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[发明专利]基于重组质粒DNA分子的数据信息存储方法-CN202210668480.3有效
发明人：戴俊彪;黄小罗 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2022-06-14 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： G11C13/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于重组质粒DNA分子的数据信息存储方法，具体公开了一种由含有通用信息存储DNA重组质粒组成的重组质粒库，该质粒库中的质粒利用碱基接头之间的核心信息序列记载用于记录信息的碱基序列。该重组质粒库能够重复应用于不同数据信息在DNA分子介质中的存储，可以做到一次制备多次调用，降低了化学合成的比例，实现了更加经济、快速、绿色的DNA数据存储。
基于重组质粒 dna 分子数据信息存储方法

[发明专利]一种高产质粒、其构建方法及其应用-CN202210850270.6有效
发明人：李华鹏;卜晔;檀克勤 -专利权人：广州派真生物技术有限公司
申请日： 2022-07-19 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，公开了一种高产质粒、其构建方法及其应用。本发明的高产质粒包括正调控元件RNAII基因序列和透明颤菌血红蛋白基因序列。本发明的高产质粒在摇瓶发酵的产量相比原质粒有明显提高，且不影响其用于AAV包装后的病毒滴度水平。本发明的高产质粒对于质粒生产能力的提升和生产成本的降低具有重要的应用价值和意义。
一种高产质粒构建方法及其应用

[发明专利]一种质粒运输工具-CN201310335144.8无效
发明人：袁红 -专利权人：中山康方生物医药有限公司
申请日： 2013-08-02 - 公布日： 2013-10-16 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种质粒运输工具。它包括运输容器，该运输容器包括管体和管盖，在管体中部设有滤网，滤网底部具有一层滤纸。本发明的质粒运输工具，在管体中部的滤网底部设有一层滤纸，在运输质粒的时候，将含有质粒的溶液滴加到滤纸上，质粒就吸附在滤纸上，从而能够实现比较方便的干法运输质粒，减少运输过程中意外的发生。
一种质粒运输工具

[实用新型]一种质粒运输工具-CN201320470421.1有效
发明人：袁红 -专利权人：中山康方生物医药有限公司
申请日： 2013-08-02 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种质粒运输工具。它包括运输容器，该运输容器包括管体和管盖，在管体中部设有滤网，滤网底部具有一层滤纸。本实用新型的质粒运输工具，在管体中部的滤网底部设有一层滤纸，在运输质粒的时候，将含有质粒的溶液滴加到滤纸上，质粒就吸附在滤纸上，从而能够实现比较方便的干法运输质粒，减少运输过程中意外的发生。
一种质粒运输工具

[发明专利]一种靶向敲除HBx蛋白的质粒及其构建方法和应用-CN202110506989.3在审
发明人：周俊;王腊;孙丹丹;邓洋;丁士杰 -专利权人：武汉科技大学
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提出了一种靶向敲除HBx蛋白的pCMVHBV‑HBx(‑)质粒以及质粒的构建方法，构建方法步骤以下：以pCMVHBV质粒为模板，设计HBx的CDS突变型引物进行PCR扩增，扩增产物经凝胶回收，孵育，大肠杆菌转化，测序验证得到pCMVHBV‑HBx(‑)质粒。本发明的pCMVHBV‑HBx(‑)质粒可以靶向敲除HBx蛋白，显著抑制pgRNA和cccDNA的形成。
一种靶向 hbx 蛋白质粒及其构建方法应用

[发明专利]一种HLA-DR突变质粒载体及其构建方法和应用-CN202111602438.3在审
发明人：张小蒙;何天慧;卓微伟 -专利权人：江苏医药职业学院
申请日： 2021-12-25 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于质粒载体构建领域，提供一种突变质粒载体及其构建方法和应用。该突变质粒载体是由突变的HLA‑DR基因和pBI‑CMV1质粒连接构建而成。本发明提供的突变质粒载体可以在原核和真核细胞内进行表达，可以为HLA‑DR糖基化修饰功能研究和应用奠定基础。
一种 hla dr 突变质粒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种过表达AURKA基因质粒及其构建方法和应用-CN202210756202.3有效
发明人：杨琛;雷蕾;吴勇;郑林峰;邓雪英;王增;冯建国;应莉莎 -专利权人：浙江省肿瘤医院
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供一种过表达AURKA基因质粒及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明过表达AURKA基因质粒的构建方法包括：sgRNA退火形成双链；质粒酶切成线性质粒；将sgRNA与质粒连接。
一种表达 aurka 基因质粒及其构建方法应用

[发明专利]一种快速构建重组质粒的方法-CN201611023368.5在审
发明人：张军林;田弛;郭书奎;谢立兰;岳硕豪;刘帅;李毅 -专利权人：武汉生物工程学院
申请日： 2016-11-21 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，公开了一种快速构建大肠杆菌重组质粒的方法。包括如下步骤同源重组引物的设计、携带pKD46质粒的E.coli大肠杆菌感受态细胞的制备、带有与质粒同源区段的外源DNA片段的共转化。利用pKD46质粒在L‑阿拉伯糖诱导下稳定地表达Red重组酶，构建出含有Red重组系统的大肠杆菌菌株，重组酶能促进外源DNA片段两端所携带的与质粒同源的区段和线性质粒完成重组，首次实现了利用RED的重组技术将外源DNA片段插入到载体的单一限制性内切酶位点，在37℃培养下可以消除pKD46质粒，不会对后续实验产生干扰，大大简化了重组质粒的构建步骤，缩短了时间。产生的重组质粒经PCR与酶切鉴定后阳性克隆效率较高，可以成为一种构建重组质粒的新手段。
一种快速构建重组质粒方法

[发明专利]一种噬菌体辅助的连续定向进化系统及进化方法-CN202211315678.X在审
发明人：李小明;崔金明;刘陈立 -专利权人：广州先进技术研究所
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：该连续定向进化系统包括AP1质粒、AP2质粒、诱变质粒MP和噬菌体，AP1质粒、AP2质粒、诱变质粒MP的核酸序列分别如SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；AP1质粒携带定向进化方法为将AP1质粒、AP2质粒和诱变质粒MP共转化宿主菌，得到进化用工程菌；将噬菌体和进化用工程菌在含有纤维寡糖的培养基中经过多轮进化培养，在多轮进化培养过程中递减纤维寡糖在培养基中的浓度，以提高筛选压力
一种噬菌体辅助连续定向进化系统方法

[发明专利]一种提高CRISPR/Cas基因编辑效率的方法-CN202210981325.7在审
发明人：刘嵘明;梁丽亚 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2022-08-16 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：首先将pCas质粒及pTox质粒转入宿主菌，pCas质粒中插入有Cas基因和lambda Red基因，pTox质粒中插入有毒性基因，再将pgRNA质粒与外源DNA共同转入上述宿主菌，pgRNA质粒中插入有靶向目标基因gRNA_1和靶向pTox质粒的抗性基因的gRNA_2；pCas质粒表达的Cas蛋白与pgRNA质粒转录的gRNA_1组合对目标靶向位点进行DNA剪切，lambda Red系统结合外源DNA实现基因重组，Cas蛋白与gRNA_1组合后未对目标靶向位点进行DNA剪切，宿主菌中pTox质粒表达有毒物质，从而去除未经基因编辑的宿主菌，保留经基因编辑的宿主菌。
一种提高 crispr cas 基因编辑效率方法

[发明专利]一种含amiRNA-HIF-1α序列的重组质粒的制备方法及用途-CN201410233294.2在审
发明人：殷佩浩;彭文;邱艳艳;陈腾;汤庆丰;梁波;胡送娇;包益洁;于卉;石晓静;邹瑜 -专利权人：上海市普陀区中心医院
申请日： 2014-05-29 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种含amiRNA-HIF-1α序列的重组质粒的制备方法及用途，该重组质粒的制备方法包含amiRNA-HIF-1α序列的合成、目的片段和载体质粒的连接、连接产物转化大肠杆菌感受态细胞以及重组质粒电泳鉴定并测序等步骤该重组质粒包含amiRNA-HIF-1α的编码序列以及载体质粒DNA序列，载体质粒DNA序列中包含与amiRNA-HIF-1α连接的调节序列。本发明还公开了该重组质粒用于制备抗肿瘤药物的用途。
一种 amirna hif 序列重组质粒制备方法用途

[发明专利]一种分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr及其制备方法与应用-CN201410029534.7在审
发明人：熊海容;王亚伟;陈丰;张巍 -专利权人：中南民族大学
申请日： 2014-01-22 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了一种分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示，本发明中以质粒pPIC9和pAO815为模板，采用重叠PCR方法拼接质粒pAO815中酶切位点Cla I起始并包括5′AOX启动子区在内的基因片段与质粒pPIC9中信号肽基因序列起始的包括多克隆位点在内的基因片段并于3′端引入酶切位点BamH I，同时除去质粒pPIC9中信号肽基因序列上游的BamH I位点，体外构建分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr。本发明中同时还提供了木聚糖酶DSB基因单拷贝重组质粒pAO815Hr-DSB以及双拷贝重组质粒pAO815Hr-2×DSB。
一种分泌拷贝重组表达质粒 pao815hr 及其制备方法应用

[发明专利]一种基于ROSA26位点构建外源DNA修复模板的方法-CN202310261805.0在审
发明人：陈亚檞;杨宇;张双;邹家伦;袭昊瞳;朱茂碧;范江霖 -专利权人：五邑大学
申请日： 2023-03-17 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及核酸分子技术领域，具体公开了一种基于ROSA26位点构建外源DNA修复模板的方法，包括以下步骤：构建重组质粒；将酶切线性化的重组质粒和酶切后的外源基因序列连接，构成中间体质粒，所述中间体质粒含有启动子、外源基因序列和PloyA；将穿梭质粒、中间体质粒、与ROSA位点相关的上、下游同源臂片段通过无缝克隆连接，获得外源DNA修复模板。本发明将含有启动子、外源基因序列和PloyA的中间体质粒、与ROSA位点相关的上、下游同源臂片段通过无缝克隆连接并入载体中，构建出重组质粒，本发明提供的方法提高了构建准确率并完成测序验证无误。
一种基于 rosa26 构建 dna 修复模板方法

[发明专利]一种标准化、高精度、通用的功能模块构建方法-CN201310377238.1有效
发明人：元英进;刘夺;李炳志;王霞;申明华;胡梦龙;杜昊星;苏皖;宋田青;翟芳;郭雪娇;郭睿 -专利权人：天津大学
申请日： 2013-08-27 - 公布日： 2017-12-29 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种标准化、高精度、通用的功能模块构建方法，包括如下步骤（1）将源基因添加标准化位点形成基因元件，将基因元件连入质粒pLD‑Blunt中形成带有基因元件的质粒，进行序列验证；（2）从带有基因元件的质粒中调取基因元件，连入模块工具质粒中的如下缺口终止子1‑启动子‑AATG‑缺口‑TAAA‑终止子2；构建出不同的功能模块的质粒；（3）从不同的功能模块的质粒中调取不同的功能模块，与经过酶切的酵母质粒载体共转化酿酒酵母，构建出标准化、高精度、通用的功能模块，存放于质粒中；本发明具有通用性、标准化、高精度、自由选择性。
一种标准化高精度通用功能模块构建方法

[发明专利]一种适用于氧化葡萄糖酸杆菌的基因表达载体及其应用-CN201510042193.1有效
发明人：林金萍;魏东芝;石园园;李克非 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2015-01-27 - 公布日： 2017-08-11 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供一种适用于氧化葡萄糖酸杆菌的基因表达载体及其应用，所述载体是1)将质粒pBBR1MCS‑5中的rep基因启动子‑35区“TTGACT”序列定点突变为“TTGACA”得到的质粒，或将所述质粒的rep基因启动子‑10区“CATAAT”序列定点突变为“TATAAT”得到的质粒，或以上两处均定点突变得到的质粒；或2)以pBBR1MCS质粒为基础的、且具有相同的rep基因作为复制起始区的质粒发生与1)相同的定点突变所得到的质粒
一种适用于氧化葡萄糖杆菌基因表达载体及其应用