本发明公开一种人源OTOP1基因的真核重组质粒,其由以下步骤制备得到:(1)将OTOP1基因cDNA序列与FLAG标签序列连接,得到如SEQ ID No.1所示的FLAG‑OTOP1基因序列;(2)将步骤(1)得到的序列插入到真核表达载体的多克隆酶切位点处,即得到所述真核重组质粒。本发明还公开稳定表达重组人源酸味受体OTOP1蛋白的细胞系,其包含上述人源OTOP1基因的真核重组质粒。本发明还公开了所述细胞系的构建过程及酸味受体OTOP1蛋白在细胞中的定位和表达。本发明可在细胞水平检测外源酸味剂的“酸度”,建立了一种可以快速、高效、灵敏检测酸味物质的方法,具有好的应用前景。
本发明公开了一种用于宫颈癌相关基因甲基化检测的引物探针组合和试剂盒及其应用,其包括用于检测GPR98、SLC46A3和PAX1基因甲基化的引物对和探针以及内参ACTB的引物对和探针,所述引物对和探针的序列如SEQ ID No.1~SEQ ID No.12所示。本发明还提供了一种含有上述引物对和探针的试剂盒及其应用,该应用方法对经核酸提取和亚硫酸盐转化后的样本DNA进行QPCR检测,依据扩增后的荧光信号相对强度判定样本是否为宫颈癌病变样本。与常规的宫颈癌检测方法相比,本发明的方法具有无创、快速、灵敏和特异性好等特点,能在癌变早期对宫颈癌进行精准检测。