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[发明专利]基于CRISPR-Cas12a的双扩增核酸检测方法-CN202210169371.7在审
发明人：刘睿;周静;吕弋;张立春;宋红杰 -专利权人：四川大学
申请日： 2022-02-24 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明提出了一种基于AuNPs标记的磁性探针的CRISPR‑Cas12a生物测定平台用于HIV相关的核酸检测。核酸扩增策略是用于提高灵敏度的常用方法，但有耗时长、操作复杂、污染风险高以及错配相关的不准确性等缺点。本发明提出了一种无需传统核酸扩增的方法，通过结合CRISPR‑Cas12a的自身放大效应以及金纳米颗粒在电感耦合等离子体质谱法中可检测到的信号强的双扩增方法来实现对目标核酸的灵敏检测。本发明方法对HIV相关核酸的检测可以达到1.05 amol的低检测限，并且在胎牛血清的加标回收实验中得到成功验证。
基于 crispr cas12a 扩增核酸检测方法

[发明专利]基于单颗粒电感耦合等离子质谱的单磁性微球分析方法-CN202210173176.1在审
发明人：吕弋;黄自立;刘睿;宋红杰;张立春 -专利权人：四川大学
申请日： 2022-02-24 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： G01N27/626 文献下载
摘要：本发明的目的是建立一种基于单颗粒电感耦合等离子体质谱的单磁性微球分析方法，能够有效避免绝对定量过程中由于误差可能导致的检测信号波动，实现两种前列腺癌症标志物稳定和准确的定量。本发明的原理是：用+Fe58同位素的频率信号对磁性微球的数量进行统一，通过评估单个磁性微球上的+Au197和+Pt194强度分布，通过平均强度计算或者拟合强度计算得出稳定的分析结果，其不受磁性微球检测数量改变的影响。利用单个磁性微球上+Au197和+Pt194强度与tPSA和fPSA之间的线性关系，该分析方法实现了两种前列腺癌症标志物的同时检测，并应用于前列腺疾病患者血清中两种标志物浓度的同时分析。
基于颗粒电感耦合等离子磁性分析方法

[发明专利]一种以商品化磁珠为内标的比率免疫分析方法-CN202010971675.6有效
发明人：吕弋;王超群;刘睿 -专利权人：四川大学
申请日： 2020-09-16 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： G01N33/574 文献下载
摘要：本发明公开了一种以商品化磁珠为内标的比率免疫分析方法。本发明以癌胚抗原（CEA）为研究模型，磁珠为载体，金纳米颗粒为报告探针。采用高分辨电感耦合等离子体质谱（ICPMS）同时采集磁珠内的57Fe信号及报告探针中的197Au信号。197Au/57Fe信号比值和CEA浓度在一定的范围内具有良好的线性关系，从而实现对CEA的准确定量分析。本发明巧妙地开发了载体磁珠的另一功能（内标），成功地规避了磁分离过程中的磁珠损失和仪器的信号强度波动产生的干扰，从而提高了该基于磁珠的免疫分析方法的准确性和可靠性。考虑到商业化磁珠被使用的普遍性，本发明可能为基于磁珠的生物分析方法提供了新思路。
一种商品化标的比率免疫分析方法

[发明专利]一种比率型催化发光检测有机胺的方法-CN202011382092.6有效
发明人：张立春;裴雪宇;吕弋 -专利权人：四川大学
申请日： 2020-12-01 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： G01N21/76 文献下载
摘要：本发明提供了一种比率型催化发光（Cataluminescence，CTL）快速识别和定量分析有机胺的新方法。通过进样针将有机胺注入蒸发瓶加热使其蒸发，以空气作载气把检测物引入涂有La1.96Tb0.04O2CO3传感材料的陶瓷棒表面，在一定的工作温度下发生催化氧化反应，产生的发光信号经滤波片后用光电倍增管收集，经转化处理后得到催化发光光谱。所述滤波片为555 nm和490 nm，两个波长下的发光信号强度的比值R555/490作为检测物有机胺的特征值，实现有机胺的定性分析；以555 nm或490 nm波长下获得的有机胺催化发光强度与浓度的线性关系实现对有机胺的定量分析。该方法放大了检测物有机胺在整个催化发光过程中的差异性，进而实现了对易挥发的有机胺化合物的简便、快速且灵敏的定性和定量分析。
一种比率催化发光检测有机方法

[发明专利]一种基于DNA步行机器的多组分miRNA检测方法-CN202111368718.2在审
发明人：刘睿;王超群;吕弋;张立春;宋红杰 -专利权人：四川大学
申请日： 2021-11-18 - 公布日： 2023-05-19 - 主分类号： C12Q1/6823 文献下载
摘要：本发明公开了一种多组分DNA步行机器可以同时检测多个肺癌相关miRNA的分析方法。在多种目标miRNA的存在下，目标miRNA正交激活对应的DNA步行机器，释放大量的对应镧系元素。反之，在目标miRNA不存在的条件下，DNA步行机器被锁定链锁定处于静止状态，不会释放镧系元素。释放的多种镧系元素可以被高分辨无机质谱（HR‑ICPMS）同时检测。本发明提供了一种可以多组分检测的DNA步行机器，大大提高了检测的特异性和准确性，采用模块化设计，通过各个模块的自组装而构建，简单的改变相应的模块，即可实现对不同miRNA的检测，满足多种不同miRNA组合检测的需求，具有临床应用的潜力。
一种基于 dna 步行机器组分 mirna 检测方法

[发明专利]HOGG1辅助的镧系元素标记法用于DNA甲基化检测-CN202111369047.1在审
发明人：吕弋;周静;刘睿;宋红杰;张立春 -专利权人：四川大学
申请日： 2021-11-18 - 公布日： 2023-05-19 - 主分类号： C12Q1/6827 文献下载
摘要：本发明提出了一种基于镧系元素标记的电感耦合等离子体质谱法用于DNA甲基化检测，该方法利用人类8‑氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶（hOGG1）能够特异性识别8‑oxo‑G/5mC碱基对以有效区分甲基化DNA。本发明方法对于DNA甲基化的检测可以达到84pM的低检测限，且在没有任何信号扩增步骤的情况下对DNA甲基化水平的检测可以达到0.1%。与常用的核酸扩增策略相比，该方法比较省时，且假阳性概率低。此外，本方法在人血清样品中得到成功验证，加标回收率在96.7%‑105%之间，相对标准偏差在3.0%‑3.5%范围内，表明本发明方法具有应用于临床和生物样品定量分析的潜力。
hogg1 辅助元素标记用于 dna 甲基化检测

[发明专利]一种基于单颗粒电感耦合等离子体质谱的多组分均相免疫分析方法-CN202010987749.5有效
发明人：刘睿;黄自立;吕弋 -专利权人：四川大学
申请日： 2020-09-18 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： G01N33/574 文献下载
摘要：一种基于单颗粒电感耦合等离子体质谱（spICPMS）的多组分均相免疫分析方法，本方法基于抗原抗体识别和抗体三明治夹心结合的原理，多种金属纳米颗粒混合探针对相应的与癌症相关的抗原标志物的识别诱导探针进行可控聚集，探针在聚集前后的总数量随聚集体的增多而减小，单个聚集体的尺寸增大。通过spICPMS的频率和强度两种模式同时对探针聚集体的数量和聚集体程度进行检测，利用聚集体数量和金属含量变化与相应抗原浓度之间的线性关系，构建对多种癌症相关抗原标志物的均相免疫分析。本发明方法无需对样品进行清洗或分离，高效实现了对胰腺癌三种相关抗原标志物的同时分析，有望成为对癌症预前诊断和复发风险评估的有效工具。
一种基于颗粒电感耦合等离子体质组分均相免疫分析方法

[发明专利]一种制备金属氧化物@金属有机骨架核壳材料的方法-CN202010971691.5有效
发明人：吕弋;黄小英;张立春 -专利权人：四川大学
申请日： 2020-09-16 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： B01J31/22 文献下载
摘要：本发明属于纳米材料技术领域，涉及一种金属氧化物@金属有机骨架核壳结构材料的制备方法，其结构式为：CeO2@ZIF‑8,其中，核壳材料是以CeO2为核，ZIF‑8为壳。本发明通过增加有机配体的浓度，在成核动力学的调控下，实现了在二氧化铈表面包覆ZIF‑8壳层。与此同时，该发明方法还具有普适性，可以实现不同金属氧化物粒子@ZIF‑8核壳结构材料的制备。本发明所涉及的合成方法工艺过程简单，重现性好，反应时间短，反应条件温和，制备的产品具有比表面积大、孔隙度高以及催化性能优异等特点，极具应用前景。
一种制备金属氧化物有机骨架材料方法

[发明专利]一种具有高效发蓝光性能的卤化亚铜杂化化合物及其制备方法和应用-CN202211267855.1在审
发明人：刘威;周振南;黎海波;吕弋 -专利权人：中山大学
申请日： 2022-10-17 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C07F1/08 文献下载
摘要：本发明属于有机‑无机杂化功能材料技术领域，具体涉及一种具有高效发蓝光性能的卤化亚铜杂化化合物及其制备方法和应用。本发明设计并合成了一种新型卤化亚铜杂化化合物Cu2X3(tpp)2(n‑pr‑ted)(X：卤素原子；tpp：三苯基磷；n‑pr‑ted：1‑丙基‑1,4‑二氮杂二环[2,2,2]辛‑1‑鎓)，其中无机阴离子组分Cu2X3‑与有机中性组分tpp通过共价键形成配位阴离子团簇Cu2X3(tpp)2‑，再与有机阳离子组分n‑pr‑ted通过离子键形成稳定化合物。这种结构属于离子型结构，同时具备了共价键特性，具有较强的发光性能、较好的热稳定性，在固态照明等领域具有巨大的应用潜力。
一种具有高效发蓝性能卤化亚铜杂化化及其制备方法应用

[发明专利]一种基于镧系纳米探针同时检测多种乳腺癌生物标志物的分析方法-CN202110977304.3在审
发明人：刘睿;陈雪;吕弋 -专利权人：四川大学
申请日： 2021-08-24 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： G01N27/626 文献下载
摘要：本发明的目的是提供一种基于镧系纳米探针同时检测多种乳腺癌生物标志物的分析方法。该方法包括镧系纳米探针的合成和稳定同位素检测。本发明的原理是：利用溶剂热法，一步合成修饰有PAA的镧系纳米粒子；通过羧胺反应，将抗体与纳米粒子偶联，形成纳米探针。免疫检测是利用连有抗体的磁珠将目标物从基质中提取出来，加入纳米探针后，由于抗原与抗体的特异性识别，纳米粒子成功标记在目标物上；最后用β‑NTA消解，由ICP‑MS检测镧系元素的强度信号并进行定量分析。利用ICP‑MS检出限低、稳定性优异以及镧系元素生物背景低、易电离等优点实现对乳腺癌生物标志物高灵敏、稳定且准确的多重检测，用于人血清中生物标志物的检测。
一种基于纳米探针同时检测多种乳腺癌生物标志分析方法

[发明专利]一种基于镧系纳米粒子的新型冠状病毒多组分核酸检测方法-CN202110969632.9在审
发明人：吕弋;李紫嫣;刘睿 -专利权人：四川大学
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2023-02-24 - 主分类号： C12Q1/6834 文献下载
摘要：本发明目的是提供一种基于镧系纳米粒子（LnNPs）的多组分核酸检测方法，对新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）的三个特征基因位点进行协同检测以改善单一位点检测造成假阴性结果。本发明中的镧系纳米粒子制备方法简单，快速，具有普适性，本发明的原理是：在磁性纳米微球上构建一种基于镧系纳米粒子标记策略用于SARS‑CoV‑2的多组分核酸检测平台，通过靶向ORF1ab、RdRp和E基因，三种镧系（Tb，Ho，Eu）探针可以通过元素质谱检测同时识别一个样品中的三个位点。该方法利用简单的三明治杂交，通过纳米粒子元素自放大效应，可实现高灵敏的检测。
一种基于纳米粒子新型冠状病毒组分核酸检测方法

[实用新型]一种实验室微量合成用注射泵-CN202121860971.5有效
发明人：吕弋;魏楚东;张立春 -专利权人：四川大学
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2022-07-15 - 主分类号： B01L3/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种实验室微量合成用注射泵，包括泵本体、转接套件、固定支架和控制模块，用于实验室微量加注合成及分析环节的微量、少量液相试剂的加注。注射泵本体包含聚合物支撑、运行轨道和推注机构，搭配转接套件和控制模块，可以实现对多种规格注射器的大速率范围的匀速挤出，实现自动化、安全化的实验室合成加注操作。该注射泵搭配市售的通用元件，利用微型步进电机减速组驱动螺杆将液体泵出。该注射泵的体积、重量小、可维护性强、工作电压低，可基于USB接口供电，与常规USB电源搭配即实现便携式使用，可用于实验室合成环境下危险化学试剂的远程慢速加注、分析实验的精确滴定等操作，在多种合成、分析等应用场所实现高兼容性的运转。
一种实验室微量合成注射

[发明专利]一种基于比率无机质谱检测的ATP分析方法-CN201910776396.1有效
发明人：刘睿;王超群;吕弋 -专利权人：四川大学
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： G01N27/626 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于比率无机质谱（ICPMS）检测的ATP分析方法。首先，ATP适体DNA1与磁珠通过酰胺反应化学结合，与DNA2互补的小段DNA2与金纳米粒子通过形成AU‑S键结合。其次，两种复合物被以特定的比例加入到反应体系中形成核心‑卫星结构。当向体系中加入ATP时，适体与ATP特异性结合导致卫星信号（AuNPs）释放。随着ATP量的增加，上清液中释放的AuNPs增加，通过对上清液进行ICPMS检测得到的197Au/115In信号比值变得越来越高。由于197Au/115In信号比值与相应ATP量的有关，本发明通过197Au/115In的信号比值实现ATP含量的测定。
一种基于比率无机检测 atp 分析方法

[发明专利]一种发蓝光的高量子产率卤化亚铜杂化晶体的制备及其应用-CN202111657934.9在审
发明人：刘威;吕弋;黎海波 -专利权人：中山大学
申请日： 2021-12-30 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C07F9/50 文献下载
摘要：本发明属于有机‑无机杂化功能材料技术领域，具体涉及一种发蓝光的高量子产率卤化亚铜杂化晶体的制备及其应用，为克服离子型结构不发光或量子产率低的缺陷，本发明以常见的三苯基磷(tpp)作为中性配体，将单体Cu原子与两个卤素原子及两个P原子的四面体配位，形成[CuX2(tpp)2]‑阴离子团簇，同时使用烷基化的三乙烯二胺衍生物——i‑bu‑ted作为阳离子配体，进而制备得到离子型结构的卤化亚铜杂化晶体CuX2(tpp)2(L)，该杂化结构具有高效的蓝光发射性能，内部量子产率高达98％，热稳定性好，是一种可溶液加工，易于合成，环境友好、成本低、无稀土元素的发光材料，可应用于固态照明领域。
一种发蓝量子卤化亚铜杂化晶体制备及其应用

[发明专利]一种蛋白质亚型分析方法-CN202010987710.3在审
发明人：刘睿;李紫嫣;吕弋 -专利权人：四川大学
申请日： 2020-09-18 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： G01N27/626 文献下载
摘要：本发明的目的是提供一种对甲胎蛋白及其异质体的稳定同位素双信号协同检测的方法。本发明的原理是：将作为抗原捕获结构的AFP抗体和磁性微球组装在一起，目标物AFP及其异质体AFP‑L3均可与其捕获抗体发生免疫反应。与4‑巯基苯基硼酸（MPBA）连接的AuNPs作为总AFP的信号报告，MPBA可以通过将AFP‑L3中的硼酸基团与二羟基基团酯化捕获AFP。同时，AgNPs通过静电作用与LCA连接，即可以通过凝集素和岩藻糖位点的相互作用识别AFP‑L3。酸消解后，利用电感耦合等离子体质谱仪协同检测的优点可以实现对甲胎蛋白异质体比率的高灵敏稳定准确定量分析，可用于实际血清样本检测。
一种蛋白质分析方法

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