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[发明专利]一种重组人IL2包涵体纯化复性方法-CN202211371272.3在审
发明人：李昆鹏;易红飞;高宇;陈颖;陈金林 -专利权人：武汉翌圣生物科技有限公司
申请日： 2022-11-03 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C07K14/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人IL2包涵体纯化复性方法，其步骤包括：收集大肠杆菌表达的人IL2包涵体蛋白并洗涤；用缓冲液E溶解包涵体蛋白，向溶解的包涵体蛋白中加入缓冲液F稀释包涵体蛋白，离心收集沉淀；用缓冲液G重新溶解包涵体蛋白；人IL2包涵体蛋白柱上复性：用缓冲液H平衡Q柱，将获得的人IL2包涵体蛋白上样；缓冲液H洗杂；100％缓冲液I到100％缓冲液J的浓度梯度过柱复性，缓冲液K进一步柱上复性；100％缓冲液L到100％缓冲液M的浓度梯度线性洗脱；将洗脱后的人IL2复性蛋白透析，超滤浓缩，得到成品。本发明方法可以有效提高人IL2包涵体复性效率，采用本发明的方法，其包涵体复性效率达到60％。
一种重组 il2 包涵纯化复性方法

[发明专利]一种用于包涵体蛋白复性的复性缓冲液以及方法-CN202211496885.X在审
发明人：伍波;董晓宁;尹美移;沈晨光;蒋宇珊;吴智广;李超辉;朱瀛 -专利权人：天津鸿宇泰生物科技有限公司
申请日： 2022-11-25 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C07K1/113 文献下载
摘要：本申请涉及用于包涵体蛋白复性的复性缓冲液以及方法。所述复性缓冲液包括20~50mM的Tris‑HCl，50~150mM的NaCl，0.5~1.5M的L‑精氨酸，0.5~1wt%的β‑环状糊精和0.05~5wt%的去污剂，且pH值为8~9。本申请所述复性缓冲液中同时包括β‑环状糊精和去污剂，二者能够发挥协同作用，进而使得利用所述复性缓冲液对包涵体进行蛋白复性时能够显著提高包涵体的复性效果，更利于变性蛋白质折叠为天然活性蛋白质。另外，利用所述复性缓冲液对包涵体进行复性的操作简单，成本低，重组蛋白产量高。
一种用于包涵蛋白复性缓冲液以及方法

[发明专利]有利于rPA大规模复性的高效混合复性装置-CN201010174260.2有效
发明人：秦玉峰;尤金花;张元兴;周祥山 -专利权人：山东东阿阿胶股份有限公司;华东理工大学
申请日： 2010-05-13 - 公布日： 2010-09-15 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：一种有利于rPA大规模复性的高效混合复性装置，用以向复性缓冲液内加入变性蛋白溶液，包括容器，内装所述复性缓冲液；进液管，一端为出液端，所述出液端设有多个喷嘴，另一端为进液端，通以所述变性蛋白溶液；螺旋桨，插入所述复性缓冲液的液面下方。由此，本发明可有效抑制rPA包涵体在复性时的聚集反应，显著提高目的蛋白的复性率。
有利于 rpa 大规模复性高效混合装置

[发明专利]从重组人睫状神经营养因子及其突变体中分离异构蛋白的方法-CN200710126137.1无效
发明人：蒋琳;应莲芳;谢溱;高雪峰;梁凌宇;李萍;卜晓萍;马亚茹 -专利权人：兰州生物制品研究所
申请日： 2007-06-12 - 公布日： 2008-01-30 - 主分类号： C07K14/475 文献下载
摘要：本发明的方法是将收集的湿菌体在洗涤缓冲液制成菌体混悬液，经超声破碎离心，弃去上清，沉淀用含尿素、TritonX－100的TE缓冲液洗涤得到表达蛋白包涵体，再用含盐酸胍或是尿素的缓冲液将该包涵体充分溶解，将包涵体溶解液用含有Tris－HCl、精氨酸和EDTA缓冲液进行稀释复性，再放置24～48h，成为CNTF复性蛋白液，超滤浓缩后，经凝胶层析G－25柱转换至Tris缓冲液中，收集蛋白峰，再将转换了液体的CNTF复性蛋白液上Q Sephrose－Fast Flow阴离子交换柱，去除未复性好的CNTF蛋白及杂蛋白。
重组人睫状神经营养因子及其突变体中分离异蛋白方法

[发明专利]一种包涵体的复性方法及试剂盒-CN202110580007.5在审
发明人：柯红;熊志怡;张伟;丰毅;周赢;易汪雪;张振 -专利权人：武汉华美生物工程有限公司
申请日： 2021-05-26 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种包涵体的复性方法及试剂盒，所述方法包括：诱导目的蛋白在宿主细胞中表达，然后裂解宿主细胞获得目的蛋白；溶解目的蛋白；采用镍柱层析对目的蛋白进行纯化，用包含十二烷基肌氨酸钠和咪唑的洗脱缓冲液进行梯度洗脱；收集包含目的蛋白的洗脱液装入透析袋中，并放入组分为Tris‑HCl和EDTA的复性缓冲液对目的蛋白透析复性，得到复性蛋白。本发明针对现有的包涵体复性方法操作复杂不易控制，成本高，得率低，活性差等问题，通过对洗脱缓冲液和复性缓冲液进行优化，使其发挥协同作用，有效提升了包涵体的复性效果，提高了目的蛋白的纯度及活性，并且该方法操作简单
一种包涵复性方法试剂盒

[发明专利]一种结核分枝杆菌包涵体蛋白复性的方法及其专用复性缓冲液-CN202210035625.6在审
发明人：阳幼荣;吴雪琼;梁艳;薛勇;贾再兴;张俊仙 -专利权人：中国人民解放军总医院第八医学中心
申请日： 2022-01-13 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C07K14/35 文献下载
摘要：本发明公开了一种结核分枝杆菌包涵体蛋白复性的方法及其专用复性缓冲液。实验证明，采用本发明提供的复性缓冲液可以复性结核分枝杆菌蛋白W544蛋白，复性得到的W544蛋白能有效刺激结核分枝杆菌感染小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应，同时不刺激健康小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应。由此可见，复性的W544蛋白具有很好的免疫原性。本发明提供的复性缓冲液及依据其建立的结核分枝杆菌包涵体蛋白复性方法具有重要的应用价值。
一种结核分枝杆菌包涵蛋白复性方法及其专用缓冲液

[发明专利]一种重组蛋白复性缓冲液及其配制方法和应用-CN201310668749.9有效
发明人：李辉;施振旦 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2013-12-11 - 公布日： 2014-03-12 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：发明涉及一种重组蛋白复性缓冲液及其配制方法和应用，所述缓冲液由基础液和5‰的β-巯基乙醇、1%的吐温-20、10mM的β-环糊精、1M的L-半胱氨酸以及4M的尿素组成；其配制方法为先向基础液中加入4M的尿素；后加入体积比为5‰的β-巯基乙醇、1%的吐温-20以及10mM的β-环糊精和1M的L-半胱氨酸，即形成重组蛋白复性缓冲液；本发明所述缓冲液应用于初始蛋白浓度高于1mg/mL的重组蛋白复性，操作简单，成本低，方便工业化生产，复性后蛋白体积增大较少，蛋白浓度稀释较小，并且复性率较高。
一种重组蛋白复性缓冲液及其配制方法应用

[发明专利]一种重组人脑利钠肽包涵体高效率复性方法-CN201811549439.4在审
发明人：任东升;刘银花;张艳;何晨 -专利权人：西藏诺迪康药业股份有限公司
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C07K14/58 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组人脑利钠肽包涵体蛋白复性方法，它包括如下步骤：(1)洗涤包涵体：取重组人脑利钠肽的原核表达包涵体，加入含2mol/L尿素的缓冲液洗涤；(2)溶解包涵体：加入溶解缓冲液，搅拌4小时，离心，得上清液；(3)在步骤(2)所得上清液中加入复性缓冲液，4℃下复性，离心，获得上清液，即可。本发明提供的复性方法，可以有效提高重组人脑利钠肽复性效率，操作简单、成本低，应用前景良好。
人脑利钠肽包涵体上清液复性包涵体蛋白复性复性缓冲液缓冲液洗涤溶解缓冲液复性效率原核表达高效率尿素制备洗涤溶解应用

[发明专利]一种用于去除单克隆抗体中异构体的复性液及复性方法-CN201510582661.4在审
发明人：朱云斌;贡以捷;陆晨琳;胡辉 -专利权人：三生国健药业（上海）股份有限公司
申请日： 2015-09-15 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于去除单克隆抗体中异构体的复性液和复性方法，所述复性液包括以下组分磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中的一种或两种10‑150mmol/L；精氨酸或氯化钠10‑利用本发明的复性液对单克隆抗体溶液进行处理，通过简单的复性工艺可有效减少单克隆抗体中的异构体含量。
一种用于去除单克隆抗体中异构体复性方法

[发明专利]液体生物芯片系统-CN200910148151.0无效
发明人：马庆伟;于中连;吕萍萍;任晶;胡晓慧;张燕 -专利权人：毅新兴业（北京）科技有限公司
申请日： 2009-06-23 - 公布日： 2009-12-02 - 主分类号： G01N33/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于结合、分离、纯化靶生物大分子的液体芯片系统，包括由微米或纳米级芯片粒子和芯片粒子保存缓冲液组成的液体芯片，和液体芯片工作缓冲液：样品修饰缓冲液、结合缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、和/或芯片钝化缓冲液、和/或芯片激活缓冲液。该系统具有重复性好、样品处理通量高、操作简便、成本低等优点，并且具有极广泛的应用领域，适用于各种生物大分子的分离和纯化。
液体生物芯片系统

[发明专利]一种复合干扰素的纯化方法-CN200310121343.5无效
发明人：刘永东;李京京;王芳薇;苏志国 -专利权人：中国科学院过程工程研究所
申请日： 2003-12-12 - 公布日： 2005-06-15 - 主分类号： C07K14/555 文献下载
摘要：本发明提供一种复合干扰素的纯化方法，包括如下步骤：将经常规方法发酵并收集的包涵体变性得到的复合干扰素，边搅拌边加入缓冲液D，然后在可以透过分子量50000以下的透析袋中，于缓冲液E中透析，进行复合干扰素蛋白质的复性；分出上清液，在装有强阳离子交换介质的层析柱上用缓冲液F和缓冲液G梯度洗脱，得到纯化的复合干扰素。本方法不仅能完全去除分子量在3～4万的杂蛋白，而且能将复性中间体与完全复性的蛋白基本分开，从而所得复合干扰素纯度高，产品结构也更均一。
一种复合干扰素纯化方法

[发明专利]一种重组人粒细胞刺激因子的复性及纯化方法-CN201780004941.4有效
发明人：张晨光;王宏伟;徐峰;汪军;齐艳艳 -专利权人：江苏恒瑞医药股份有限公司
申请日： 2017-04-14 - 公布日： 2021-11-12 - 主分类号： C07K14/535 文献下载
摘要：一种重组人粒细胞刺激因子的复性及纯化方法，通过在复性前以缓冲液置换方式去除还原剂，提高了复性工艺的可控性和复性率，优化了复性缓冲液的组成。
一种重组粒细胞刺激因子复性纯化方法

[发明专利]双功能色谱介质辅助溶菌酶体外复性的方法-CN201210417488.9无效
发明人：高栋;王骊丽;谭福春;王文鹏 -专利权人：西北大学
申请日： 2012-10-26 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12N9/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种双功能色谱介质辅助溶菌酶体外复性的方法。具体步骤如下：1)制备双功能色谱介质；2)用平衡缓冲液平衡装有双功能色谱介质的色谱柱；3)用变性缓冲液溶解溶菌酶，吸附上样；4)用复性缓冲液进行洗脱复性。本发明的优点在于：(1)同时利用疏水作用力和静电排斥作用力来抑制变性蛋白的聚集，既可提高蛋白的活性收率，又可提高蛋白回收率；(2)双功能色谱介质具有高的分辨率，复性和纯化可同时完成；(3)制备工艺简单成熟
功能色谱介质辅助溶菌酶体外复性方法

[发明专利]快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉及其使用方法-CN201810337711.6在审
发明人：徐卫平;王占军;刘玉婷;许建强;穆罕默德·拉塞尔;杨骁婧;佟慧妍 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2018-04-12 - 公布日： 2018-11-16 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉及其使用方法属于生物学分析领域。预制试粉所配制的缓冲液包括PBS缓冲液、Tris缓冲液、TE缓冲液、CSC缓冲液。将预制试粉与一定体积的去离子水混合互溶，无需称量、无需pH值调节步骤，可快速准确的制备设定浓度、设定pH值的实验缓冲液，且预制试粉以固体形式储存和运输，保存时间长，运输和保存成本低。本发明使用方法简便快速，使得缓冲液的制备过程可在5‑10分钟内完成，显著提高微生物和生化实验中缓冲液制备的效率和重复性。
缓冲液预制生化实验微生物快速制备制备储存和运输生物学分析实验缓冲液混合互溶去离子水制备过程保存称量配制运输

[发明专利]一种重组蛋白的高效变复性的方法-CN200510134573.4有效
发明人：林键;秦超;李胜峰 -专利权人：百奥泰生物科技(广州)有限公司
申请日： 2005-12-19 - 公布日： 2006-05-24 - 主分类号： C07K1/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白的高效变复性的方法，对重组表达而不具有生物活性的蛋白质进行了高效快速的变复性。通过采用含有尿素和一定浓度比例的氧化还原剂GSSH/GSH等组成的变性缓冲液对充分洗涤后的包涵体蛋白进行溶解，随后将变性蛋白稀释注入含有L－精氨酸和一定浓度比例的氧化还原剂GSSH/GSH等组成的复性缓冲液中进行复性，并在复性过程中逐步提高缓冲液中氧化还原剂GSSH/GSH的比例及调低pH，直至复性结束。经该方法复性的几种在大肠杆菌中表达并形成包涵体的蛋白质，其生物活性强且稳定，因此是工业化高效变复性的方法。
一种重组蛋白高效复性方法

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