[发明专利]大肠杆菌表达系统表达人淀粉样Aeta蛋白及纯化的方法在审
申请号: | 201711339447.1 | 申请日: | 2017-12-14 |
公开(公告)号: | CN108085329A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 刘夫锋;贾龙刚;路福平;赵文平;张会图;李玉 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/12;C07K14/47;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/16 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 栗华楠 |
地址: | 300222 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明属于生物技术和基因工程技术领域,具体为利用大肠杆菌表达系统高效表达及纯化Aeta蛋白。本发明构建的Aeta表达体系提供了原核生物可溶性表达人淀粉样蛋白Aeta的表达载体的构建方法,并将表达载体导入至大肠杆菌表达宿主中,经诱导发酵表达、两步纯化及鉴定后获得高纯度可溶性的目标Aeta蛋白。本方法所采用的大肠杆菌表达系统,具有表达效率高、表达量大、成本低、易操作等特点,所表达的Aeta蛋白纯度高、产率高等优点。 | ||
搜索关键词: | 大肠杆菌表达系统 蛋白 表达载体 构建 宿主 大肠杆菌表达 基因工程技术 淀粉样蛋白 可溶性表达 表达体系 表达效率 蛋白纯度 高效表达 两步纯化 原核生物 表达量 淀粉样 高纯度 产率 发酵 诱导 生物技术 | ||
【主权项】:
1.一种Aeta蛋白的大肠杆菌表达方法,其特征在于,包括重组表达载体构建、转化、目标蛋白诱导表达,步骤如下:(1)将Aeta基因插入到表达载体pET22b的多克隆位点,构建重组表达载体质粒pET22b-Aeta;(2)将(1)中构建的重组表达载体质粒转入宿主细胞E.coli BL21(DE3),获得重组菌株;(3)对重组菌株进行诱导,表达Aeta蛋白。
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