本发明属于分子生物学以及蛋白质工程领域,特别涉及一种几丁质酶突变体ChiPcM及其应用。本发明通过基因克隆获得几丁质酶ChiPc,进一步利用理性设计获得热稳定性提升的突变体ChiPcM,最终获得的突变体ChiPcM的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,其热稳定性显著提高,在55℃、60℃和65℃热处理60分钟后的剩余酶活分别是出发模板ChiPc的2.1倍,5.1倍和9.8倍。本发明构建的几丁质酶突变体ChiPcM为其下一步产业化应用奠定基础。
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ‑2及其应用。本发明提供的抗菌肽STJ‑2具有广谱抗菌活性、低毒性且可用于抑制柑橘黄龙病菌,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的抗菌肽STJ‑2对柑橘黄龙病病原菌(革兰氏阴性细菌‑韧皮部杆菌)具有良好的抑制效果;药后罹病柑橘植株病原菌减少、整体长势良好。
本发明属于蛋白质理性设计及酶工程领域,具体涉及一种褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM及其应用。本发明以褐藻胶裂解酶Pl7Aa为出发模板,通过结合二硫键和自由能优化两种蛋白质理性设计策略,获得了热稳定性提升的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明获得的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM在40℃和45℃的水浴处理1小时后,剩余酶活分别是Pl7Aa的2.2倍和8.2倍,具有良好的热稳定性。本发明获得的褐藻胶裂解酶突变体Pl7AaM可用于制备重组载体、重组菌株,以毕赤酵母为重组表达宿主,实现了Pl7AaM的高效表达,用于制备褐藻胶寡糖,进一步为其广泛应用奠定基础。