除质粒成功率；同时，经过两轮质粒转化即可达到无痕编辑的效果，进一步加快了酿酒酵母无痕编辑的速率。
一种自杀他杀质粒利用酿酒酵母基因编辑方法应用

[发明专利]检测厌氧氨氧化菌的方法-CN201911165998.X在审
发明人：卢紫欣;陈刚新;王国安;吴从从;李魁晓 -专利权人：北京城市排水集团有限责任公司
申请日： 2019-11-25 - 公布日： 2020-03-27 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：该方法包括以下步骤：ⅰ)构建含有厌氧氨氧化菌的DNA片段的质粒；ⅱ)将质粒导入感受态细胞中，并且对感受态细胞进行扩繁，提取扩繁后的感受态细胞中的质粒，对该质粒进行梯度稀释，获得不同浓度的质粒；ⅲ)从污染物中提取厌氧氨氧化菌，提取该厌氧氨氧化菌的DNA；ⅳ)同时对不同浓度的质粒和步骤ⅲ)获得的DNA进行荧光定量PCR，获得各自对应的荧光强度；ⅴ)根据不同浓度的质粒以及每个浓度的质粒对应的荧光强度，绘制标准曲线；ⅵ)根据标准曲线和步骤
检测厌氧氨氧化方法

[发明专利]一种大规模提取用于转染哺乳动物细胞的无内毒素质粒的方法-CN201910860233.1在审
发明人：肖水冰;秦伏波;鲁亮;万定一 -专利权人：普健生物（武汉）科技有限公司
申请日： 2019-09-11 - 公布日： 2021-03-12 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种大规模提取用于转染哺乳动物细胞的无内毒素质粒的方法，包括常规碱裂解法获得质粒粗提取液，然后将上清液加入层析柱中并依次加入Tris‑HCl和500～1000mmol/L NaCl混合液，Tris‑HCl和1200mmol/L NaCl混合液得到无内毒素的质粒洗脱液，再用异丙醇沉淀质粒并用TE缓冲液溶解得到目的质粒。本发明的有益效果是：(1)利用质粒和内毒素的带电荷量不同，用不同浓度的NaCl进行洗脱以除去内毒素，效果优异，避免内毒素去除试剂残留对转染细胞的影响；(2)使用常规试剂和仪器进行质粒提取，提取过程安全快速、节约成本、生产效率高，可大规模制备；(3)提取得到的质粒纯度高、超螺旋。
一种大规模提取用于转染哺乳动物细胞内毒素质粒方法

[发明专利]一种批量构建和筛选重组质粒的方法-CN202111055318.6在审
发明人：陈爽;黄铭伟;刘阳;李阳 -专利权人：安吉康尔（深圳）科技有限公司
申请日： 2021-09-09 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： G16B30/10 文献下载
摘要：本申请公开了一种批量构建和筛选重组质粒的方法。本申请批量构建和筛选重组质粒的方法包括，将含有若干个目的片段的DNA溶液与质粒载体连接，进行转化；对转化后的宿主菌进行培养，挑取不少于目的片段数量的单克隆菌落；对单克隆菌落进行PCR扩增和测序；将测序结果导入Excel表格中，利用Excel表格中的函数对测序结果进行批量比对，批量获得重组质粒及其插入目的片段的信息。本申请方法，只需进行一次质粒连接和转化试验，即可一次性完成多个重组质粒的构建；挑取单克隆菌落PCR扩增和测序后，利用Excel表格中的函数对测序结果进行批量比对，即可批量获得重组质粒及其插入的目的片段的信息，实现批量构建和筛选重组质粒。
一种批量构建筛选重组质粒方法

[发明专利]碳质粒体的热处理装置及其方法-CN202080087961.4在审
发明人：戸田晋次郎;铃木启永;蒲雄一;后藤信元 -专利权人：日本电极株式会社
申请日： 2020-11-06 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C01B32/05 文献下载
摘要：本发明提供一种碳质粒体的热处理装置及其方法，可不产生碳质粒体的填充度的变化或流动性的混乱、由这些引起的炉内堵塞，而均匀地以高温长期间地持续进行碳质粒体的热处理，实现了生产性及作业性的提高。所述热处理装置包括：投入部10，设于炉体21的上方，向炉体21投入碳质粒体A。投入部10包括：分配料斗12，分配碳质粒体A；多个进料器13，设于分配料斗12的下方，具备从经分配的碳质粒体A分别除去微粉末的功能；以及多个原料仓14，设于各进料器13的下方，使除去了微粉末的碳质粒体A在内部下降，向炉体21投入所述碳质粒体A。
质粒热处理装置及其方法

[发明专利]耐阿米卡星的重组质粒pET28a(+)-rmtB及其应用-CN202210618462.4在审
发明人：王成成 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2022-06-01 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于细菌质粒技术领域，公开了一种耐阿米卡星的重组质粒pET28a(+)‑rmtB及其应用，耐阿米卡星的重组质粒pET28a(+)‑rmtB包括载体片段pET28a(+)和基因片段rmtB，耐阿米卡星的重组质粒pET28a(+)‑rmtB的核苷酸序列为SEQ ID NO：1；载体片段pET28a(+)来自质粒pET28a(+)，基因片段rmtB来自一株阿米卡星耐药的大肠杆菌菌株；载体片段pET28a(+)的核苷酸序列为本发明利用重组质粒pET28a(+)‑rmtB，为阿米卡星敏感的受体菌提供一种质粒选择。本发明的质粒可以耐阿米卡星，利于对卡那霉素和氨苄西林耐药、阿米卡星敏感的受体菌株的分子克隆筛选。
耐阿米卡星重组质粒 pet28a rmtb 及其应用

[发明专利]一种用于制造增亮膜的薄膜-CN201410603348.X有效
发明人：刘玉磊;李恒;朱用国;王辉;崔书海;孙月;倪程程 -专利权人：合肥乐凯科技产业有限公司
申请日： 2014-11-02 - 公布日： 2015-02-25 - 主分类号： G02B5/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于制造增亮膜的薄膜，包括透明基材和涂覆在基材两个表面上的接着层，在其中一个接着层上设有防粘层，所述防粘层中随机分布着粒径为1～10µm的硬质粒子和粒径为1.5～20µm的软质粒子，硬质粒子和软质粒子的重量比例为本发明通过硬质粒子和软质粒子的组合使用、粒径大小的控制，解决单独使用硬质粒子或软质粒子时存在的问题，可以在制造增亮膜时保护增亮层不被刮伤，并且在检验增亮膜时不留下指纹；可以显著提高增亮膜生产时的成品率，
一种用于制造增亮膜薄膜