[发明专利]一种耐酸性提高的纳豆激酶有效

专利信息
申请号: 201711376850.1 申请日: 2017-12-19
公开(公告)号: CN107937372B 公开(公告)日: 2020-03-24
发明(设计)人: 周哲敏;刘中美;周丽;崔文璟;郭军玲;赵菡 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/48 分类号: C12N9/48;C12N1/21;A61K38/48;A61P9/00;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种耐酸性提高的纳豆激酶,属于蛋白质工程。本发明得到的纳豆激酶Q59E‑Y217K‑N218D和Y217K,在酸性条件下,Q59E‑Y217K‑N218D和Y217K的稳定性较野生酶有大幅度提高。本发明提供的纳豆激酶突变体Q59E‑Y217K‑N218D和Y217K能更好的应对胃道极端酸性环境,提高了纳豆激酶作为治疗心脑血管疾病口服药物的应用价值。
搜索关键词: 一种 耐酸 提高 激酶
【主权项】:
一种稳定性提高的纳豆激酶突变体,其特征在于,所述突变体是将氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的纳豆激酶的第59位、第217位、第218位的一个或多个氨基酸位点进行突变。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学,未经江南大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201711376850.1/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 冠状病毒中和效应蛋白及其应用-202210338376.8
  • 席建忠;王博仑;赵俊轩 - 北京大学
  • 2022-04-01 - 2023-10-27 - C12N9/48
  • 本发明公开了冠状病毒中和效应蛋白及其应用。本发明提供了一种蛋白质,为氨基酸序列如SEQ ID No.1的第1‑740位或经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或具有80%以上同一性且具有相同功能的蛋白质,或在此基础上连接蛋白标签后得到的蛋白。本发明所提供的C4‑2蛋白能与冠状病毒S蛋白结合,并抑制其与人细胞的ACE2受体结合,从而有效中和冠状病毒的,并在细胞水平上得以证明。同时其对应的DNA序列利于在人细胞系中进行可溶性表达,为冠状病毒的治疗提供了新的方向。
  • PG2-LC蛋白作为SNAP-25的水解酶的应用-202310545341.6
  • 张四才;代晓燕;杨锦波 - 西北农林科技大学
  • 2023-05-15 - 2023-09-19 - C12N9/48
  • 本发明提供了PG2‑LC蛋白作为SNAP‑25的水解酶的应用。PG2‑LC蛋白的酶切位点位于SNAP‑25氨基酸序列的第191位的精氨酸与192位的赖氨酸之间,以及SNAP‑25氨基酸序列的第209位的谷氨酰胺与210位的亮氨酸之间。本发明首次给出了PG2‑LC蛋白作为SNAP‑25的水解酶,PG2‑LC蛋白在胞内能够水解大鼠和果蝇的SNAP‑25,由于大鼠SNAP‑25与人类SNAP‑25高度相似,因此可推知PG2‑LC蛋白能够水解人类SNAP‑25,为PG2‑LC蛋白在面部除皱、SNARE复合体功能障碍相关疾病的治疗等方面奠定了基础。
  • 一种重组二肽酶突变体及其在L-肌肽生产中的应用-202310947313.7
  • 饶志明;刘韵然;潘学玮;徐美娟;杨套伟;张显 - 江南大学
  • 2023-07-28 - 2023-09-12 - C12N9/48
  • 本发明涉及一种重组二肽酶突变体及其在L‑肌肽生产中的应用,属于酶工程技术领域。本发明以二肽酶为基础,选择其第148位和第168位进行的氨基酸进行定点突变,将第148位甘氨酸突变成天冬氨酸(G148D),第168位苏氨酸突变成丝氨酸(T168S),所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,突变体酶活性比野生型高41.6%。本发明提供的二肽酶突变体催化β‑丙氨酸和L‑组氨酸合成L‑肌肽的效率更高,与野生型相比,产量提高了40.9%。本发明的重组二肽酶突变体能更好的满足工业生产需求,并解决现有技术中二肽酶活性低,表达量低,L‑肌肽的合成产量低等的问题。
  • 一种氨肽酶BmAp、突变体BmApM及其应用-202211329966.0
  • 王建荣;祝木金;陈微;王平;钟斌;曹革 - 深圳润康生态环境股份有限公司
  • 2022-10-27 - 2023-09-05 - C12N9/48
  • 本发明属于蛋白质理性设计及酶催化领域,具体涉及一种氨肽酶BmAp、突变体BmApM及其应用。本发明提供的氨肽酶BmAp来源于莫海威芽孢杆菌。本发明通过同源克隆、异源表达以及特性表征获得氨肽酶BmAp及其酶学特性。以氨肽酶BmAp为出发模板,通过蛋白自由能优化获得热稳定性提升的突变体BmApM。以毕赤酵母为宿主,实现氨肽酶BmAp和突变体BmApM的高效制备。本发明最终将氨肽酶BmAp及其突变体BmApM应用于蛋白水解,为其下一步产业化应用提供技术参考。
  • 一种氨肽酶及其编码基因-202310225690.X
  • 兰元廷;赵小勇;孙进;张润杰;吴俊;申晓宁;刘卓 - 江苏御娘食品有限公司
  • 2023-03-10 - 2023-08-29 - C12N9/48
  • 本发明公开了一种氨肽酶及其编码基因,所述氨肽酶是一种来源于Bacillus licheniformis YN的氨肽酶序列,属于食品酶工程领域。本发明从Bacillus licheniformis YN发酵液中纯化获得电泳纯的氨肽酶,经测定,该氨肽酶对底物亮氨酸‑对硝基苯胺,蛋氨酸‑4‑硝基苯胺,L‑脯氨酸‑4‑硝基苯胺,L‑赖氨酸‑4‑硝基苯胺,L‑精氨酸‑4‑硝基苯胺,L‑缬氨酸‑4‑硝基苯胺,L‑苯丙氨酸‑4‑硝基苯胺均具有催化活性,其中催化活性最高的底物依次为脯氨酸、亮氨酸和赖氨酸,以Leu‑pNA为底物时,其比酶活达到1125U/mg。利用MALDI‑TOF‑MS分析该酶序列,设计引物对该氨肽酶基因进行克隆,获得该酶的核酸和蛋白质序列,为高催化效率氨肽酶的工业应用奠定基础。
  • 一种蝎肽酶制备方法-202310818045.9
  • 唐晨;唐方药;唐铁山 - 河南普泽中医药科技开发有限公司
  • 2023-07-05 - 2023-08-08 - C12N9/48
  • 本发明涉及一种蝎肽酶制备方法。该蝎肽酶制备方法包括以下步骤:步骤1,消毒:蝎在常温状态下自然干燥1~2小时,使用紫外线杀菌灯对干燥后的蝎进行再次杀菌消毒;步骤2,提取:将步骤1处理的蝎放入蒸煮设备中蒸煮,将蒸煮后的蝎置于‑8~‑40℃的环境中快速冷冻后保存,冷冻后的蝎溶液放置于常温下解冻,解冻后的蝎溶液倒入高速旋转分离器中进行分离;步骤3,炒制:向步骤2分离的蝎中加入山药、久制大黄、壁虎、杏仁、木鳖子仁,混合均匀后放入炒制设备中炒制;步骤4,发酵:向步骤3炒制的蝎中加入生物酶发酵。本发明的蝎肽酶用途广泛,可作为预防血栓、溶血栓、降血稠类食品的原料,辅以乳糖、甘露醇等,制成粉剂、片剂、胶囊或口服液。
  • 一种产氨肽酶的重组菌株及其在高效蛋白水解中的应用-202210079394.9
  • 张荣珍;徐岩;陈雅惠 - 江南大学
  • 2022-01-24 - 2023-07-25 - C12N9/48
  • 本发明公开了一种产氨肽酶的重组菌株及其在高效蛋白水解中的应用,属于基因工程、酶工程及食品工程技术领域。本发明的重组氨肽酶BlPepNex和BlPepNin在最适反应条件45℃、pH 9.0和45℃、pH 7.0时,比酶活分别为401.3U/mg和113.8U/mg,胞外酶活力约为胞内酶活力的3.5倍。该重组酶具有较好pH和温度稳定性,能够高效催化大豆分离蛋白水解,释放小分子活性肽和游离氨基酸。本发明为提高蛋白质的深度水解和富含蛋白质生物资源的增值提供了优质、安全、高效的代表性氨肽酶及产酶菌株。
  • 去泛素化酶USP45在制备治疗肺鳞癌药物中的应用-202210366780.6
  • 李凯;王倩;卞华;段培培;杜瑞娟 - 南阳理工学院
  • 2022-04-08 - 2023-07-18 - C12N9/48
  • 本发明公开了去泛素化酶USP45在制备治疗肺鳞癌药物中的应用,属于生物医药技术领域。本发明发现USP45在肺鳞癌组织中的mRNA表达水平上调,并且与肺鳞癌患者的无复发生存期呈负相关,USP45在肺鳞癌组织中的蛋白表达水平增高;USP45敲降能够显著抑制肺鳞癌细胞的增殖。本发明提供了以USP45作为肺鳞癌分子诊断标志物或预后预测标记物,以及以USP45作为靶点在制备治疗肺鳞癌药物中的应用。
  • 一种谷氨酸氨肽酶及其制备方法和应用-202211517294.6
  • 蓝清;蓝德安;刘梦元 - 广州市仟味食品有限公司
  • 2022-11-30 - 2023-07-04 - C12N9/48
  • 本发明公开了一种谷氨酸氨肽酶及其制备方法和应用,涉及蛋白酶重组表达技术领域,其技术要点为:本发明提供的谷氨酸氨肽酶(PepA),其氨基酸序列为SEQ ID NO:1;其编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。本发明实现了氨肽酶(PepA)在毕赤酵母中的分泌表达,提供了其分离纯化方法。本发明还提供了谷氨酸氨肽酶(PepA)生物学特性及其潜在应用价值。
  • 一种ACE2突变体及其突变方法和应用-202210172067.8
  • 徐涛;宋婀莉;冯寒;杨临溥 - 中国科学院生物物理研究所
  • 2022-02-24 - 2023-07-04 - C12N9/48
  • 本发明涉及一种血管紧张素转化酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)蛋白或其胞外段的突变体,其为ACE2胞外段的N端的锌离子依赖性活性位点中的一个或多个组氨酸(即,N端第345位点、第374位点、第378位点、第505位点的任意一个或多个位置处的组氨酸)突变为非极性氨基酸而获得的突变体。该突变体作为冠状病毒的诱饵蛋白,能够在细胞外发挥诱捕冠状病毒的作用,阻止病毒进入细胞;同时由于特定位点的突变从而无法降解血管紧张素II水平,进而避免ACE2或其胞外段大量快速升高所带来的同时伴有的RAAS紊乱和心肌纤维化等副作用。
  • 一种降解心肌梗塞疾病的新型靶点VASH1的多肽PROTAC分子及其应用-202210842187.4
  • 李敬瑞;张晓圆;陈洁;肖龙龙;王慧丹;胡瑢华;季芸竹;马康静;聂卓伦;申继龙 - 山东理工大学
  • 2022-07-18 - 2023-05-05 - C12N9/48
  • 本发明公开了一种降解心肌梗塞疾病的新型靶点VASH1的多肽PROTAC分子及其应用,本发明首次提出利用PROTAC技术研究能够降解VASH1靶蛋白的多肽序列产品,得到的多肽氨基酸序列由靶向蛋白配体、linker和E3连接酶配体复合而成,这三者具有正协同效应,利用细胞内的蛋白酶体系统,可以达到很好的降解VASH1的效果。本发明的多肽产品具有安全性高、易合成、生物兼容性强等优点,还能避免化学合成的小分子化合物抑制剂的耐药性局限。经验证,该多肽序列可以降低由VASH1过表达引起的微管去酪氨酸化水平的升高,说明多肽产品还可以应用于与VASH1有关的心肌梗塞疾病的临床药物(如:口服药、注射剂等)研发。
  • 氨肽酶重组菌、氨肽酶及其制备方法和应用-202211198204.1
  • 张梁;刘帆;方亚坤;辛瑜;顾正华;郭自涛 - 江南大学
  • 2022-09-29 - 2023-03-21 - C12N9/48
  • 本发明公开了氨肽酶重组菌、氨肽酶及其制备方法和应用,属于生物制备技术领域。本发明通过氨肽酶祖先序列构建获得具有编码氨肽酶基因核酸序列,并通过该核苷酸序列构建含有该祖先序列基因的重组表达载体及重组菌,通过重组菌制备得到氨肽酶,并利用该重组氨肽酶制备L‑肌肽。本发明采用微生物酶法合成L‑肌肽,反应时间短、制备成本低,绿色、高效,具有广泛的应用前景。
  • 一种抑二肽素B的生物合成方法-202211617498.7
  • 王晓花;刘振民;吴正钧;韩瑨;唐月方 - 光明乳业股份有限公司
  • 2022-12-15 - 2023-03-14 - C12N9/48
  • 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种抑二肽素B的生物合成方法,该方法包括以下步骤:将牛类芽孢杆菌(Paenibacillusbovis)CGMCCNo.8333接种于脱脂乳淀粉培养基中进行发酵。该方法首次采用牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333发酵脱脂乳淀粉培养基的方法完成抑二肽素B的生物合成,披露了牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333具有发酵脱脂乳淀粉培养基合成抑二肽素B的新用途,拓宽了抑二肽素B的来源,而组成简单、来源天然的培养基,令合成的抑二肽素B具有更高的使用安全性。
  • 一种多肽抑制剂及其用途-202011279379.6
  • 李子刚;尹丰;秦璇 - 北京大学深圳研究生院;深圳湾实验室坪山生物医药研发转化中心
  • 2020-11-16 - 2023-02-07 - C12N9/48
  • 一种多肽抑制剂,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。还提供了上述一种多肽抑制剂在制备用于抑制USP30蛋白酶活活性的药物中的用途。通过酶活抑制实验证明,本发明的多肽可以有效抑制USP30的去泛素化酶活性。通过泛素链水解、线粒体去泛素化实验证明,本发明的多肽可以有效抑制去泛素化酶USP30的催化活性。通过共沉淀实验、细胞热迁移实验、免疫荧光共定位实验证明本发明的多肽可以和细胞中的USP30蛋白发生相互作用。通过线粒体自噬相关蛋白的western blot实验、线粒体ATP含量以及线粒体mtDNA含量的检测实验证明本发明的多肽可以抑制细胞中的USP30催化活性并提高线粒体自噬水平。
  • 一种羧肽酶及其编码基因和应用-202110847356.9
  • 叶茂;邓毛程;李静;张远平;尚红岩 - 广东轻工职业技术学院
  • 2021-07-27 - 2023-01-31 - C12N9/48
  • 本发明公开了一种羧肽酶及其编码基因和应用。该羧肽酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了编码该羧肽酶的核苷酸序列。该羧肽酶具有能水解几乎所有的氨基酸残基的作用,具有良好的应用潜力,并且对丰富羧肽酶家族成员,开发我国传统调味品环境资源都具有重要意义。因此,可将其用于制备小分子寡肽,可通过如下步骤制备小分子寡肽:将本发明提供的羧肽酶加入到含有蛋白底物的水解反应体系中,在25~35℃条件下进行酶水解反应2~8h,得到相应的小分子寡肽。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top