[发明专利]一种肝脏固有和浸润巨噬细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201911006397.4 | 申请日： | 2019-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN110669731A | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 季菊玲;季煜华;沈宓;李静;何理;孙玉风;陆鹏;吕秀芳 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786;C12N5/077 |
| 代理公司： | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 徐思波 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种肝脏固有和浸润巨噬细胞的分离方法，包括如下步骤：（1）建立并鉴定小鼠异体骨髓移植模型，受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.2，供体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.1；（2）IHC法和流式细胞术观察照射对肝脏实质细胞和固有巨噬细胞造成的影响；（3）原代分离照射移植组小鼠肝脏单个核细胞，根据供体和受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物，流式细胞术分选肝脏固有和浸润巨噬细胞，并描述其数量、分布和表型。本发明通过照射去除CD45.2受体小鼠骨髓来源巨噬细胞，并以CD45.1供体小鼠骨髓补充替代受体小鼠骨髓细胞。从而保证骨髓来源的浸润巨噬细胞细胞和固有巨噬细胞具有不同的分子表型，达到准确高效分离肝脏不同来源巨噬细胞的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 巨噬细胞 表面标志物 受体小鼠 小鼠单核巨噬细胞 肝脏 浸润 固有巨噬细胞 照射 流式细胞术 骨髓来源 供体 单核巨噬细胞 肝脏实质细胞 异体骨髓移植 单个核细胞 供体和受体 分子表型 高效分离 骨髓细胞 小鼠肝脏 小鼠骨髓 原代分离 表型 分选 小鼠 去除 移植 细胞 替代 补充 观察 保证 | ||
【主权项】：
1.在一种肝脏固有和浸润巨噬细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）建立并鉴定小鼠异体骨髓移植模型，受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.2，供体小鼠单核巨噬细胞表面标志物为CD45.1；/n（2）IHC法和流式细胞术观察照射对肝脏实质细胞和固有巨噬细胞造成的影响；/n（3）原代分离照射移植组小鼠肝脏单个核细胞，根据供体和受体小鼠单核巨噬细胞表面标志物，流式细胞术分选肝脏固有和浸润肝脏巨噬细胞，并描述其数量、分布和表型。/n
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