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[发明专利]动物乳腺组织特异性高效表达载体-CN97116676.5无效
发明人：陈永福;陈东;安晓荣 -专利权人：中国农业大学
申请日： 1997-08-15 - 公布日： 2000-11-29 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了使外源基因在动物乳腺组织中特异表达的载体ｐＢＣＤ，该载体含有控制外源基因在乳腺组织特异表达的羊ＢＬＧ基因及其表达控制序列，驱动外源基因高效合成蛋白质的小鼠ＳＴＡＴ序列，以及便于将外源基因插入载体的位于羊ＢＬＧ基因启动子下游和乳球蛋白基因第一个遗传密码子ＡＴＧ上游的多接头ＤＮＡ片段。本发明还公开了利用该载体在动物乳腺组织中表达外源基因（如人生长激素）的方法。
动物乳腺组织特异性高效表达载体

[发明专利]确定外源基因在人类基因组中整合方式的方法和系统-CN201280074522.5在审
发明人：曾玺;李伟阳;陈盛培;蒋慧;汪建;王俊;杨焕明;张秀清 -专利权人：深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院
申请日： 2012-07-06 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：提供了确定外源基因在人类基因组中整合方式的方法、系统和可读介质。其中，确定外源基因在人类基因组中整合方式的方法包括：利用捕获探针从人类基因组核酸样本中捕获可能含有外源基因片段整合的DNA片段；针对捕获的DNA片段进行测序，以便获得测序结果；对测序结果进行第一除杂；将经过第一除杂的测序结果与已知的人类基因组序列和外源基因序列进行第一比对，以便获得可能含有外源基因整合片段的测序数据；将可能含有外源基因整合片段的测序数据进行组装，以便得到组装结果；对组装结果进行第二除杂；将经过第二除杂的组装结果进行第二比对，并且基于第二比对结果，确定外源基因在人类基因组中的整合方式
确定基因人类基因组整合方式方法系统

[发明专利]检测重组CVA10疫苗外源基因拷贝数的标准质粒及其制法和应用-CN202011345683.6在审
发明人：徐颖之;张改梅;李国顺;赵丽丽;谢学超;肖霞;肖海峰;顾美荣;刘建凯 -专利权人：北京民海生物科技有限公司
申请日： 2020-11-26 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一种用于检测重组CVA10疫苗外源基因拷贝数的标准质粒及其制法和应用。本发明的标准质粒由内源基因MOX片段SEQ ID No.1、外源基因P1片段SEQ ID No.2和外源基因3CD片段SEQ ID No.3串联于克隆载体中。本发明通过构建标准质粒，采用Taqman探针‑荧光定量PCR法，简便快速、绝对定量、准确地对插入外源基因拷贝数进行分析，从而有效缩短了重组CVA10疫苗外源基因拷贝数测定的检测时间，便于多次重复操作，对基于汉逊酵母平台构建的重组CVA10疫苗外源基因拷贝数测定以及重组CVA10疫苗外源基因遗传稳定性验证具有广阔的应用前景。
检测重组 cva10 疫苗基因拷贝标准质粒及其制法应用

[发明专利]猪基因组中外源基因整合位点的检测方法-CN201010251752.7无效
发明人：刘忠华;牟彦双;孔庆然 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2010-08-12 - 公布日： 2011-01-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：猪基因组中外源基因整合位点的检测方法，本发明涉及外源基因整合位点的检测方法。本发明解决了现有外源基因整合位点的检测方法操作复杂，误差较大的问题。方法：一、分别针对TgInS1、TgInS2和TgInS3外源基因插入基因组中的位点进行PCR扩增；二、电泳检测，即实现了猪基因组中外源基因整合位点的检测。本发明的方法操作简单，且与现有的外源基因整合位点的检测方法相比较，人为误差小，检测结果准确。
基因组中外基因整合检测方法

[发明专利]基于第三代基因测序数据的外源插入信息的检测方法和装置-CN202211629203.8有效
发明人：姜亚菲;龚佳震;刘淼;陶琳娜;王静 -专利权人：北京诺禾致源科技股份有限公司
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于第三代基因测序数据的外源插入信息的检测方法和装置，涉及外源信息插入检测技术领域，缓解了现有技术中对于外源信息插入的检测速度慢、准确率低的技术问题。该方法包括：对待检测个体进行三代测序，整合参考基因和外源基因得到整合基因组，将测序结果与整合基因组进行比对，得到确定外源信息插入的第一Reads及插入位点，以及参考基因与外源基因插入片段之间的易位点；基于第一Reads与易位点，准确地检测外源序列的插入信息，包括插入的位点及插入的序列。
基于第三代基因序数插入信息检测方法装置

[发明专利]一种无外源标记基因的抗PCV2转基因猪制备方法-CN201710321613.9在审
发明人：李紫聪;黄晓灵;吴珍芳;刘德武;蔡更元;郑恩琴 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2017-05-09 - 公布日： 2017-09-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种无外源标记基因的抗PCV2转基因猪制备方法。该无外源标记基因的抗PCV2转基因猪是通过将目的基因(抗PCV2 siRNA序列)与外源标记基因(Neo/EGFP融合表达基因)构建共表达载体，并通过转染、体细胞克隆等技术获得F0代抗PCV2转基因猪，并将获得的F0代转基因猪进行配种获得F1抗PCV2转基因猪，对F1代抗PCV2转基因猪进行鉴定，筛选出合适的F1转基因猪提取耳皮成纤维细胞，进行建系，并用HTNCre重组酶筛选出删除了Neo/EGFP外源标记基因的细胞系，并利用该细胞系进行体细胞克隆，最终获得无外源标记基因的抗PCV2转基因猪。该转基因猪删除了外源标记基因，减少了外源基因对转基因猪个体健康的影响，同时也可以简化转基因猪安全评价程序，有利于该转基因猪的产业化推广及应用。
一种无外源标记基因 pcv2 转基因制备方法

[发明专利]胰岛素稳定表达质粒的构建及其在体内的高效导入方法-CN02111596.6无效
发明人：卢大儒;贺晨霞;吴文君 -专利权人：上海复旦深慧基因科技有限责任公司
申请日： 2002-04-29 - 公布日： 2002-11-27 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及尾静脉大容量快速注射介导基因导入方法与载体元件相结合进行糖尿病基因治疗的新途径。尾静脉大容量快速注射可介导外源基因高效转染动物肝脏,达到外源基因在体内的高水平表达,但该方法缺点为表达时间短暂。转座子存在时外源基因可整合到细胞基因组上,从而外源基因可长期表达。ApoE基因区的肝位置控制区序列(HCR)与外源基因表达单位相连,可介导外源基因的高效长期表达。线状DNA通过尾静脉注射进入肝脏后可延长外源基因在体内的表达时间。本发明将不同的胰岛素表达基因构建到转座子载体和HCR特异表达载体上后,通过尾静脉大容量快速法注射到小鼠体内,达到血糖下降并长期稳定的效果。
胰岛素稳定表达质粒构建及其体内高效导入方法

[发明专利]肾癌外泌体标志物组及其应用-CN201910474297.8有效
发明人：王家亮 -专利权人：上海晟燃生物科技有限公司
申请日： 2019-06-03 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及肾癌外泌体标志物组及其应用，所述标志物组包括：外泌体源性VHL基因的mRNA、外泌体源性PBRM1基因的mRNA、外泌体源性ATM基因的mRNA、外泌体源性PTEN基因的mRNA和外泌体源性SETD2基因的mRNA。本发明所述标志物组通过检测外泌体源性VHL基因、PBRM1基因、ATM基因、PTEN基因和SETD2基因的mRNA的检测和相应的诊断模型，可实现肾癌患者与非肾癌患者的区分，尤其是早期肾癌样本（例如临床T1
肾癌基因标志物组体标志与非样本诊断占位病变单纯性肾囊肿检测肾脏应用

[发明专利]一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法-CN201310209089.8无效
发明人：魏红江;申友锋;赵红业;李鸿辉;卿玉波;潘伟荣;富国文 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2013-05-31 - 公布日： 2013-08-28 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法，属于分子生物学领域；利用TALEN技术在生物体基因组中的特定位置设计出具有特异性序列TALEN靶点、构建TALEN质粒，同时，构建外源基因质粒；再将TALEN质粒和外源基因共同转染受体细胞，然后，在受体细胞基因组待整合的位置上切开一个口；外源基因就会在受体细胞基因组的切口处将外源基因序列自动插入。本发明实现了外源基因在基因组上定点整合，本方法操作简单，可控性高，实用性强。
一种利用 talen 技术高效定点转基因方法

[发明专利]将基因转移进生殖细胞的方法-CN99802368.X无效
发明人：上野充博;小西治子;森下三保;结城惇;浅田起代蔵;加藤郁之进 -专利权人：宝酒造株式会社
申请日： 1999-01-20 - 公布日： 2001-03-28 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：其中整合了所需外源基因的生殖细胞;获得带有这些细胞的脊椎动物的便利方法;以及使用这些细胞和所述脊椎动物构建新脊椎动物系的方法。亦即将外源基因转移进脊椎动物的睾丸的方法,该方法包括减少睾丸细胞的步骤和将携带所述外源基因的重组病毒接种入所述睾丸的步骤;通过上面的方法在其中转移了所述外源基因的脊椎动物;由所述脊椎动物获得并且其中转移了所述外源基因的睾丸细胞;通过使上述脊椎动物交配而获得并且携带有所述转移外源基因的脊椎动物以及通过使用所述睾丸细胞进行人工受精获得并且携带所述转移外源基因的脊椎动物。
基因转移生殖细胞方法

[发明专利]提高转基因昆虫细胞表达外源基因水平的方法-CN200810025299.0无效
发明人：贡成良;曹广力;薛仁宇;周文林;沈卫德 -专利权人：苏州大学
申请日： 2008-04-30 - 公布日： 2008-09-24 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高昆虫转基因细胞表达外源基因的方法，将在昆虫细胞内具有活性的启动子控制的新霉素抗性基因表达盒、增强子元件和外源基因表达盒通过基因操作克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，然后与表达转座酶的辅助质粒混合转染昆虫细胞系，通过G418的分段筛选获得转基因昆虫细胞。该转基因细胞通过细胞克隆技术，结合外源基因表达水平的实际检测获得外源基因高水平表达的工程细胞。本发明方法实现了转基因昆虫细胞高水平持续表达外源基因，表达产物无杆状病毒污染，生物安全性高，后加工完善，天然性好。
提高转基因昆虫细胞表达基因水平方法

[发明专利]筛选和分离外源基因表达细胞的载体系统-CN201010586592.1无效
发明人：孙美艺;刘庆军;韩化敏;刘小立 -专利权人：北京表源生物技术有限公司
申请日： 2010-12-13 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及一种筛选和分离外源基因表达细胞的载体系统，其包含：具有携带生物素化酶基因表达盒的第一表达载体，具有携带生物素化酶底物与跨膜蛋白基因表达盒的第二表达载体，以及位于第一表达载体和/或第二表达载体上的目的基因表达盒本发明还涉及使用上述表达外源基因载体系统用于筛选和分离外源基因表达细胞的方法。本发明所述的表达外源基因的载体系统可快速、简便地建立、筛选和分离表达外源基因的细胞，用于研发与临床应用。
筛选分离基因表达细胞载体系统

[发明专利]重组VSV病毒载体和重组VSV病毒及其制备方法和用途-CN03156144.6无效
发明人：邓宏魁;丁明孝;聂玉春;袁菲;王在;郭延平;胡建军;李锦全;易凌 -专利权人：北京大学
申请日： 2003-09-01 - 公布日： 2005-03-09 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明构建了包含VSV(水疱性口炎病毒)病毒基因组、可携带外源基因，能恢复出重组VSV病毒的重组VSV病毒载体，还制备了具有复制功能及感染性，可在被感染的宿主细胞中增殖并表达基因组中所携带的外源基因的重组本发明将上述病毒载体及重组病毒用于高效表达外源基因，所表达的外源基因产物可被纯化，或直接将重组VSV病毒用于感染实验动物而获得外源基因产物的抗体或中和抗体，并可用于各种病毒或细菌性疾病的疫苗研制。
重组 vsv 病毒载体及其制备方法用途

[发明专利]外源基因等位性-CN00815086.9无效
发明人： S·伊滋哈尔 -专利权人：费泰西德有限公司
申请日： 2000-08-27 - 公布日： 2003-03-12 - 主分类号： A01K67/00 文献下载
摘要：一种非人真核生物体，其基因组的染色体对的第一染色体上包含第一外源基因，染色体对的第二染色体上包含第二外源基因，上述的第一和第二外源基因是等位关系，因此第一和第二外源基因强制性地分配到不同的配子中。
基因等位

[发明专利]一种转基因鸡输卵管生物反应器的制备方法-CN201811054091.1有效
发明人：石铭 -专利权人：石铭
申请日： 2018-09-10 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提出了一种转基因鸡输卵管生物反应器的制备方法，包括以下步骤：S1.设计靶向鸡基因组DNA的gRNA；S2.构建gRNA的表达载体；S3.构建携带有外源基因表达框的供体载体：所述供体载体包括同源修复载体和非同源修复载体本发明利用结合CRISPR基因编辑技术，提高了外源基因整合到基因组中的准确率，实现高效率导入外源基因，制备出能够表达并分泌外源蛋白到鸡蛋蛋清中的转基因鸡，并实现外源基因稳定的遗传给后代。
一种转基因输卵管生物反应器制备方法