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[发明专利]一种急性肝衰竭小鼠肝脏全免疫细胞特征图谱的绘制方法-CN201910551172.0在审
发明人：曹红翠;刘景琪;冯旭东;俞炯;潘巧玲;徐燕萍;曾浔;李兰娟 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-06-24 - 公布日： 2019-10-15 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及肝脏全免疫细胞特征图谱研究，旨在提供一种急性肝衰竭小鼠肝脏全免疫细胞特征图谱的绘制方法。包括步骤：小鼠肝脏全免疫细胞的提取；质谱流式抗体的标记；免疫细胞抗体染色；质谱流式分析。本发明能够在保证细胞纯度的基础上，尽可能的去除肝脏实质细胞，分离出高得率的小鼠肝脏全免疫细胞。本发明分离的小鼠肝脏全免疫细胞得率在高于研磨法得率，且细胞活率大于传统研磨法。本发明根据肝脏、肺脏中免疫细胞特点，创新性地使用试剂盒以稳定金属同位素与抗体连接，同时基于通道干扰最小原则设计质谱流式通道，实现全面小鼠对肝脏全免疫细胞的分类和功能进行描述，最多可同时检测43个标志物，能够观察到小鼠肝脏全免疫细胞的动态改变。
免疫细胞小鼠肝脏特征图谱得率抗体质谱肝脏急性肝衰竭研磨法流式绘制肝脏实质细胞创新性地流式分析通道干扰稳定金属细胞纯度最小原则同位素标志物试剂盒染色去除小鼠细胞分类观察检测保证研究

[发明专利]一种小鼠运动模型的建立方法-CN202110524730.1在审
发明人：王艳东;李子柔 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2021-05-14 - 公布日： 2021-08-31 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：一种小鼠运动模型的建立方法属于生物领域。这种运动模型的建立，通过设置跑步运动的参数，确保小鼠达到一定的运动量，从而得到经过运动训练的小鼠。通过数据表明，经过运动训练后的小鼠不仅能够降低体重，而且促进了其肝脏AMPK蛋白的磷酸化，抑制了肝脏脂肪合成和糖原合成基因的表达，表现出有益于肝脏健康的作用。这种运动模型有可能成为研究小鼠肝脏代谢的手段或治疗肝脏代谢相关疾病的辅助方法。
一种小鼠运动模型建立方法

[发明专利]细胞型Fas相关死亡区域蛋白样β白介素‑1转换酶抑制蛋白在治疗脂肪肝中的应用-CN201610969408.9在审
发明人：李红良;王丕晓 -专利权人：武汉大学
申请日： 2016-10-27 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：以cFLIP肝脏特异性基因敲除小鼠和cFLIP‑flox小鼠为实验对象，通过高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型，结果表明与cFLIP‑flox小鼠对比，体重明显高于同种饲料饲养的cFLIP‑flox小鼠，从小鼠肝脏大体外观、肝脏重量及肝脏/体重比以及脂质成分病理染色结果等均说明高脂饮食的cFLIP‑KO小鼠脂肪肝病变明显严重，脂质蓄积显著增加。
细胞 fas 相关死亡区域蛋白白介素转换抑制治疗脂肪肝中的应用

[发明专利]一种DHA-PS制剂、制备方法及其应用-CN202310873940.0在审
发明人：唐云平;韩涛;王骥腾;陈强;余方苗;杨最素;陈艳 -专利权人：浙江海洋大学
申请日： 2023-07-17 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： A61K31/685 文献下载
摘要：本发明涉及天然产物制剂技术领域，公开了一种DHA‑PS制剂、制备方法及其应用，该制剂的主料有效成分包括DHA‑PS，该制剂具备恢复环磷酰胺引发的小鼠肝脏损伤；本申请提供的DHA‑PS制剂制备方法制备得到的DHA‑PS片剂符合《中国药典》的各项指标；本申请提供的应用表明本申请提供的DHA‑PS制剂及制备方法应用在CTX引发肝脏损伤的小鼠中时，能够恢复小鼠的肝脏损伤作用，通过DHA‑PS制剂增加小鼠肝脏中内源性抗氧化酶的含量降低CTX氧化生成MDA途径对小鼠肝脏产生损伤的作用，通过DHA‑PS制剂增加抗炎因子降低促炎因子来抑制小鼠损伤肝脏的炎症作用。
一种 dha ps 制剂制备方法及其应用

[发明专利]一种高效获取小鼠肝脏全免疫细胞的方法-CN201910564045.4在审
发明人：曹红翠;冯旭东;俞炯;潘巧玲;刘景琪;李兰娟 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-06-24 - 公布日： 2019-09-20 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及动物细胞提取方法，旨在提供一种高效获取小鼠肝脏全免疫细胞的方法。提供一种高效获取小鼠肝脏全免疫细胞的方法，包括：对小鼠肝脏静脉灌流、冲洗后，剪碎进行解离和消化；过滤后多次离心处理，对所得沉淀进行裂解以完全去除红细胞；终止裂红后再次离心处理；弃上清，得到纯净肝脏全免疫细胞本发明能够在保证细胞纯度的基础上尽可能多地去除肝脏实质细胞，分离出高得率的小鼠肝脏全免疫细胞。与现有技术中研磨法分离的结果相比，本发明分离的小鼠肝脏全免疫细胞得率在大于5×106/只，高于研磨法得率的1～2.5×106/只，且细胞活率大于95％，大于传统研磨法细胞活率约85％。
免疫细胞小鼠肝脏高效获取研磨法得率去除红细胞肝脏实质细胞细胞动物细胞多次离心静脉灌流离心处理细胞纯度剪碎解离裂解冲洗肝脏沉淀过滤消化保证

[发明专利]一种肝脏固有和浸润巨噬细胞的分离方法-CN201911006397.4在审
发明人：季菊玲;季煜华;沈宓;李静;何理;孙玉风;陆鹏;吕秀芳 -专利权人：南通大学
申请日： 2019-10-22 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明提供一种肝脏固有和浸润巨噬细胞的分离方法，包括如下步骤：（1）建立并鉴定小鼠异体骨髓移植模型，受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.2，供体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.1；（2）IHC法和流式细胞术观察照射对肝脏实质细胞和固有巨噬细胞造成的影响；（3）原代分离照射移植组小鼠肝脏单个核细胞，根据供体和受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物，流式细胞术分选肝脏固有和浸润巨噬细胞，并描述其数量、分布和表型本发明通过照射去除CD45.2受体小鼠骨髓来源巨噬细胞，并以CD45.1供体小鼠骨髓补充替代受体小鼠骨髓细胞。从而保证骨髓来源的浸润巨噬细胞细胞和固有巨噬细胞具有不同的分子表型，达到准确高效分离肝脏不同来源巨噬细胞的效果。
巨噬细胞表面标志物受体小鼠小鼠单核巨噬细胞肝脏浸润固有巨噬细胞照射流式细胞术骨髓来源供体单核巨噬细胞肝脏实质细胞异体骨髓移植单个核细胞供体和受体分子表型高效分离骨髓细胞小鼠肝脏小鼠骨髓原代分离表型分选小鼠去除移植细胞替代补充观察保证

[发明专利]一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法-CN201910740022.4在审
发明人：孙杰;吴英杰;米艾;冉丽媛;李有为 -专利权人：大连医科大学
申请日： 2019-08-12 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： G01N21/84 文献下载
摘要：本发明涉及一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，属于脂滴检测的技术领域。本发明所述方法包括冰冻切片的制备；所述冰冻切片的制备包括组织固定步骤、组织脱水步骤、组织切片步骤；其中，所述组织固定步骤为：将新鲜的小鼠肝脏采用10％福尔马林固定3天‑10天；所述组织脱水步骤为：将固定后的小鼠肝脏先采用本发明先采用10％福尔马林对小鼠肝脏进行固定，再采用15％蔗糖溶液和30％蔗糖溶液对小鼠肝脏进行梯度脱水，有利于提高染色结果判断的准确性。
小鼠肝脏蔗糖溶液福尔马林冰冻切片组织固定组织脱水脂滴制备浸泡油红O染色染色结果梯度脱水组织切片检测新鲜改进

[发明专利]Mindin基因在肝脏缺血再灌注损伤中的应用-CN201410260263.6有效
发明人：李红良;王丕晓;朱丽华 -专利权人：武汉大学
申请日： 2014-06-11 - 公布日： 2014-09-24 - 主分类号： A61K49/00 文献下载
摘要：本发明公开一种Mindin及其抑制剂在肝脏缺血再灌注损伤中的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以Mindin基因敲除小鼠和肝细胞特异性Mindin转基因小鼠为实验对象，通过肝脏缺血再灌注损伤模型，结果表明与野生型C57小鼠对比，Mindin基因敲除小鼠肝脏坏死明显被抑制，肝功能也明显好转，而肝细胞特异性Mindin转基因小鼠的肝脏坏死则明显增加，且肝功能明显恶化。因此Mindin基因具有恶化肝功能的作用，特别是Mindin基因能够恶化肝脏缺血再灌注损伤的作用。针对Mindin的上述功能，提供Mindin可作为药物靶标筛选治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物，Mindin的抑制剂可用于制备治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物。
mindin 基因肝脏缺血灌注损伤中的应用

[发明专利]一种小鼠肝脏类器官模型及其建立方法和应用-CN202010795841.1有效
发明人：李刚;杨志英;陈泽新 -专利权人：创芯国际生物科技（广州）有限公司
申请日： 2020-08-10 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种小鼠肝脏类器官模型及其建立方法和应用，该建立方法包括以下步骤：取小鼠肝脏组织，依次进行清洗、剪切、消化及过滤处理，获得小鼠肝脏干细胞；将小鼠肝脏干细胞依次进行原代培养、增殖培养和分化培养，采用上述方法获得的肝脏类器官模型应用在药理学、药效学和毒理学分析中。本发明中肝脏类器官模型建立方法与常规方法相比，一方面大大缩短了培养周期：从取材到模型的获得，时间周期约为14～20天，而常规的培养方法耗时30天，明显提高了模型应用的可行性。另一方面，本发明方法明显提高了小鼠肝脏类器官培养的成功率并加快原代培养中类器官的生长速度。
一种小鼠肝脏器官模型及其建立方法应用

[发明专利]一种HBV持续性感染及纤维化小鼠模型建立-CN201310242758.1有效
发明人：金奇;李武平;叶磊 -专利权人：中国医学科学院病原生物学研究所
申请日： 2013-06-19 - 公布日： 2013-10-02 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明涉及一种HBV持续性感染和纤维化小鼠模型的建立，本发明使用重组病毒AAV2/8‐HBV1.2尾静脉注射C57BL/6小鼠，重组病毒在小鼠肝脏中形成持续性感染，并造成肝脏的纤维化。该方法可以介导HBV的基因组在小鼠肝脏中复制、转录和表达，血清中能检测到HBV的病毒颗粒，模型小鼠不产生急性炎症反应，但在肝脏组织中产生脂肪变性和纤维化的生成，重组病毒的包装信号是AAV2的末端重复序列，包装病毒的血清型可以是对小鼠肝脏嗜性强的AAV6，7，8，9,被包装的HBV基因型可以是A、B、C、D、E、F、G亚型，大小为1.2倍的基因组。
一种 hbv 持续性感染纤维化小鼠模型建立

[发明专利]肉苁蓉总苷及松果菊苷在制备用于预防和治疗酒精性肝损伤伴肠道损伤的药物中的应用-CN202110808780.2有效
发明人：姜勇;屠鹏飞;孙嘉旭;王富江;逯颖媛;曾克武 -专利权人：北京大学
申请日： 2021-07-16 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： A61K31/7048 文献下载
摘要：药理实验结果表明，在酒精性肝损伤小鼠模型中，肉苁蓉总苷及松果菊苷能够减轻小鼠肝脏组织形态损伤，降低小鼠肝脏的脂质沉积，降低小鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量，减轻小鼠肝脏的氧化损伤，减少内毒素等有害物质对肝脏的损害，同时还能够减轻小鼠小肠组织形态损伤，改善肠壁绒毛完整性，以及调节肠道菌群紊乱。
肉苁蓉松果制备用于预防治疗酒精性损伤肠道药物中的应用

[发明专利]一种小鼠肝脏高转移肠癌细胞株的建立方法，细胞株和应用-CN201910960219.9在审
发明人：张煜;徐涵文 -专利权人：杭州广科安德生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种小鼠肝脏高转移肠癌细胞株的建立方法，细胞株和应用，本发明小鼠肝脏高转移肠癌细胞株的建立方法的原发灶是在大肠，提供转移发生的真实原发环境；转移的发生是从大肠原发灶自发转移至肝脏；筛选的环境是小鼠体内具有完整的生理环境，尤其是免疫完整的环境；筛选的条件是小鼠肝脏内适合肠癌细胞建立和生长转移灶生理特异性；所得到的高转移细胞株达到100％的原发成瘤率且80％以上的肝脏转移率；所得到的高转移细胞株转移的器官大约90％在转移前期发生且只发生在肝脏，肝脏特异转移率高。
肝脏小鼠肝脏肠癌细胞株高转移细胞高转移转移率大肠筛选肠癌细胞生理环境成瘤率细胞株小鼠器官体内生长应用

[发明专利]一种基于肝脏类器官模型的药物肝毒性评价方法-CN202010795227.5有效
发明人：李刚;杨志英;陈泽新 -专利权人：创芯国际生物科技（广州）有限公司
申请日： 2020-08-10 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种基于肝脏类器官模型的药物肝毒性评价方法，包括：步骤一，小鼠肝脏类器官模型的建立：(1)取小鼠肝脏组织，依次进行清洗、剪切、消化、裂解及过滤处理，获得小鼠肝脏干细胞沉淀；(2)将小鼠肝脏干细胞制胶后采用培养基培养，获得肝脏类器官模型；步骤二，将肝脏类器官模型进行药物处理：将待测药物设置成多个浓度梯度，然后将肝脏类器官模型给予不同浓度梯度下的药物刺激，并在不同时间点收集类器官样本，观察其形态学变化并检测肝功能指标
一种基于肝脏器官模型药物毒性评价方法

[发明专利]蔓菁在制备保护肝脏的药物中的用途-CN201910458326.1有效
发明人：邝婷婷;范刚;张艺;杨海玲;李秋月 -专利权人：成都中医药大学
申请日： 2019-05-29 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： A61K36/31 文献下载
摘要：本发明提供了蔓菁在制备保护肝脏的药物中的用途，通过作用机制研究发现，藏药蔓菁多糖能提高CCl4致急性肝损伤模型小鼠肝脏的抗氧化能力，显著降低肝脏的氧化损伤，能抑制CCl4致急性肝损伤小鼠肝脏caspase3蛋白表达，减少肝细胞的凋亡，对CCl4诱导小鼠急性肝损伤有保护作用。蔓菁多糖在保护肝脏方面，兼有预防和治疗双重作用，且疗效好，安全性高，应用广泛。
制备保护肝脏药物中的用途

[发明专利]ORM2基因及蛋白在作为肿瘤治疗靶点中的应用-CN202010811534.8在审
发明人：马洁;魏训东;袁伟;赵赟博 -专利权人：北京医院
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2022-02-22 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明使用iTRAQ蛋白质定量技术初步筛选出ORM2蛋白为目标蛋白，在基因转录水平和蛋白表达水平同时证明了在四氯化碳和奥沙利铂治疗后小鼠肝脏中ORM2表达显著增高。小鼠动物模型中，将ORM2蛋白在小鼠肝脏过度表达后可显著增加小鼠肝脏和肺脏转移肿瘤的数量；肝脏特异性敲降ORM2的小鼠，肝脏转移肿瘤的数量明显减少。
orm2 基因蛋白作为肿瘤治疗中的应用

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