本发明公开了一种用于猴痘病毒检测的探针组合物，所述组合物包括猴痘探针组合物以及内参探针组合物；所述猴痘探针组合物包括猴痘检测探针以及检测引物对，所述内参探针组合物包括内参探针以及内参引物对；所述猴痘检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述检测引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.2~3所示；所述内参探针的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，所述内参引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.5~6所示。本发明同时公开了包含上述探针组合物的试剂盒。结果表明，本发明的最低检出限为195copies/ml，检出率为95%，极大地提高检测猴痘病毒的效率。
本发明涉及一种微生物种群绝对丰度定量的内参组合物、试剂盒及方法，内参组合物包括SEQ ID No.1‑SEQ ID No.8所示的8条内参序列，SEQ ID No.1‑SEQ ID No.8具有由低到高的浓度梯度，且内参组合物与样本的占比为10%‑30%。通过向环境样本中添加不同浓度梯度的内参DNA，量化不同微生物群落间的绝对含量，在PCR反应过程中，内参DNA分子产生预期大小的扩增子，结合内参DNA的拷贝数和测序输出的reads数，建立内参DNA拷贝数和本方法一次扩增实验，可以同时得到相对定量和绝对定量结果两份分析结果，节省样品与内参DNA用量，最大程度上节省测序成本。
本发明涉及一种检测CALR基因突变的内参扩增引物组合物，其包括SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：6所示序列的引物；本发明还涉及一种含有上述内参扩增引物组合物的内参扩增体系及其试剂盒和检测方法，以及由上述内参扩增引物组合物扩增的CALR基因突变的靶序列，该靶序列为SEQ ID NO：7所示序列。本发明所述的内参扩增体系及其检测方法与CALR基因的突变体系配套使用，其既可以对突变型的CALR基因进行快速检测，也可以对野生型的CALR基因进行扩增，作为CALR突变检测试剂盒的内参质控体系，在质量控制的提升方面具有重要意义
本发明公开一种用于高加索三叶草PCR表达分析的内参基因及构建方法，内参基因其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示；构建方法，如下：利用高加索三叶草7个组织转录组数据，选择7个表达稳定的内参基因，同时选用在三叶草属中常用的1个传统内参基因作为对照；将上述候选内参基因进行引物设计，对每个cDNA进行常规PCR扩增，得到引物的扩增效率和扩增到达阈值的循环数；对获得的数据进行内参基因稳定性评估分析，最终筛选到特定试验条件下最合适的内参基因和内参基因数该内参基因做参照物用于检测高加索三叶草基因表达水平变化，用于校正上样量和上样过程中存在的试验误差，保证实验结果的准确性。
