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[发明专利]鉴别或辅助鉴别外源基因密码子优化的方法-CN201410655357.3在审
发明人：朱祯;周云;戴艳 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2014-11-17 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了鉴别或辅助鉴别外源基因密码子优化的方法。本发明所提供的鉴别或辅助鉴别外源蛋白基因是否为受体生物材料密码子优化基因的方法，包括：S1)将没有进行受体生物材料密码子优化的外源基因和待测外源基因分别转入受体生物材料中，分别得到对照转基因生物材料和待测外源基因转基因生物材料；S2)如果待测外源基因转基因生物材料中报告基因的表达量高于对照转基因生物材料中报告基因的表达量，待测外源基因为或候选为所述受体生物材料密码子优化基因；如果待测外源基因转基因生物材料中报告基因的表达量等于或低于对照转基因生物材料中报告基因的表达量，待测外源基因不为或候选不为受体生物材料密码子优化基因。
鉴别辅助基因密码子优化方法

[发明专利]一种用于前列腺癌早期诊断的外泌体源性基因mRNA标志物组及其应用-CN201811439103.2有效
发明人：王家亮 -专利权人：上海晟燃生物科技有限公司
申请日： 2018-11-29 - 公布日： 2019-03-22 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于前列腺癌早期诊断的外泌体源性基因mRNA标志物组及其应用，所述标志物组包括：外泌体源性TXK基因mRNA、外泌体源性ATM基因mRNA、外泌体源性MAX基因mRNA、外泌体源性STK4基因mRNA、外泌体源性GRK5基因mRNA、外泌体源性PDGFA基因mRNA、外泌体源性IL32基因mRNA、外泌体源性RASSF5基因mRNA和外泌体源性TOX4基因mRNA。
基因mRNA 前列腺癌标志物组早期诊断良性前列腺增生前列腺穿刺活检应用前列腺炎灵敏度试剂盒与非

[发明专利]一种在酵母基因中定点敲入外源基因的方法-CN202211381732.0在审
发明人：高惠敏;赵延明;祁显涛;谢传晓;苏成付 -专利权人：青岛农业大学;中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2022-11-04 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开一种在酵母基因中定点敲入外源基因的方法，属于基因工程技术领域。本发明所述的在酵母基因中定点敲入外源基因的方法，其步骤如下：将携带有Cas9基因和sgRNA转录基因的载体，与外源基因片段，共同转化至酵母体内，转录后的sgRNA引导Cas9蛋白至酵母靶向基因的靶点处，切割靶点，并在靶点处引入DNA双链断裂，然后利用同源重组，将外源基因敲入靶点中，从而实现外源基因在酵母基因中的定点敲入。本发明实现了以更短的同源臂序列完成同源重组，从而在酿酒酵母ADE2基因第640～641位碱基之间敲入外源基因，这在现有技术的基础上具有突出的进步。
一种酵母基因定点敲入外源方法

[发明专利]用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法-CN201410678673.2在审
发明人：钟伯雄;叶露鹏;钱秋杰;张玉玉;尤征英;王少华;车佳倩;宋佳 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-11-24 - 公布日： 2015-03-11 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法。采用分子生物学技术构建包含有标记基因和外源基因两个相邻且转录方向相同的表达框的转基因表达质粒；采用显微注射法将转基因质粒与辅助质粒一起导入到生物的基因组内，培育成外源基因能够稳定遗传和表达的转基因生物；根据转基因生物中标记基因表达量的信息预测外源基因表达量，并筛选获得该外源基因表达量对应的生物个体或品种。本发明可简单、快捷、省力地从大量的转基因生物中筛选出高效表达外源基因的转基因生物个体或品种，为建立高效的生物反应器提供了理想的筛选手段。
标记基因预测表达筛选转基因生物方法

[发明专利]重组DNA病毒和其制备方法-CN96107281.4无效
发明人：斋藤泉;钟江裕美;中井通雄 -专利权人：住友制药株式会社
申请日： 1996-03-14 - 公布日： 1997-01-29 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：一种用于转染动物细胞并携带有外源基因和能够调节该外源基因表达的启动子的重组DNA病毒，该病毒的E2A基因功能被完全缺失。因此该重组DNA病毒能稳定地将外源基因转导到各种动物细胞中，导致外源基因在动物细胞中连续表达。外源基因的连续表达能使遗传病得到有效的治疗。
重组 dna 病毒制备方法

[发明专利]携带双筛选基因的真核表达载体构建及其应用-CN201110283158.0无效
发明人：董小岩;田文洪;吴小兵;董哲岳 -专利权人：北京五加和分子医学研究所有限公司
申请日： 2011-09-22 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明具体涉及一种携带dhfr和neo基因的真核表达载体pAAV2neo-dhfr，该表达载体主要由AAV2的ITR、neo基因表达框、dhfr基因表达框和外源基因表达框组成，其中外源基因表达框中含有多克隆位点MCS，用于表达外源基因的插入。使用时将外源基因插入其表达框的多克隆位点之间，获得外源基因的表达载体，转染表达细胞，多种策略筛选获得外源基因的稳定高表达细胞株。由于该载体携带AAV2的ITR序列，因此有利于外源基因稳定表达细胞株的获得。同时，该载体包含两种筛选基因，适用于多种表达细胞并缩短稳定高表达细胞株的筛选过程。本载体可高效地真核表达多种外源基因，为真核蛋白的表达提供了新的选择。
携带筛选基因表达载体构建及其应用

[发明专利]一种外源基因的检测方法与试剂盒-CN201910320127.4在审
发明人：彭海 -专利权人：武汉明了生物科技有限公司
申请日： 2019-04-19 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种外源基因的检测方法与试剂盒，属于生物检测领域。所述检测方法包括：确定待测样品中需要检测的外源基因和待测样品中的内源标准基因；根据外源基因的人工序列、外源基因的边界序列或内源标准基因的序列制备杂交探针；提取并纯化待测样品的基因组DNA和质控样品的基因组DNA并分别进行片段化；在待测样品DNA片段和质控样品DNA片段上分别连接上接头序列；利用模板片段和外源基因的特征片段对待测样品中的外源基因进行检测，判定外源基因是否存在于待测样品中。
外源基因待测样品检测种外源基因基因组DNA 标准基因质控样品试剂盒内源生物检测领域制备杂交探针假阳性结果气溶胶污染微生物感染边界序列模板片段人工序列特征片段片段化上接头判定

[发明专利]高通量筛选高效表达外源蛋白的重组里氏木霉的方法-CN201210271826.2有效
发明人：董志扬;秦丽娜 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2012-08-01 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了高通量筛选高效表达外源蛋白的重组里氏木霉的方法。该高通量筛选高效表达外源蛋白的重组里氏木霉的方法包括如下步骤：比较经流式细胞仪鉴定的表达外源蛋白的重组里氏木霉的红色荧光强度，根据红色荧光强度的高低鉴定外源蛋白的表达能力，红色荧光强度越高的表达外源蛋白的重组里氏木霉的外源蛋白表达能力越高其中的外源蛋白基因以融合基因的形式导入里氏木霉，该融合基因是将红色荧光蛋白基因通过连接肽2A序列与外源蛋白基因连接得到的融合基因，所述外源蛋白基因位于所述红色荧光蛋白基因的上游或下游；所述外源蛋白基因的
通量筛选高效表达蛋白重组里氏方法

[发明专利]一种将外源基因转化到荷花中进行瞬间表达的方法-CN201610824255.9有效
发明人：田代科;张大生;陈青;刘青青;刘凤栾;赵喜双;吴璇;陈蒙娇;吴少华 -专利权人：上海辰山植物园
申请日： 2016-09-14 - 公布日： 2019-09-10 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：一种将外源基因转化到荷花中进行瞬间表达的方法，该方法主要包括采集花蕾、准备阳性农杆菌、制备菌液、外源基因的转化及培养和瞬时表达检测步骤，将农杆菌菌株通过注射渗透法将含有外源基因的表达质粒转入到荷花花瓣的组织中，经过培养，使外源基因在花瓣中瞬时表达。本发明将外源基因转化入荷花花瓣中进行瞬间表达，不损伤花瓣组织，农杆菌易于扩散，外源基因转化后，40～48小时就可以观察实验结果，操作方法简便、转化率高，简单方便，所需时间短，能够快速检测外源目的基因，有效进行荷花功能基因的验证
一种将外源基因转化荷花进行瞬间表达方法

[发明专利]兽疫链球菌的基因工程菌株及其应用-CN202010812332.5在审
发明人：李凯峰;谭秀梅;鲍素敏;石江水;谢文平;徐宇骋;肖文龙;马雷磊 -专利权人：宜昌东阳光生化制药有限公司
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2022-02-22 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提出了一种兽疫链球菌的基因工程菌株。所述基因工程菌株携带外源的基因表达框，所述外源的基因表达框包括第一基因表达框和第二基因表达框，其中，所述第一基因表达框包括第一启动子和hasA基因，所述第一启动子和hasA基因可操作的连接；所述第二基因表达框包括第二启动子和hasB基因，所述第二启动子和hasB基因可操作的连接。根据本发明实施例的兽疫链球菌的基因工程菌株，携带外源的hasA基因表达框和外源的hasB基因表达框，而不携带外源的hasC基因表达框，外源的基因表达框中的hasA基因和hasB基因在两个独立地启动子下启动表达，相比于现有兽疫链球菌的基因工程菌株，具有显著更高的HA合成产量。
链球菌基因工程菌株及其应用

[发明专利]花粉介导的植物基因转化方法-CN201010228315.3无效
发明人：古森本;颜永福 -专利权人：古森本;颜永福
申请日： 2010-07-08 - 公布日： 2012-01-11 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及一种花粉介导的植物基因转化方法，包括：将外源基因与新鲜花粉溶液混合，形成制备溶液，对该制备溶液施以电压进行电击后，让花粉壁因电击作用而产生孔洞，使得该外源基因得以导入花粉而产生具有外源基因的转化花粉，最后将转化花粉进行人工授粉以培育具有外源基因的种子，该种子经萌芽后，即可获得具有该外源基因的子代植株，本方法不需通过组织培养或外源基因载体即可获得具有转化基因的子代，操作过程也十分简单快速。
花粉植物基因转化方法

[发明专利]一种玉米遗传转化方法-CN201010512368.8无效
发明人：高建强;赵军 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所
申请日： 2010-10-12 - 公布日： 2012-05-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种玉米的遗传转化方法，本发明的方法包括如下步骤：向受体玉米植株的雌穗中转入外源基因，再对转入外源基因的雌穗进行授粉，授粉后的雌穗继续发育，得到转入外源基因的结实穗。所述方法还包括如下步骤：将转入外源基因的结实穗中的玉米粒进行播种、种植和抗性筛选，得到转入外源基因的玉米植株。本发明的实验证明，本发明在未经历组织培养过程的阶段，而将外源的基因整合到玉米基因组中，为一种新的玉米基因遗传转化方法。
一种玉米遗传转化方法

[发明专利]实现植物基因组外源序列定点整合的方法-CN201610602370.1在审
发明人：宋书锋;李新奇;李莉;张大兵;符习勤;袁定阳;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2016-07-27 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种实现植物基因组外源基因定点整合的方法，包括如下步骤：步骤一、构建能够在植株基因组的目的整合位点区域进行基因组编辑的打靶载体，该打靶载体包括整合靶位点序列和Cas9核酸酶表达元件；步骤二、构建外源基因转化载体，并将该外源基因转化载体随机整合到植株的基因组中，得到转化有该外源基因的转基因株系，其中，外源基因转化载体包含整合位点序列和与目的整合位点两翼相同的同源臂序列，且该同源臂序列位于整合位点序列和外源基因之间；步骤三、将打靶载体转化入转基因株系内，筛选得到只含有定点整合到目的整合位点区域的株系。本发明能够提高植物定点整合外源基因的成功率。
实现植物基因组序列定点整合方法

[发明专利]一种柔嫩艾美耳球虫定点整合外源基因位点及其应用-CN202211485870.3在审
发明人：刘贤勇;索勋;郝振凯;索静霞;陈君敏 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2022-11-24 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N1/11 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体提供一种柔嫩艾美耳球虫定点整合外源基因位点及其应用。本发明涉及转基因柔嫩艾美耳球虫定点整合外源基因位点的筛选、质粒构建及其应用。本发明公开了一个柔嫩艾美耳球虫高效整合位点信息，外源基因整合到该位点后不仅能够稳定地遗传还可以一定程度地提高转基因球虫的繁殖力。本发明还提供了质粒载体，包括：定点整合位点同源左臂，外源基因和定点整合位点同源右臂，该载体是依托CRISPR/Cas9打靶系统所设计的，所述质粒载体能够将外源基因精确地引入到球虫基因组特异性位点中，从而解决球虫转基因技术外源基因随机整合，以及转基因球虫外源基因丢失的问题。
一种柔嫩艾美耳球虫定点整合基因及其应用

[发明专利]一种通用型衣藻外源基因表达载体构建方法-CN201711224812.4有效
发明人：王亮;杨丽婧;陈卓雅;李佳玲;梁巧盈;陆军;郑元林 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2017-11-29 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于表达衣藻外源基因的载体构建方法，该载体包含一个潮霉素B（Hygromycin B，Hyg+）筛选基因，一个外源基因插入位点，一个用于标记外源基因表达的标签3×HA，以及一个用于终止外源基因转录的终止子。该载体通过对已有载体pHyg3的序列改造获得，外源基因可通过限制性内切酶EcoRV或无缝克隆的方法连入，对于外源基因在衣藻细胞内表达具有很高的应用研究价值。
一种通用型衣藻外源基因表达载体构建方法

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