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[发明专利]一种含杆状病毒遗传元件的重组蛋白及其制备方法-CN202310804679.9在审
发明人：王营;华权高;易汪雪;茹志莹 -专利权人：武汉华美生物工程有限公司
申请日： 2023-06-30 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种含杆状病毒遗传元件的重组蛋白及其制备方法；所述重组蛋白的核苷酸序列包括非编码顺式作用元件包括：增强子、早期启动子、晚期启动子和信号肽，信号肽设于重组蛋白中结构基因的5’端，晚期启动子设于信号肽的5’端，早期启动子设于晚期启动子的5’端，增强子设于晚期启动子的5’端；增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；早期启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；可以通过早期启动子尽快启动重组蛋白的表达，避免昆虫细胞晚期表达几丁质酶影响该昆虫杆状病毒分泌外源蛋白的表达，提高昆虫杆状病毒表达载体分泌外源蛋白的产量。
一种杆状病毒遗传元件重组蛋白及其制备方法

[发明专利]视网膜疾病的基因治疗-CN202280020880.1在审
发明人：乌韦·D·斯塔尔兹 -专利权人：格雷菲克斯公司
申请日： 2022-02-14 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：病毒载体包含转基因构建体。在一些实施方案中，转基因构建体是包含启动子元件、长于10kb的视网膜基因的开放阅读框和终止子序列的DNA序列。在其他实施方案中，转基因构建体是长于10kb的视网膜基因的DNA片段。
视网膜疾病基因治疗

[发明专利]一种靶向CD38和CS1抗原的并联嵌合抗原受体T细胞及其制备方法和应用-CN202310852004.1在审
发明人：唐东起;张文;刘江;宋晓云 -专利权人：山东大学第二医院
申请日： 2023-07-12 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：一种靶向CD38和CS1抗原的并联嵌合抗原受体T细胞及其制备方法和应用合成出能同时识别CD38抗原和CS1抗原的并联抗CD38‑CS1的胞外域，连带其他CAR共有的铰链区、共刺激区域等得到靶向CD38和CS1的CAR嵌合受体，制成慢病毒载体质粒，并将其感染T细胞，形成能同时识别CD38和CS1两种抗原的CAR‑T细胞(并联抗CD38‑CS1 CAR‑T细胞和并联抗CS1‑CD38 CAR‑T细胞)，有效避免了由于抗原逃逸导致的肿瘤复发；并且与单特异性CAR‑T相比，明显提高了肿瘤的杀伤效率。本发明的同时靶向CD38和CS1的CAR嵌合受体的慢病毒载体质粒，在制备过程中经过对CAR序列不断改良，精简其长度，并经过效果验证，得到了靶向CD38和CS1的并联双CAR的序列。
一种靶向 cd38 cs1 抗原并联嵌合受体细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种T细胞向肿瘤迁移的负调控因子的体外筛选、鉴定方法-CN202210133750.0有效
发明人：刘夏;冯新华;汪静雯;牟成林 -专利权人：浙江大学杭州国际科创中心
申请日： 2022-02-10 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供一种免疫细胞向肿瘤迁移的负调控因子的体外筛选、鉴定方法。为了寻找能够驱动T细胞向肿瘤迁移的负调控基因，本发明的体外筛选、鉴定方法包括：步骤1、采用SLICE技术对免疫细胞进行基因组编辑；步骤2、采用嘌呤霉素puro筛选稳定表达的经基因组编辑的免疫细胞并进行扩增培养；步骤3、将扩增培养后的经基因组编辑的免疫细胞在驱动剂的作用下进行Transwell迁移实验，分别收集Transwell上室和下室中的细胞并进行基因测序分析。本发明适用于趋化因子、肿瘤细胞培养上清及肿瘤对免疫细胞的驱动作用，适用于各种免疫细胞向肿瘤迁移的负调控因子的筛选或鉴定，将大大推进抗肿瘤免疫治疗的发展。
一种细胞肿瘤迁移调控因子体外筛选鉴定方法

[发明专利]过表达牛TUSC5a和TUSC5b基因重组慢病毒的构建方法及其应用-CN202210587879.9有效
发明人：周扬;夏晗;李凡;彭玲伟;杜玉琴;滑国华;杨利国;郭爱珍 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-05-27 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了过表达牛TUSC5a和TUSC5b基因重组慢病毒的构建方法及其应用，过表达重组慢病毒作为具有侵染性的工具或作为人工制剂可调控脂肪沉积，TUSC5a的表达显著促进脂肪合成与积累，TUSC5b的表达显著抑制脂肪合成与积累。其构建方法包括(1)TUSC5a、TUSC5b序列克隆的步骤；(2)使用内切酶将携带HIS标签的TUSC5a和TUSC5b序列分别与慢病毒载体双酶切，胶回收后产物经连接酶连接，得到过表达重组慢病毒的步骤；(3)过表达重组慢病毒验证的步骤；(4)过表达重组慢病毒包装的步骤。本发明对正确认识TUSC5对脂肪沉积的调控网络深入到剪接异构体水平，包装好的两种TUSC5剪接异构体慢病毒可作为人工调控肉牛脂肪沉积能力的工具，实现对脂肪沉积能力的剂量调控。
表达 tusc5a tusc5b 基因重组病毒构建方法及其应用

[发明专利]用于治疗杜兴肌营养不良的组合物和方法-CN201980040365.8有效
发明人： H·斯特德曼 -专利权人：宾夕法尼亚州大学信托人
申请日： 2019-04-16 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本文描述了肌养蛋白或肌养蛋白相关蛋白的三重剪接突变体及其用于治疗杜兴肌营养不良的方法。还提供了病毒载体，其包含编码在指导其表达的调节元件控制下的三重剪接突变肌养蛋白或肌养蛋白相关蛋白的核酸。还提供了组合物，其含有配制用于递送给人患者的这种病毒载体。
用于治疗杜兴肌营养不良组合方法

[发明专利]通过IGFBP5介导动脉粥样化的动物模型及建立方法-CN202011033316.2有效
发明人：相奥琪;梁国朵;余琦;张云婷 -专利权人：西安医学院
申请日： 2020-09-27 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明公开了通过IGFBP5介导的动脉粥样硬化动物模型及建立方法，所述动物模型按照以下步骤进行：步骤1、构建腺相关病毒表达载体AAV‑IGFBP5；步骤2、将步骤1得到的所述腺相关病毒载体通过肌肉注射到ApoE‑/‑小鼠中，注射后采用高脂饲料喂养6周即得到本发明的动物模型。本发明模型建立过程简便、成功率高、结果稳定可靠，节约了饲养实验动物的时间，还避免了模型构建失败的后果，并且免疫原性低，安全系数更高。本发明建立的动物模型在动脉粥样硬化的病因学、病理学、药物筛选、临床诊断和治疗等研究中具有重要的实际应用价值，可广泛推广。
通过 igfbp5 动脉粥样化动物模型建立方法

[发明专利]一种慢病毒转染技术构建CD226分子高表达的THP-1细胞系的方法-CN202310884453.4在审
发明人：陈丽华;唐康;侯永利;秦琪;李娟;姜媛;刘睿言;王亚珍;郭紫婵 -专利权人：中国人民解放军空军军医大学
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：一种慢病毒转染技术构建高水平表达CD226分子的THP‑1细胞系的方法。CD226分子已经被证明在巨噬细胞功能调控中发挥重要作用，为了更好地观测CD226分子在人单核/巨噬细胞发挥功能中的作用，本发明采用慢病毒转染技术构建了稳定高水平表达CD226分子的THP‑1细胞系，该细胞系可实现CD226分子在该细胞中的高水平表达，促进THP‑1细胞的活化，增强THP‑1细胞表面抗原提呈分子的表达水平，调控其吞噬能力；另一方面，将高表达CD226分子的THP‑1细胞进行GFP荧光标记，使该细胞系细胞迁移水平提高的同时，实现对该细胞系细胞迁移轨迹的实时记录。
一种病毒转染技术构建 cd226 分子表达 thp 细胞系方法

[发明专利]携带并表达IL-27的肿瘤特异性T淋巴细胞的制备方法-CN202210406907.2在审
发明人：丁苗;潘秋辉;马纪 -专利权人：上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心
申请日： 2022-04-07 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/869 文献下载
摘要：本发明公开了一种携带并表达IL‑27的肿瘤特异性T淋巴细胞的制备方法，包括：S1：PCR扩增表达IL‑27的基因，插入载体质粒中，获得表达IL‑27的重组表达质粒；S2：将S1获得的重组表达质粒与包装质粒混合后转染包装病毒，得到携带并表达IL‑27的逆转录病毒；S3：将S2得到的逆转录病毒感染分离获得的T淋巴细胞，得到携带并表达IL‑27的肿瘤特异性T淋巴细胞。本发明构建了携带并表达IL‑27的肿瘤特异性T淋巴细胞，证实了靶向肿瘤的转基因T淋巴细胞递送IL‑27到肿瘤并促进肿瘤免疫治疗的可行性，避免了使用现有的提高体内IL‑27表达水平来治疗肿瘤的AAV‑IL‑27系统给药所可能带来的不可预料的副作用，为临床肿瘤免疫治疗开发了一条新途径。
携带表达 il 27 肿瘤特异性淋巴细胞制备方法

[发明专利]反转录病毒载体-CN202280014096.X在审
发明人：黛博拉·吉尔;斯蒂芬·海德 -专利权人： IP2IPO创新有限公司
申请日： 2022-02-25 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明涉及反转录病毒基因转移载体，尤其慢病毒载体，其经来自呼吸道副黏液病毒之血球凝集素‑神经胺糖酸酶(HN)及融合(F)蛋白假型化，包含启动子及转殖基因；及其制备方法。本发明亦关于该等载体在基因疗法中之用途，尤其用于治疗呼吸道疾病，诸如囊肿性纤维化(CF)。
转录病毒载体

[发明专利]用于治疗癌症的唾液酸酶的病毒递送-CN202280015793.7在审
发明人：海因茨•卢布利;娜塔莉亚•罗德里格斯•曼图阿诺 -专利权人：巴塞尔大学
申请日： 2022-02-18 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明涉及腺病毒相关病毒，其包含流感衍生的神经氨酸酶转基因，该腺病毒相关病毒单独使用或与免疫检查点抑制剂一起使用来治疗被诊断出患有实体癌的患者。
用于治疗癌症唾液酸病毒递送

[发明专利]一种新型溶瘤腺病毒载体及其治疗实体瘤的方法-CN202310103598.6在审
发明人：谭业平;叶建刚;郑惠;邹海望 -专利权人：武汉金益肽生物有限公司
申请日： 2023-02-13 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明属于溶瘤腺病毒治疗技术领域，公开了一种新型溶瘤腺病毒载体，包括一种叙利亚仓鼠TERT启动子核苷酸序列和一种IRES下游编码的白介素12B+A核苷酸序列，中间用Linker连接的核苷酸序列；还公开了一种新型溶瘤腺病毒载体治疗实体瘤的方法，包括如下步骤：构建溶瘤腺病毒载体，分别合成hSurvivin‑E3A、hamsterEnhancerTERTDNA片段，其5'端和3'端分别带酶切位点Xbal和EcoRI，进一步发明为白介素12B‑A多肽与HER2跨膜区氨基酸融合，B链和A链之间用2A连接，通过将白介素12A锚定在肿瘤细胞表面，A、B链通过二硫键而成二聚体，显示出良好的生物活性，更进一步将白介素12局限在肿瘤区域，从而确保了其安全性和有效性。
一种新型溶瘤腺病毒载体及其治疗实体方法

[发明专利]包含微小RNA识别元件的CMV载体-CN202310470923.2在审
发明人：杰伊·内尔松;斯科特·汉森;米根·H·汉考克;路易斯·皮克尔;克劳斯·弗鲁赫 -专利权人：俄勒冈健康与科学大学
申请日： 2016-11-20 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/869 文献下载
摘要：本发明公开了包含异源抗原和微小RNA识别元件的重组CMV载体，以在源自髓样细胞的微小RNA，活性UL128蛋白和活性UL130蛋白存在下沉默CMV基因的表达。本发明还公开了包含异源抗原和微小RNA识别元件的重组CMV载体，以在源自髓样细胞的微小RNA，无活性UL128蛋白和无活性UL130蛋白存在下沉默CMV基因的表达。本发明还公开了使用这些载体产生非常规免疫应答的方法。这种免疫应答的特征在于产生主要受MHC‑II限制的CD8+T细胞应答。
包含微小 rna 识别元件 cmv 载体

[发明专利]一种抑制炎症与基因编辑同时进行的基因载体-CN202311151764.6在审
发明人：陈永昌;杨娇;刘小平;肖浦豪;刘杰;孙文杰 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2023-09-07 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明公开了一种抑制炎症与基因编辑同时进行的基因载体，所述基因载体包含插入3'‑UTR编码区中的一个或多个编码序列；其中所述一个或多个编码序列独立地编码：shRNA序列和CRISPR/Cas9 sgRNA序列；所述shRNA序列和CRISPR/Cas9 sgRNA序列分别使用不同的启动子进行控制，所述shRNA降低NF‑κB/P65的mRNA表达，sgRNA用于编辑Dmd基因50号外显子。本发明抑制炎症与基因编辑同时进行，能够提高基因编辑效率，显著改善杜氏肌营养不良症。
一种抑制炎症基因编辑同时进行载体

[发明专利]一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体及其应用-CN202111310452.6有效
发明人：吴阳;徐富强;王杰;王起恬;金鼎瑜 -专利权人：中国科学院精密测量科学与技术创新研究院
申请日： 2021-11-05 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体及其应用。所述rAAV载体ITR核心表达元件由广谱强启动子CMV、IgG1重链分泌信号肽序列、IgG1重链编码区、连接多肽编码序列、IgG1轻链分泌信号肽序列、IgG1轻链编码区和人血清白蛋白多聚腺苷酸序列构成。通过上述rAAV载体上的酶切位点可以方便快速地对重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）进行操作。利用包装获得的抗体IgG1‑rAAV病毒感染体外培养的HEK293T细胞或C57小鼠等，能够表达具有不同抗原识别活性的各种抗体IgG1。
一种用于表达抗体 igg1 raav 载体及其应用

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