[发明专利]一种高效表达V8蛋白酶的方法在审
| 申请号： | 201410261929.X | 申请日： | 2014-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN104059898A | 公开（公告）日： | 2014-09-24 |
| 发明（设计）人： | 周小满;高敏奇;吴家权;萧国平 | 申请（专利权）人： | 无锡佰翱得生物科学有限公司;江阴市科里生物医药研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/57;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/445;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自刚;王玉松 |
| 地址： | 214437 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种高效表达V8蛋白酶的方法，属于酶工程技术领域。本发明将融合了SUMO标签的V8蛋白酶基因，在大肠杆菌中进行表达，获得含有SUMO标签的V8蛋白酶，然后利用SUMO蛋白酶移除SUMO标签，获得具有活性的V8蛋白酶。酶活可达15.5U/mg，已经适用于重组蛋白制备和肽指纹图谱鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 v8 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
一种V8蛋白酶酶原，其特征在于，是在成熟V8蛋白酶的N端融合SUMO标签形成酶原。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于无锡佰翱得生物科学有限公司;江阴市科里生物医药研究院有限公司，未经无锡佰翱得生物科学有限公司;江阴市科里生物医药研究院有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410261929.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种鉴定线粒体基因效应的方法
- 下一篇：一种安全抗菌切削液
- 同类专利
- 一种碱性蛋白酶及其编码基因和它们的应用-201510194417.0
- 马延和;秦宏亮;周成;薛燕芬 - 中国科学院微生物研究所
- 2015-04-22 - 2019-10-18 - C12N9/52
- 本发明涉及基因工程领域，公开了一种(a)或(b)所示的碱性蛋白酶：(a)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的碱性蛋白酶；(b)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活性不变的由(a)衍生的蛋白质，或者，在SEQ ID NO：1的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质。本发明还公开了能够编码所述碱性蛋白酶的基因、含有所述基因的重组载体、含有所述重组载体的重组菌株以及它们的应用。此外，本发明还公开了制备碱性蛋白酶的方法和用于水解蛋白质(如酪蛋白和/或角蛋白)的组合物。本发明的碱性蛋白酶活性高且稳定性较强。
- 稳定的蛋白酶变体-201780087051.4
- A·米歇尔斯;A·沙伊迪格;C·埃伦德;C·克拉普;T·霍恩 - EW营养有限责任公司
- 2017-12-22 - 2019-10-11 - C12N9/52
- 本发明涉及蛋白酶变体，其与同时维持蛋白水解活性的如SEQ ID NO 1‑3中任一者所示的Kumamolisin AS主链的全长氨基酸序列，或者其维持蛋白水解活性的片段、级分或改组变体至少90％相同，所述蛋白酶变体展示与以下相比改变或改善的稳定性：如SEQ ID NO 4中所示的Kumamolisin AS野生型，或如SEQ ID NO 1‑3中任一者所示的Kumamolisin AS主链。
- 一种金黄色葡萄球菌分选酶A高效突变体-201910654592.1
- 陈鹏;陈龙 - 北京大学
- 2016-08-25 - 2019-10-01 - C12N9/52
- 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌分选酶A高效突变体。由金黄色葡萄球菌分选酶A基因及一种已知突变体基因出发，通过易错PCR和位点饱和突变构建突变文库，利用基于荧光共振能量转移的筛选平台，经过多轮的筛选以及突变整合得到一系列催化活性提高的分选酶A突变体，这些突变体包含Y187L和/或E189R突变。这些分选酶A突变体既可以提升催化LPXTG与非典型底物α‑Gly之间反应的效率，同时又可以提升催化LPXTG与典型底物α‑Glyn之间反应的效率。
- 一种赖氨酰肽链内肽酶的原核重组表达与制备方法-201610319892.0
- 赵明治;徐平;吴飞林;常蕾 - 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所
- 2016-05-13 - 2019-09-27 - C12N9/52
- 本发明公开了一种赖氨酰肽链内肽酶的原核重组表达与制备方法。该制备方法包括：向受体大肠杆菌细胞中导入氨基酸序列为序列2的重组赖氨酰肽链内肽酶的编码基因，得到重组大肠杆菌细胞；对其进行诱导表达，收集并破碎重组大肠杆菌细胞，得到包含体；然后依次进行变性、复性、激活、纯化，得到重组赖氨酰肽链内肽酶。采用本发明的制备方法制备的重组Lys‑C蛋白酶具有高的酶活力和较高的尿素耐受。本发明的制备方法具有酶、特异性好、无动物来源病毒等有优点，生产与制备工艺简单、成本低，可以应用于生物制药和蛋白质组学研究。
- 金黄色葡萄球菌分选酶A高效突变体-201610726374.0
- 陈鹏;陈龙 - 北京大学
- 2016-08-25 - 2019-09-13 - C12N9/52
- 本发明公开了金黄色葡萄球菌分选酶A高效突变体。由金黄色葡萄球菌分选酶A基因及一种已知突变体基因出发，通过易错PCR和位点饱和突变构建突变文库，利用基于荧光共振能量转移的筛选平台，经过多轮的筛选以及突变整合得到一系列催化活性提高的分选酶A突变体，这些突变体包含D124G、Y187L、E189R和/或F200L突变。这些分选酶A突变体既可以提升催化LPXTG与非典型底物α‑Gly之间反应的效率，同时又可以提升催化LPXTG与典型底物α‑Glyn之间反应的效率。
- 衍生自北极假交替单胞菌PAMC21717的适冷蛋白酶及其用途-201510133982.6
- 任挺汉;具本勋;申哲寿;金德圭;金一赞;韩世钟;李濬赫;朴荷主 - 韩国海洋科学研究所
- 2015-03-25 - 2019-09-06 - C12N9/52
- 本发明涉及衍生自北极假交替单胞菌(Pseudoalteromonas arctica)PAMC 21717的适冷蛋白酶或通过在大肠杆菌中表达编码适冷蛋白酶的基因获得的重组适冷蛋白酶，并且更具体地，涉及在低温下具有活性的蛋白酶的晶体，用于结晶所述蛋白酶的方法，用于制备所述蛋白酶的方法，表达所述蛋白酶的重组微生物，用于制备所述重组微生物的方法，用于制备所述重组蛋白酶的方法和所述适冷蛋白酶的用途。根据本发明的衍生自北极假交替单胞菌PAMC 21717的适冷蛋白酶或通过在大肠杆菌中表达编码适冷蛋白酶的基因获得的重组适冷蛋白酶在低温下显示高活性，并且甚至在高pH、各种金属离子和表面活性剂存在的情况下可靠地保持其酶活。因此，它可用于各种工业应用中。
- 一种热稳定性和催化活力提高的角蛋白酶突变体-201610909621.0
- 张娟;陈坚;方真;堵国成;任春慧 - 江南大学
- 2016-10-18 - 2019-08-06 - C12N9/52
- 本发明公开了一种热稳定性和催化活力提高的角蛋白酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的突变体为Y198F，Y291V，Y319F，A322G和A322S；其中A322S在70℃表现出最高酶活力，比P1C2T2增加将近40％。所有突变体的半衰期均大于野生型角蛋白酶KerSMD，其中A322S热稳定性最强，半衰期达到185min。本发明获得四种胞外酶催化活力明显提升的定点突变体198Y198F，Y319F，A322G和A322S，其中Y319F催化活力为最大值1558U/ml，是出发突变体P1C2T2菌株的3倍。比酶活提升明显的角蛋白酶主要有198Y198F、Y319F。因此，本发明的角蛋白酶突变体A322G的热稳定性和胞外角蛋白酶催化活力都获得明显提升，比野生型角蛋白酶更具有应用的价值和潜力。
- 一种高温活性和热稳定性提高的蛋白酶及其制备方法和应用-201610410742.0
- 曾静;袁林;郭建军;郭浩;王林庚 - 江西省科学院微生物研究所;江西鑫维生物技术有限公司
- 2016-06-12 - 2019-08-02 - C12N9/52
- 本发明公开了一种高温活性和热稳定性提高的蛋白酶及其编码基因，以来源于极端嗜热古生菌Pyrococcus furiosus的蛋白酶Pfsp为母本，采用分子生物学技术对Pfsp的氨基酸序列进行改造，获得了一种具有广泛工业应用前景的蛋白酶Pfsp‑m。Pfsp‑m的最适反应温度由对照的90℃提高到105℃；于90℃绝对酶活由对照的1396.24U/mg提高至6823.32U/mg，提高了4.89倍；于90℃绝对角蛋白酶酶活由对照的1116.99U/mg提高至6140.99U/mg，提高了5.50倍；于90℃半衰期由对照的6h延长至28h，提高了4.67倍。
- 具有蛋白酶活性的多肽和编码其的多核苷酸-201780060772.6
- J.马修斯;K.詹森 - 诺维信公司
- 2017-11-21 - 2019-07-30 - C12N9/52
- 本发明涉及具有蛋白酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生和使用这些多肽的方法。
- 一种幽门螺杆菌丝氨酸蛋白酶的表达优化及纯化方法-201910356684.1
- 赵肃清;王甜甜;肖益热;陈莉莉;叶远志 - 广东工业大学
- 2019-04-29 - 2019-07-23 - C12N9/52
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌丝氨酸蛋白酶的表达优化及纯化方法，包括目的蛋白表达载体的构建、目的蛋白在优化条件下的诱导表达、目的蛋白的分离纯化等步骤。本发明通过构建含有His标签的目的蛋白表达载体，并成功转入宿主菌；同时通过设计正交试验对影响工程菌菌体生长和目的蛋白诱导表达量的预诱导时间、诱导温度、诱导剂终浓度和诱导时间这四个因素进行了优化，得到最佳诱导表达条件，使目的蛋白的表达量大大提高；还优化了目的蛋白的亲和层析方法和洗脱体系，使目的蛋白的纯度达98％，比传统方法得到显著提升，对于规模化大量生产重组蛋白具有很好的应用前景。
- 一种IdeS蛋白酶、其制备方法及应用-201510848018.1
- 王征;徐云霞;孙玉华;楼俊文;张丹;成裕 - 苏州康聚生物科技有限公司
- 2015-11-30 - 2019-04-30 - C12N9/52
- 本发明属于生物酶技术领域，具体涉及一种IdeS蛋白酶、其制备方法及应用，所述IdeS蛋白酶的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.1所示的片段。本发明制备的IdeS蛋白酶可在大肠杆菌和/或毕赤酵母中可溶性高效表达，表达量高，仍具有IdeS蛋白酶的特异性酶活，可以特异性的酶切IgG抗体获得所要的抗体片段，且能进行固定化，以利于后期的工业化应用；且IdeS蛋白酶可通过工业化进行大规模生产，使得IdeS蛋白酶的大量生产成为可能，为IdeS的应用奠定了基础。
- 一种催化性能提高的角蛋白酶突变体及应用-201910068548.2
- 史劲松;龚劲松;苏畅;许正宏;李恒;孙雨欣 - 江南大学
- 2019-01-24 - 2019-04-09 - C12N9/52
- 本发明公开了一种催化性能提高的角蛋白酶突变体及应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一株基于前导肽工程和多位点饱和突变构建的重组角蛋白酶及前导肽工程改造的方法。重组菌株M7表现出高角蛋白酶催化潜力，酶活从179U/mL显著改善至1114U/mL，最适反应温度为40℃，最适反应pH为10.0，在40℃水浴90min后仍保留超过80％的酶活，热稳定性较好，适合于工业化大规模生产。并且利用前导肽工程改造蛋白酶的方法可以成为修饰具有自剪切特性的工业酶的通用途径。
- 具有舍雷肽酶活性的多肽及其制备方法-201811177143.4
- 田健;陈豪;曹阳;诸辉 - 宁波希诺亚海洋生物科技有限公司
- 2018-10-10 - 2019-02-01 - C12N9/52
- 本发明提供一种具有舍雷肽酶活性的多肽，基因序列如SEQ ID NO:3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，采用从沙雷氏菌中克隆出舍雷肽酶基因，通过基因工程技术将该基因克隆至pHT43载体中构建表达载体，通过转化将构建好的表达质粒导入不同表达菌株中，经过培养和诱导表达，该菌株能够表达出具有高舍雷肽酶活性的多肽。本发明通过基因克隆技术，实现了在芽孢杆菌中表达具有舍雷肽酶活性的多肽。本发明涉及的菌株培养周期缩短，生产成本降低，产品纯度更高，提取工艺更为简单。本发明在生物医药技术领域具有极大的应用前景和商业价值。
- 具有蛋白酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸-201780005977.4
- A.贝尼;M.杰曼森;P.R.欧斯特加尔德 - 诺维信公司
- 2017-01-20 - 2018-11-23 - C12N9/52
- 本发明涉及具有蛋白酶活性的分离的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞，连同产生和使用这些多肽的方法。
- 直投式凝乳酶制剂及其制备方法-201510969828.2
- 司朝利;廖振林;赖学能 - 广州市康优元生物科技有限公司
- 2015-12-18 - 2018-11-02 - C12N9/52
- 本发明公开了一种直投式凝乳酶制剂的制备方法，所述直投式凝乳酶制剂由保藏编号为CCTCC M 2015633的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)发酵培养制备得到，包括格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)的活化、种子液的制备、发酵培养以及直投式凝乳酶制剂的制备的步骤。该方法制备得到的直投式凝乳酶制剂活性高(1230SU/g以上)、稳定性好，制备过程简单、成本低。本发明的直投式凝乳酶制剂可用于制备发酵乳制品。
- 一种利用重组大肠杆菌高效生产角蛋白酶的发酵方法-201510836988.X
- 张娟;陈坚;方真;堵国成;李光磊;隆明星 - 江南大学
- 2015-11-26 - 2018-10-16 - C12N9/52
- 本发明公开了一种利用重组大肠杆菌高效生产角蛋白酶的发酵方法，属于发酵工程领域。本发明构建了一株可以高效分泌高活性角蛋白酶的重组大肠杆菌，并实现其在摇瓶或者发酵罐中生产制备角蛋白酶。最后通过培养基优化和发酵策略改进，实现高效制备角蛋白酶制剂，发酵酶活从原来的412U/mL提升到4500U/mL(发酵时间48h)。本发明的角蛋白酶制剂，在洗涤、纺织、饲料消化、医药等领域具有很好的应用前景。
- 一种用于角蛋白酶解的复合酶解试剂及应用方法-201510129518.X
- 武达机;邱金元;龚熠;姚春梅 - 湖州珍贝羊绒制品有限公司
- 2015-03-24 - 2018-08-31 - C12N9/52
- 一种用于角蛋白酶解的复合酶解试剂及应用方法，复合酶解试剂包括链霉菌角质蛋白酶、酵母菌酶和还原剂；其应用方法包括步骤：先对含有角质蛋白的天然原料进行脱脂处理；随后将步骤1）经脱脂处理的含有角质蛋白的天然原料加入组合酶解剂液中，在室温并隔绝氧气条件下预处理15～25分钟，进一步调节组合酶解剂液PH值为7.0～7.5，控制温度为50～60℃，酶解12～24小时，得到角蛋白酶解液；将角蛋白酶解液脱色、灭菌；真空干燥，得角蛋白粉。本发明具有酶解迅速、角蛋白降解率高且能有效抑制毒性物生成，由此制得的蛋白粉安全无毒，营养成份高。
- 一种高温裂解酶组合物-201810239435.X
- 王春 - 昆明三正生物科技（集团）有限公司
- 2018-03-22 - 2018-07-31 - C12N9/52
- 本发明提供一种高温裂解酶组合物，采用TSPpgh和MMPpgh组合，利用两种裂解酶具有的热稳定性，对高温下对栖热菌活菌体具有高效的裂解作用，而且在37℃，对大肠杆菌、芽孢杆菌活菌体也有杀灭效果。
- 嗜热菌蛋白酶及其变体的生产和在液体洗涤剂中的用途-201310231226.8
- D·A·埃斯特尔;R·W·J·奥姆斯;A·D·刘;A·肖 - 丹尼斯科美国公司
- 2008-10-28 - 2018-07-10 - C12N9/52
- 本发明提供包含至少一种具有提高的贮存稳定性和/或催化活性的嗜热菌蛋白酶样中性蛋白酶的方法和组合物。在一些实施方案中，嗜热菌蛋白酶用于包括洗涤剂的清洁和其他用途。在一些特别优选实施方案中，本发明提供包含经配制和/或工程改造而抵抗洗涤剂诱导的失活的嗜热菌蛋白酶的方法和组合物。
- 一种角蛋白酶及其编码基因和应用-201510578108.3
- 黄艳;邓宇;马诗淳;陈璐;周正;尹小波 - 农业部沼气科学研究所
- 2015-09-11 - 2018-06-29 - C12N9/52
- 本发明提供了一种角蛋白酶，该角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示或在SEQ ID NO.1的基础上进行缺失、突变、重组获得的具有角蛋白酶活性的氨基酸序列。本发明还提供了编码所述角蛋白酶的基因，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示或在SEQ ID NO.2的基础上进行缺失、突变、重组而获得的能表达所述角蛋白酶的核苷酸序列。本发明还提供了制备所述角蛋白酶的方法。本发明提供的角蛋白酶不仅具有非常有效的降解角蛋白底物的能力，其比活力高达95.4KU/mg，且能在pH为3.0‑11.0以及温度为40‑95℃时保持良好的活性且在60‑90℃能保持相对最高活性45%以上的活性，能很好的水解羽毛粉等角蛋白底物，具有良好的市场应用前景。
- 一种角蛋白酶及其编码基因和应用-201510575220.1
- 黄艳;邓宇;马诗淳;陈璐;周正;尹小波 - 农业部沼气科学研究所
- 2015-09-11 - 2018-06-29 - C12N9/52
- 本发明提供了一种角蛋白酶，该角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示或在SEQ ID NO.1的基础上进行缺失、突变、重组获得的具有角蛋白酶活性的氨基酸序列。本发明还提供了编码所述角蛋白酶的基因，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示或在SEQ ID NO.2的基础上进行缺失、突变、重组而获得的能表达所述角蛋白酶的核苷酸序列。本发明还提供了制备所述角蛋白酶的方法。本发明提供的角蛋白酶不仅具有非常有效的降解角蛋白底物的能力，其比活力高达92.55 KU/mg，且能在pH为4.0‑11.0以及温度为45‑95℃时保持良好的活性，能很好的水解羽毛粉等角蛋白底物，具有良好的市场应用前景。
- 一种角蛋白酶及其编码基因和应用-201510577639.0
- 黄艳;邓宇;马诗淳;陈璐;周正;尹小波 - 农业部沼气科学研究所
- 2015-09-11 - 2018-06-29 - C12N9/52
- 本发明提供了一种角蛋白酶，该角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示或在SEQ ID NO.1的基础上进行缺失、突变、重组获得的具有角蛋白酶活性的氨基酸序列。本发明还提供了编码所述角蛋白酶的基因，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示或在SEQ ID NO.2的基础上进行缺失、突变、重组而获得的能表达所述角蛋白酶的核苷酸序列。本发明还提供了制备所述角蛋白酶的方法。本发明提供的角蛋白酶不仅具有非常有效的降解角蛋白底物的能力，其比活力高达92.7KU/mg，且能在pH为5.0‑11.0以及温度为40‑90℃时保持良好的活性，能很好的水解羽毛粉等角蛋白底物，具有良好的市场应用前景。
- 一种新的IgA蛋白酶及其制备方法和应用-201810021576.4
- 王丽;樊均明;王洪连;李健春 - 王丽
- 2018-01-10 - 2018-06-19 - C12N9/52
- 本发明公开了一种新的IgA蛋白酶及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明公开的新的IgA蛋白酶，其来源于嗜血流感菌49247(H.influenzae 49247)，具有较高的IgA蛋白酶酶活性；此外，本发明公开的IgA蛋白酶的制备方法，通过培养含有编码该IgA蛋白酶的重组工程菌，可以得到高纯度，高产量，高活性的IgA蛋白酶，而不用从具有致病危险的病原菌中分离提取IgA蛋白酶，提高生物安全因素，适合大规模工厂化生产。
- 一种工业化生产凝乳酶的方法-201711422200.6
- 许建立;洪振农 - 中诺生物科技发展江苏有限公司
- 2017-12-25 - 2018-04-06 - C12N9/52
- 本发明公开一种工业化生产凝乳酶的方法，步骤是用原始菌株作传代菌株制备；活化液培养；种子培养；发酵种子培养；发酵培养；发酵结束，检测参数，放料离心处理，得到湿菌体；湿菌体溶解，再清洗，然后离心收集；菌体悬浮液破碎，离心收集包涵体；包涵体经过复性，得到粗制凝乳酶液；粗制凝乳酶液经过膜过滤、加水洗脱，微滤除杂、超滤浓缩、除菌过滤得到无菌液态产品。本发明的工业化生产凝乳酶的方法，1、发酵工艺简单，高密度发酵产量大，成本低；2、细胞破碎工艺减少了固体菌渣带来的环境污染问题；3、膜处理技术效率高，成本低，易操作，减少了传统物理化学工艺带来的产品二次污染问题；4、除菌工艺对产品的保存有极大的作用。
- 一种催化速率提高的角蛋白酶突变体及其制备方法-201510432168.4
- 张娟;方真;堵国成;陈坚 - 江南大学
- 2015-07-21 - 2018-04-06 - C12N9/52
- 本发明公开了一种催化速率提高的角蛋白酶突变体及其制备方法，属于酶工程领域。本发明通过将角蛋白酶KerSMD的C端结构进行剪切，得到了一系列对酪蛋白底物催化速率明显提高的角蛋白酶突变体，催化速率提高了33％‑103％。尤其是突变体V355，不仅具有显著提高的催化速率和酶活，而且还具有增强的耐盐耐去垢剂能力。突变体V355的无胶原蛋白酶活性又耐盐可以利用于皮革处理行业，其催化底物速率快而且耐去垢剂，可以作为洗衣添加剂来生产应用。
- 治疗乳糜泻疾病的组合物和方法-201680032977.9
- I·S·普尔茨;C·沃夫;J·B·西格尔;C·E·丁伯格;L·斯图尔特;D·贝克 - 华盛顿大学;加利福尼亚大学董事会
- 2016-06-08 - 2018-04-03 - C12N9/52
- 提供了公开具有与序列号1的氨基酸序列有至少75％相同的氨基酸序列的多肽及其使用方法，其中，(a)多肽在pH值4下降解PFQPQLPY(序列号140)肽和/或PFPQPQQPF(序列号68)；(b)残基467是Ser，残基267是Glu，残基271是Asp；和(c)所述多肽包含在序列号1的选自由221，262E，268，269，270，319A，320，354E/Q/R/Y，358S/Q/T，368F/Q，399，402，406，424，449，461，463，105，171，172，173，174和456组成的组中的一个或多个残基处的氨基酸改变。
- 通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗-201310439850.7
- K·福斯特;J·查多克;P·马科斯;P·斯坦库姆;K·R·奥基;J·弗朗西斯;L·斯图尔德 - 益普生生物创新有限公司;爱力根公司
- 2007-06-01 - 2018-03-27 - C12N9/52
- 治疗分子的使用，用于特定疼痛病状的治疗，其中所述治疗分子是单链的多肽融合蛋白，其包含非细胞毒性的蛋白酶，或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器中胞吐融合器的蛋白；能够结合所述疼痛感觉传入器上结合位点的靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞，以便被并入到所述疼痛感觉传入器的内涵体中；蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于所述非细胞毒性的蛋白酶或其片段和所述靶向部分之间；和转运区域，其能够从内涵体中转运所述蛋白酶或蛋白酶片段，跨内涵体膜并进入所述疼痛感觉传入器的细胞溶胶。
- 一种底物特异性提高的角蛋白酶突变体及其制备方法-201510119684.1
- 张娟;方真;堵国成;陈坚;刘柏宏 - 江南大学
- 2015-03-18 - 2018-03-20 - C12N9/52
- 本发明公开了一种底物特异性提高的角蛋白酶突变体及其制备方法，属于酶工程领域。本发明通过分析得出最佳突变点进行定点突变，获得角蛋白酶酶活和底物专一性提高的优秀突变体。该角蛋白酶及其突变体能够有效水解羽毛，羊毛等非水溶性角蛋白底物，可用于皮革纺织工业和饲料工业。
- 半胱氨酸蛋白酶-201680021601.8
- 克里斯蒂安·谢尔曼;索菲亚·耶尔努姆;艾玛·努达尔 - 汉莎医药有限公司
- 2016-02-12 - 2018-01-02 - C12N9/52
- 本发明涉及显示IgG半胱氨酸蛋白酶活性的新型多肽及其活体内和活体外用途。该多肽的用途包括用于预防或治疗由IgG介导的疾病和病症的方法，以及用于分析IgG的方法。
- 用于提高碱性蛋白酶的溶解度的方法-201380014362.X
- 东畑正敏;西村祐美;和田恭尚;佐伯胜久;奥田光美 - 花王株式会社
- 2013-04-09 - 2017-12-12 - C12N9/52
- 提供在液体洗涤剂中表现出提高的溶解度的碱性蛋白酶。由SEQ ID NO2所表示的氨基酸序列或与其具有80％或更多序列同一性的氨基酸序列组成的突变碱性蛋白酶，其中选自SEQ ID No2所表示的氨基酸序列的预定位置或与其相对应的位置处的氨基酸残基的至少一个氨基酸残基被取代。
- 专利分类
