[发明专利]一种重组人脑利钠肽包涵体高效率复性方法在审
| 申请号： | 201811549439.4 | 申请日： | 2018-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109400694A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 任东升;刘银花;张艳;何晨 | 申请（专利权）人： | 西藏诺迪康药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/58 | 分类号： | C07K14/58;C07K1/14 |
| 代理公司： | 成都坤伦厚朴专利代理事务所(普通合伙) 51247 | 代理人： | 李红灵 |
| 地址： | 850000 西*** | 国省代码： | 西藏;54 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种重组人脑利钠肽包涵体蛋白复性方法，它包括如下步骤：(1)洗涤包涵体：取重组人脑利钠肽的原核表达包涵体，加入含2mol/L尿素的缓冲液洗涤；(2)溶解包涵体：加入溶解缓冲液，搅拌4小时，离心，得上清液；(3)在步骤(2)所得上清液中加入复性缓冲液，4℃下复性，离心，获得上清液，即可。本发明还提供了一种重组人脑利钠肽的制备方法。本发明提供的复性方法，可以有效提高重组人脑利钠肽复性效率，操作简单、成本低，应用前景良好。 | ||
| 搜索关键词： | 人脑利钠肽 包涵体 上清液 复性 包涵体蛋白复性 复性缓冲液 缓冲液洗涤 溶解缓冲液 复性效率 原核表达 高效率 尿素 制备 洗涤 溶解 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组人脑利钠肽包涵体蛋白复性方法，其特征在于：它包括如下步骤：(1)洗涤包涵体：取重组人脑利钠肽的原核表达包涵体，加入含2mol/L尿素的缓冲液洗涤；(2)溶解包涵体：加入溶解缓冲液，搅拌4小时，离心，得上清液；其中，所述溶解缓冲液包括如下配比的组分：Tris‑HCl 50mmol/L，氯化钠150mmol/L，8mol/L尿素，pH8.0；(3)在步骤(2)所得上清液中加入复性缓冲液，4℃下复性，离心，获得上清液，即可；其中，所述复性缓冲液包括如下配比的组分：Tris‑HCl 50mmol/L，氯化钠150mmol/L，L‑精氨酸0.3～1mol/L，还原型谷胱甘肽1.5～2.5mmol/L，氧化型谷胱甘肽0.1～0.5mmol/L，pH8.0。
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