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[发明专利]人β-NGF的重组表达载体及含该载体的重组细胞株-CN201310016022.2有效
发明人：薛博夫;马墨;丽贝卡·梅尔本;朱林 -专利权人：薛博夫
申请日： 2013-01-16 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种可稳定、高效表达人β-NGF的重组表达载体，含有该重组表达载体的重组真核细胞，以及一种生产重组人β-NGF的方法。本发明所述重组表达载体包含启动子、β球蛋白基因内含子、人β-NGF基因、内部核糖体进入位点序列和筛选标记基因，在宿主细胞中的整合、表达效率较高。含该重组表达载体的重组真核细胞表达与天然β-NGF活性相当的重组人β-NGF，且经多次传代后仍能稳定表达；所表达的β-NGF分泌到培养基中，易分离、纯化，大大降低了生产下游的难度和成本，具有很好的临床应用前景和商业价值
ngf 重组表达载体细胞株

[发明专利]在真核细胞中表达的蛋白质变体文库的制备及用于选择结合分子的用途-CN201580036157.2在审
发明人： J·麦考夫迪;M·戴森;K·帕特赫本 -专利权人：艾恩塔斯有限公司
申请日： 2015-05-01 - 公布日： 2017-04-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及产生编码结合分子(“结合物”)组库的真核细胞文库的方法，其中所述方法使用位点特异性核酸酶来靶向裂解细胞DNA，以通过内源性细胞修复机制增强结合物基因的位点特异性整合。产生真核细胞群，其中编码结合物的基因组库被整合到细胞DNA中的期望基因座(例如，基因组的基因座)以允许表达所编码的结合分子，从而产生表达不同结合物的细胞群。
真核细胞表达蛋白质变体文库制备用于选择结合分子用途

[发明专利]人源趋化因子MIP-1α或SDF-1α在真核细胞中的重组表达方法-CN201811034129.9在审
发明人：周志诚;柴梦莹 -专利权人：柴梦莹
申请日： 2018-09-05 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明公开了一种人源趋化因子MIP‑1α或SDF‑1α在真核细胞中的重组表达方法，该方法利用载体质粒pSFV2作为携带编码MIP‑1α或SDF‑1α的外源基因的载体，与包装质粒pHelper转染真核细胞后，使得外源基因表达的目的蛋白能够被修饰而具有生物活性，且采用该方法表达纯化出的目的蛋白纯度高、收率大、生理和药理活性强。
目的蛋白趋化因子真核细胞重组表达人源外源基因表达转染真核细胞包装质粒生物活性外源基因药理活性载体质粒收率修饰携带

[发明专利]用于在真核生物中调控基因表达或检测和控制DNA座位的构建体和方法-CN201280025347.0无效
发明人：克斯廷·拜斯特里奇;弗兰克·加拉多;大卫·莱恩;耐莉·杜巴里 -专利权人：国家科研中心
申请日： 2012-03-23 - 公布日： 2014-04-16 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明涉及基于来源于细菌质粒和染色体DNA的分离系统的序列的构建体，如真核表达载体、融合蛋白和编码该蛋白的多聚核苷酸；本发明还涉及用所述构建体转化或表达所述构建体的真核细胞。本发明还涉及其在调控基因表达，和/或在检测和控制真核细胞中感兴趣的基因组DNA座位的动态学、定位或代谢中的应用。
用于生物调控基因表达检测控制 dna 座位构建方法

[发明专利]用于真核细胞的全长抗体展示系统及其用途-CN201280063751.7有效
发明人： P·M·许尔斯曼;H·克内根 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2012-12-19 - 公布日： 2017-10-20 - 主分类号： C07K16/46 文献下载
摘要：本发明公开一种选择表达双特异性抗体的细胞的方法，所述方法包括步骤(a)通过用慢病毒病毒粒子群体转导，产生真核细胞群体，其中所述细胞群体的每个细胞均展示由慢病毒核酸编码并且与两种或更多种抗原或相同抗原上的两个或更多个表位特异性结合的膜结合型全长抗体，和(b)根据展示的膜结合型全长抗体的特性，从真核细胞群体选择细胞，其中慢病毒病毒粒子群体的每个慢病毒病毒粒子包含用于表达膜结合型抗体的双顺反子表达盒，所述双顺反子表达盒包含EV71‑IRES。
用于真核细胞全长抗体展示系统及其用途

[发明专利]发酵阿拉伯糖的真核细胞的代谢工程改造-CN200780036866.6有效
发明人：安东尼斯·杰若恩·阿迪瑞安·马里斯·范;雅各布斯·托马斯·普若克;汉迪瑞克·乌特尔·威塞林克;强汉斯·皮埃特·范迪肯;亚伦·阿迪瑞安·文科勒;强汉斯·汉迪瑞克·温迪·德 -专利权人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司
申请日： 2007-10-01 - 公布日： 2009-09-02 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明涉及表达下述多核苷酸序列的真核细胞，所述序列编码araA、ara B和ara D酶，从而这些核苷酸序列的表达赋予细胞使用L-阿拉伯糖和/或将L-阿拉伯糖转化为L-核酮糖和/或5-磷酸木酮糖和/或转化为期望的发酵产物如乙醇的能力任选地，该真核细胞还能够将木糖转化为乙醇。
发酵阿拉伯糖真核细胞代谢工程改造

[发明专利]与真核细胞调节剂相关的方法和组合物-CN201380057193.8有效
发明人：张洪凯;伊恩·A·威尔森;理查德·A·勒纳 -专利权人：斯克利普斯研究院
申请日： 2013-08-16 - 公布日： 2018-05-29 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：一种用于鉴定真核细胞的蛋白调节剂的方法，其通过在真核细胞内表达潜在激动剂的组合库，然后直接选择靶分子的激动剂来实施。一些方法涉及共同培养表达潜在激动剂的组合库的细胞以及第二细胞，然后选择调节第二细胞的表型或调节在第二细胞中期望的细胞应答反应的剂。优选地，所述激动剂是被引入到初始细胞并在其中表达的抗体，例如激动剂抗‑EpoR、抗‑TpoR或G‑CSFR抗体。本发明还公开了用于从组合抗体库选择能调节细胞表型的双特异性抗体的方法。
激动剂细胞真核细胞组合库抗体双特异性抗体蛋白调节剂组合抗体库细胞表型细胞应答直接选择靶分子调节剂表型优选期望引入

[发明专利]一种基于等位基因敲入的微管标记方法、及其标记的真核细胞和应用-CN202310017541.4在审
发明人：顾宏周;夏凯;张灿钰;周末;陈黎曼 -专利权人：上海前瞻创新研究院有限公司
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供基于等位基因敲入的微管蛋白标记方法，包括以下步骤：(1)提供针对真核细胞TUBA1B基因的CRISPR/Cas9靶向切割系统；(2)提供两条针对该真核细胞TUBA1B基因的单链DNA(ssDNA)同源修复模板；(3)将CRISPR/Cas9靶向切割系统和两条ssDNA同源修复模板按比例转染到真核细胞中，得到同源重组了该标记蛋白基因的真核细胞；以及(4)向转染细胞中添加两种抗生素进行筛选，筛选后获得该等位基因敲入的微管蛋白标记的阳性真核细胞；还提供了该方法标记了微管蛋白的真核细胞。本发明的标记方法可真实地反应细胞内微管蛋白最自然的表达和分布情况，可实现活细胞、长时间、长细胞代数、稳定的原位微管蛋白示踪。且能降低背景干扰，保证不同实验结果之间的一致性。
一种基于等位基因微管标记方法及其真核细胞应用

[发明专利]人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白及其制备方法与应用-CN201811144954.4有效
发明人：李钰;窦鹏;慈彦鹏;张丹丹 -专利权人：哈尔滨工业大学
申请日： 2018-09-29 - 公布日： 2020-01-24 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白及其制备方法与应用，涉及的是人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白制备技术及其应用方法。首先提取正常人胚肾HEK293细胞的总RNA，通过逆转录PCR的方法合成cDNA，用特异性引物扩增所述的人C1ORF109基因编码序列，进而将该序列插入到真核细胞表达载体，得到含有所述人源调控细胞死亡的蛋白编码序列的重组表达载体，将该重组表达载体导入真核细胞，通过免疫印迹的方法确认了所述的人源调控细胞死亡的重组蛋白的表达。
细胞死亡人源重组蛋白调控制备重组表达载体真核细胞表达载体应用蛋白编码序列基因编码序列特异性引物逆转录PCR 免疫印迹真核细胞总RNA 扩增胚肾合成

[发明专利]一种可在真核细胞高效表达牛menin的表达载体-CN201510145952.7在审
发明人：师科荣;刘学;王中华;李洪辉;杜红霞;岳书俭;殷彬;林雪彦;侯秋玲 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2015-03-31 - 公布日： 2015-06-10 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及动物遗传学和动物分子细胞生物学，提供了一种可在真核细胞高效表达牛menin的表达载体，为进一步研究该基因在细胞中的功能及其作用机理提供了必要的工具和手段。该基因在机体多个器官都有表达，对于调节机体代谢起到了重要的调节作用。研究该基因在特定组织或细胞类型中的功能和调控代谢途径，通过构建真核表达载体使其在特定条件下过量表达是一种必不可少的技术手段，构建牛MEN1基因(以下称bMEN1)的高效真核细胞表达载体将来可用于牛各组织器官机体代谢疾病提供必要的前期研究
一种真核细胞高效表达 menin 载体

[发明专利]基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法-CN201611020358.6有效
发明人：张智英;邵斯旻;徐坤;韩芙蓉;沈俊岑;白义春 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2016-11-14 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法，包括由插入有目的基因靶位点的报告基因I表达盒、完整的报告基因II表达盒以及报告基因I的截短序列构建的双荧光报告系统表达载体，本发明所述基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统利用并模拟真核细胞内的不同修复机制对报告系统中的相应的荧光表达盒进行修复，可通过流式细胞仪对双荧光报告系统表达载体两种报告基因的表达进行量化，在载体水平一次性报告检测真核细胞中某一确定基因位点HR、SSA和NHEJ的修复效率。
基于人工核酸酶可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法

[发明专利]一种真核细胞启动子CF1及其在细胞基因表达中的应用-CN202210710505.1有效
发明人：黄浩;杜君卿;邱猛生 -专利权人：浙江欧赛思生物科技有限公司
申请日： 2022-06-22 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种真核细胞启动子CF1及其在细胞基因表达中的应用，包括具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；本发明设计的启动子具有序列长度更短，具有更强的驱动位于其下游的目标基因表达的能力，在各种真核细胞表达体系中，可以用来提高目标蛋白的表达水平；尤其是在用于对容纳核酸序列长度有限制的各种病毒载体基因递送系统时，CF1启动子在提高外源基因表达水平的同时，可以容纳更长的外源基因片段的插入。该发明可应用于对包括单克隆抗体、细胞因子在内的各种蛋白的表达工艺的提升。
一种真核细胞启动子 cf1 及其细胞基因表达中的应用

[发明专利]大潜在转化生长因子-β复合物及其有用结构物的生产方法-CN93119157.2无效
发明人：卡尔-亨里克·赫尔丁;宫园浩平;帕斯卡尔·科洛塞弟;乌尔夫·赫尔曼;大桥秀哉;石井保之 -专利权人：麒麟麦酒株式会社;路德维格癌症研究所
申请日： 1993-10-26 - 公布日： 1994-06-29 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种将编码LTBP和前-TGF-β的核酸序列引入到真核细胞来生产重组大潜在TGF-β的方法，及将LTBP的DNA序列引入到一个表达前-TGF-β的真核细胞来生产重组LL-TGF-β的方法。本发明揭示一种构建LTBP表达质粒pDSVE2-BP和将该质粒转染到CHO细胞，即CHOT23-7-11细胞的方法在此做了特别的说明。将最高水平表达大潜在TGF-β复合体的克隆筛选出来用于纯化LL-TGF-β(LTB3-1克隆)。
潜在转化生长因子复合物及其有用结构生产方法

[发明专利]一种基于重组表达流感病毒血凝素的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法-CN201010297219.4有效
发明人：王革非;李康生;李蕊 -专利权人：汕头大学医学院
申请日： 2010-09-28 - 公布日： 2011-04-20 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种基于重组表达流感病毒血凝素的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法。本发明检测方法是将流感病毒血凝素基因克隆后转染真核细胞，使真核细胞表面重组表达流感病毒血凝素蛋白，该蛋白与待检样品中的流感病毒血凝素抗体结合，发生凝集反应，根据是否发生凝集反应来检测待检样品中的流感病毒抗体
一种基于重组表达流感病毒血凝素真核细胞凝集反应抗体检测方法

[发明专利]细胞内生基因活性化的优化方法-CN98127178.2有效
发明人： K·豪诺德;T·浩特史克;A·斯特恩 -专利权人：伯伦格曼海姆有限公司
申请日： 1998-12-01 - 公布日： 2000-01-12 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及细胞内生基因表达的优化方法。首先,涉及一种改变内生存在于真核细胞中的目标基因的表达的方法,其中,借助于同源重组作用,把一种异源表达控制序列引入到细胞的基因组中,而且该方法中还包括使插入的外来DNA的、部位特异重组酶介导的切除,以及用其他的异源表达控制序列或/和扩增基因代替之;本发明还涉及把一个或多个在其上结合存在一个激活因子蛋白质或一个激活蛋白质复合物例如一个缺氧诱导因子(HIF)上的核酸序列通过同源重组引入到一个真核细胞的基因组内,以便改变目标基因的表达本发明还涉及一个通过对报道基因表达的确定,测定在5’部位或3’部位上未编码的核酸片段对目标基因表达的影响的方法。此外,本发明还涉及一种含有重组酶—目标序列的、DHFR－负真核细胞的制备方法,以及插入在该重组酶—目标序列中的核酸序列的表达。
细胞内基因活性优化方法