[发明专利]大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法有效

专利信息
申请号: 202010854423.5 申请日: 2020-08-24
公开(公告)号: CN112062820B 公开(公告)日: 2023-05-26
发明(设计)人: 崔玉东;肖雪 申请(专利权)人: 黑龙江八一农垦大学
主分类号: C07K14/245 分类号: C07K14/245;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36;C07K1/14
代理公司: 大庆禹奥专利事务所 23208 代理人: 朱士文;杨晓梅
地址: 163000 黑龙江*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明涉及一种大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法,该方法包括以下步骤:(1)诱导表达的rOmpA包涵体蛋白沉淀的收集;(2)rOmpA包涵体蛋白用8M尿素溶液变性;(3)用含15mMβ‑环糊精、pH8.5的100mM Tris‑HCl缓冲液进行5倍稀释复性;(4)复性的rOmpA亲和层析纯化;(5)纯化的rOmpA置透析袋中,于pH7.6的PBS缓冲液中4℃透析12h以上,离心后收集上清,即获得纯化的复性rOmpA蛋白。本发明对表达的rOmpA包涵体蛋白进行复性和纯化,可获得纯度高达95%的可溶性rOmpA蛋白;本发明使用的复性方法简便快捷,有效解决了大肠杆菌rOmpA包涵体蛋白的复性纯化问题,为大规模生产利用rOmpA降低成本。
搜索关键词: 大肠杆菌 重组 膜蛋白 包涵 蛋白 复性 纯化 方法
【主权项】:
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