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[发明专利]一种NAMPT酶生产菌及其应用-CN202110847796.4有效
发明人：岳明瑞;谢沛;曹华杰;郭永胜;滕义卫 -专利权人：新泰市佳禾生物科技有限公司;汕头市佳禾生物科技有限公司
申请日： 2021-07-27 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种NAMPT酶生产菌及其应用，所述NAMPT酶生产菌中含有表达NAMPT酶的重组表达载体和表达PARP1蛋白的重组表达载体。其构建方法包括以下步骤：将编码NAMPT的核苷酸片段连入质粒pLLP‑ompA，获得第一重组表达载体；将编码PARP1的核苷酸片段连入质粒pET‑42a(+)，获得第二重组表达载体；再将获得的第一重组表达载体和第二重组表达载体导入到宿主菌中本发明将NAMPT酶的重组表达载体和PARP1蛋白的重组表达载体导入到宿主菌中，获得了NAMPT酶生产菌，通过PARP1蛋白的少量表达，显著提高了NAMPT酶的表达量和活性。
一种 nampt 生产及其应用

[发明专利]一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统-CN201410721269.9有效
发明人：蒋湘宁;陈博雯;盖颖;王文棋;张春晓 -专利权人：北京林业大学;蒋湘宁;盖颖
申请日： 2015-01-05 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p‑FRT、p‑loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体本发明的克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导
一种双重组位点双向启动植物表达载体系统

[发明专利]重组羧肽酶G2表达载体及制备重组羧肽酶G2的方法-CN200910103526.1有效
发明人：李树刚;张伟;于廷和;辛渝;但国平;刘杰;李晓丽;马峰;曹莉君;龚会英 -专利权人：重庆科润生物医药研发有限公司
申请日： 2009-04-03 - 公布日： 2009-08-19 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了重组羧肽酶G2表达载体及制备重组羧肽酶G2的方法，该重组羧肽酶G2表达载体包含羧肽酶G2基因片段和表达载体，其中表达载体为PET-30a-c(+)。本发明还提供上述重组羧肽酶G2表达载体的构建方法以及包含该重组羧肽酶G2表达载体的表达系统，以及利用该表达系统制备重组羧肽酶G2的方法。本发明所述的重组羧肽酶G2表达系统产物具有天然结构和生物活性，无需变性和复性；培养基简单、价廉，生产成本低，产率高等优点。
重组羧肽酶 g2 表达载体制备方法

[发明专利]人FSH的重组表达载体、重组细胞株及重组人FSH的制备方法-CN201710812413.3有效
发明人：薛博夫;马墨;李盼姣;白孟飞 -专利权人：深圳市深研生物科技有限公司
申请日： 2017-09-11 - 公布日： 2020-05-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及人FSH的重组表达载体、重组细胞株及重组人FSH的制备方法。本发明提供的表达载体为分泌型表达载体，与宿主细胞基因组的整合效率较高，包含该重组表达载体的重组细胞株分泌表达FSH蛋白的效率也较高，其分泌效率大于10pg/细胞/天；另外，本发明重组表达载体采用一个启动子同时诱导FSH基因和筛选标记基因转录、并使用IRES启动后者翻译的方式，使得细胞耐药性和表达量高度统一，因此，当使用该重组表达载体转染宿主细胞时，筛选出阳性表达细胞株的概率较大，所得重组表达细胞株在筛选条件下可持续、稳定表达FSH蛋白，细胞系经多次传代后，仍能高效表达FSH蛋白。
fsh 重组表达载体细胞株制备方法

[发明专利]重组抗体的表达载体及其表达感兴趣重组抗体的制备方法-CN202310082514.5在审
发明人：冷毅斌;兰萍;杜正伟;易秋分;梅冬意 -专利权人：武汉戴安生物技术有限公司
申请日： 2023-02-08 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组抗体的表达载体，具体为含突变型hCMV启动子、chimericIntron、WPRE、BGHpolyA终止子的表达元件的表达载体pDAI，同时还公开了一种重组抗体的表达载体表达感兴趣重组抗体的制备方法本发明属于生物工程技术领域，本发明提供的重组抗体的表达载体及其表达感兴趣重组抗体的制备方法，提供了一种含突变型hCMV启动子，chimericIntron，WPRE，BGHpolyA终止子的表达元件的表达载体pDAI，及采用连接抗体轻链和重链的P2A序列，用pDAI制备感兴趣重组抗体表达载体的方法。
重组抗体表达载体及其感兴趣制备方法

[发明专利]一种遍在染色质开放表达元件、重组表达载体及其制备方法与应用-CN202311063633.2在审
发明人：张晶晶;刘昌娥;李艳梅;马开利;李琦涵;冯琳;彭晓武;高冬秀;曾烽原 -专利权人：威瑞生物科技（昆明）有限责任公司;山东威高利彤生物制品有限公司
申请日： 2023-08-23 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及一种遍在染色质开放表达元件、重组表达载体及其制备与应用，属于基因工程技术领域，本发明先构建了遍在染色质开放表达元件，并将该元件插入pCDNA3.1载体的CMV启动子之前，获得了一种包含遍在染色质开放表达元件的重组表达载体；所得的重组表达载体可显著提高EGFP基因序列的荧光表达强度，同时能提高哺乳动物下游目的蛋白在重组表达载体中的表达水平，为哺乳动物提供高效的重组表达系统。
一种染色质开放表达元件重组载体及其制备方法应用

[发明专利]一种植物多分体病毒载体的开发和应用-CN201811547209.4在审
发明人：王颖;姜宁;张超;张宗英;韩成贵;于嘉林;李大伟;王献兵;张永亮 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C12N15/83 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物多分体病毒载体的开发和应用。本发明提供了成套重组病毒载体，包括表达BN1的重组载体和表达BN2的重组载体；所述表达BN1的重组载体为将BNYVV基因组的RNA1全长CDNA序列替换双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA1；所述表达BN2的重组载体为将BNYVV基因组的RNA2全长CDNA序列替换所述双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA2。本发明采用的多分体病毒表达载体能在植物同一个细胞内同时表达多个蛋白；在植物体内表达量比较高，周期短，并且可以系统侵染。
重组载体多分体全长CDNA序列双元表达载体多克隆位点病毒载体基因组种植物替换病毒病毒表达载体重组病毒载体体内表达侵染应用蛋白细胞开发

[发明专利]人β-NGF的重组表达载体及含该载体的重组细胞株-CN201310016022.2有效
发明人：薛博夫;马墨;丽贝卡·梅尔本;朱林 -专利权人：薛博夫
申请日： 2013-01-16 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种可稳定、高效表达人β-NGF的重组表达载体，含有该重组表达载体的重组真核细胞，以及一种生产重组人β-NGF的方法。本发明所述重组表达载体包含启动子、β球蛋白基因内含子、人β-NGF基因、内部核糖体进入位点序列和筛选标记基因，在宿主细胞中的整合、表达效率较高。含该重组表达载体的重组真核细胞表达与天然β-NGF活性相当的重组人β-NGF，且经多次传代后仍能稳定表达；所表达的β-NGF分泌到培养基中，易分离、纯化，大大降低了生产下游的难度和成本，具有很好的临床应用前景和商业价值
ngf 重组表达载体细胞株

[发明专利]一种表达LL-37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用-CN202010313254.4有效
发明人：金万洙;张瀚林;蒋笑笑;郑爱华 -专利权人：中国科学院动物研究所
申请日： 2020-04-20 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供了一种表达LL‑37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用，属于基因工程技术领域；所述重组表达载体的构建用骨架质粒为PNZ8149；所述重组表达载体中插入有融合基因；所述融合基因的核苷酸序列如本发明的重组表达载体能够在乳酸乳球菌中高效表达，表达得到的LL‑37能够有效抑制SARS冠状病毒和SARS‑CoV2冠状病毒。本发明还提供了一种包含上述方案所述重组表达载体的重组乳酸乳球菌。通过本发明的重组乳酸乳球菌能够将抗病毒多肽药物LL‑37以口服的形式输入人体，抗病毒效果好、生产成本低。
一种表达 ll 37 多肽重组载体乳酸球菌抗病毒药物构建方法应用

[发明专利]一种重组酵母菌及其制备方法-CN201010131757.6有效
发明人：邱并生;牛振东;宋浩雷 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2010-03-23 - 公布日： 2010-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组酵母菌及其制备方法。该方法包括如下步骤：(1)将表达载体I转入宿主酵母菌中，得到转入所述表达载体I的重组酵母菌，记作酵母菌A；(2)将表达载体II转入所述酵母菌A中，得到转入所述表达载体I和所述表达载体II的重组酵母菌；将所述转入所述表达载体I和所述表达载体II的重组酵母菌记作酵母菌B。实验证明，用本发明方法制备得到的重组酵母菌中不携带任何抗性基因；转入的表达载体拷贝数多，可达5-50个拷贝，且均整合到宿主菌的基因组中；用本发明的重组菌表达的外源基因产品成为安全的食品级产品。因此，本发明的重组酵母菌及其制备方法适于推广使用。
一种重组酵母菌及其制备方法

[发明专利]重组鲫鱼MBSP表达菌株及其构建方法-CN201210333208.6有效
发明人：杜翠红;曹敏杰;韩龙 -专利权人：集美大学
申请日： 2012-09-11 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供一种重组鲫鱼MBSP表达菌株，所述表达菌株以巴斯德毕赤酵母GS115为宿主菌，并含有重组酵母表达载体pPIC9K-MBSP；且该重组酵母表达载体pPIC9K-MBSP通过将鲫鱼MBSP基因插入酵母表达载体pPIC9K中构建；并提供了该重组鲫鱼MBSP表达菌株的构建方法。本发明所构建的表达菌株可分泌表达重组鲫鱼MBSP，且具有表达量高、构建工艺简单、生产成本较低的优点。
重组鲫鱼 mbsp 表达菌株及其构建方法

[发明专利]提高根农杆菌介导的植物转化频率的方法及其专用载体-CN200510115089.7无效
发明人：陈蕾;徐建勇 -专利权人：北京北方杰士生物科技有限责任公司
申请日： 2005-11-28 - 公布日： 2006-06-28 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高根农杆菌介导的植物转化频率的方法及其专用载体。该专用载体是在原核细胞表达载体的多克隆位点插入根农杆菌的virA基因、virG基因和virE基因，得到的可在根农杆菌中过量表达virA、virG和virE的重组表达载体。本发明巧妙地将virA、virG和virE基因插入原核细胞表达载体，构建过量表达virA、virG和virE基因的重组表达载体，再将该重组表达载体转化根农杆菌，得到过量表达virA、virG和virE基因的重组根农杆菌菌株，该重组根农杆菌菌株浸染植物的能力增强，与出发根农杆菌菌株相比，可提高转基因植物的转化效率及转化频率。
提高杆菌植物转化频率方法及其专用载体

[发明专利]一种重组TEV蛋白酶表达载体、表达系统及应用-CN202010772885.2在审
发明人：朱国飞;马超;刘丽萍;余凯;周安 -专利权人：贵州理工学院
申请日： 2020-08-04 - 公布日： 2020-10-20 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，尤其一种重组TEV蛋白酶表达载体、表达系统及应用。所述重组TEV蛋白酶表达载体是将His‑TEVp重组蛋白插入pET‑21a载体得到。所述重组TEV蛋白酶表达系统包括将所述重组TEV蛋白酶表达载体导入大肠杆菌得到重组TEV蛋白酶表达菌株。His‑TEVp重组蛋白是将四点突变型TEVp基因插入到pET‑21a质粒得到的重组质粒pET‑21a‑TEVp产生。利用TEV蛋白酶表达系统表达TEV蛋白酶，再经提取和纯化，可获得大量高纯度的TEV蛋白酶；TEV蛋白酶的纯度可达到90％以上；生产菌液中TEVp的浓度可达1.42mg/ml，每升菌液可得到超过40mg的高纯度本发明提供的重组TEV蛋白酶表达载体、表达系统，为TEV蛋白酶的推广应用奠定了基础。
一种重组 tev 蛋白酶表达载体系统应用

[发明专利]一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体-CN201710038807.8有效
发明人：杨国宇;韩莹倩;王月影;李和平;王江;郭豫杰;郭婉莹;苏冰倩;褚贝贝 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2017-01-19 - 公布日： 2020-04-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
一种促进蛋白可溶性表达提高重组载体

[发明专利]一种串联表达小干扰RNA重组慢病毒载体的构建方法-CN200910062850.3无效
发明人：郭德银;柳叶;陈宇;申彦森 -专利权人：武汉大学
申请日： 2009-06-26 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种串联表达siRNA重组慢病毒载体的构建方法，主要步骤如下：(1)单靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.化学合成寡核苷酸链；b.有义链、反义链退火；c.退火片段连接至载体(2)双靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.利用PCR从单靶点的siRNA重组慢病毒载体中扩增U6/H1-siRNA表达框；b.将表达框连接至经XhoI酶切的单靶点的siRNA重组慢病毒载体；c.酶切鉴定筛选表达框正向插入的克隆；(3)多靶点的串联siRNA重组慢病毒载体的构建：将U6/H1-siRNA表达框插入至双靶点的siRNA重组慢病毒载体，构建出三靶点的siRNA重组慢病毒载体，同法可获得多靶点串联的siRNA重组慢病毒载体本发明适用于同时表达针对多个靶基因的siRNA，适用于长期沉默多个靶基因的研究。
一种串联表达干扰 rna 重组病毒载体构建方法

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